| 摘要 | 第1-9页 |
| ABSTRACT | 第9-11页 |
| 缩略词表 | 第11-12页 |
| 1 前言 | 第12-24页 |
| ·研究问题的由来 | 第12-13页 |
| ·文献综述 | 第13-23页 |
| ·miRNA简介 | 第13-16页 |
| ·miRNA的发现、特征及其命名 | 第13-14页 |
| ·miRNA的生物发生过程及其作用机制 | 第14-16页 |
| ·miRNA对发育事件的调控作用 | 第16-19页 |
| ·miRNA对发育时序的调控 | 第16页 |
| ·miRNA对肌肉发育的调控 | 第16-17页 |
| ·miRNA对神经系统发育的调控 | 第17页 |
| ·miRNA对胚胎早期发育的调控 | 第17-18页 |
| ·miRNA对生殖发育的调控 | 第18页 |
| ·miRNA在其它组织器官发育过程中的作用 | 第18-19页 |
| ·miRNA表达的检测技术 | 第19-23页 |
| ·Northern blot | 第19页 |
| ·ISH | 第19-20页 |
| ·基因芯片 | 第20-21页 |
| ·RT-PCR | 第21-22页 |
| ·测序法 | 第22-23页 |
| ·研究目的和意义 | 第23-24页 |
| 2 材料与方法 | 第24-41页 |
| ·材料 | 第24-28页 |
| ·样品 | 第24页 |
| ·用于克隆的DNA样品 | 第24页 |
| ·用于时间表达谱分析的鸡胚样品 | 第24页 |
| ·用于空间表达模式分析的鸡胚样品 | 第24页 |
| ·所用试剂和试剂盒 | 第24-27页 |
| ·主要试剂和试剂盒 | 第24-25页 |
| ·主要试剂的配制 | 第25-27页 |
| ·主要仪器设备 | 第27页 |
| ·生物信息学分析相关的软件和数据库 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-41页 |
| ·鸡新miRNAs的结构分析 | 第28-29页 |
| ·鸡新miRNAs的染色体物理定位 | 第28页 |
| ·miR-363和363~*前体结构的克隆 | 第28页 |
| ·鸡新miRNAs的前体结构预测 | 第28页 |
| ·miR-363和miR-363~*、miR-551b前体的同源性分析 | 第28-29页 |
| ·鸡胚DNA、RNA的提取及性别鉴定 | 第29-30页 |
| ·DNA的提取及性别鉴定 | 第29页 |
| ·鸡胚性腺总RNA的提取及质量检测 | 第29-30页 |
| ·时间表达谱分析 | 第30-36页 |
| ·RNA加尾以及引物延伸的RT-PCR方法扩增miRNAs | 第30-33页 |
| ·相关引物的设计 | 第30-32页 |
| ·总RNA的纯化、加尾以及cDNA第一链的合成 | 第32-33页 |
| ·茎环状引物的RT-PCR方法扩增miRNAs | 第33-34页 |
| ·相关引物的设计 | 第33页 |
| ·cDNA第一链的合成 | 第33-34页 |
| ·miRNAs的扩增、检测以及半定量分析 | 第34-36页 |
| ·空间表达模式分析 | 第36-41页 |
| ·探针的合成以及纯化 | 第36-38页 |
| ·斑点杂交检测探针标记效率和量 | 第38页 |
| ·胚胎干粉的制备以及Fab片段的预吸附 | 第38-39页 |
| ·WISH程序 | 第39-41页 |
| 3 结果与分析 | 第41-58页 |
| ·鸡新MIRNAs的结构分析 | 第41-45页 |
| ·鸡新miRNAs的染色体物理定位 | 第41页 |
| ·miR-363和363~*前体结构的克隆 | 第41-42页 |
| ·鸡新miRNAs的前体结构预测 | 第42-43页 |
| ·miR-363(miR-363~*)和miR-551b前体的同源性分析 | 第43-45页 |
| ·鸡胚性别鉴定以及RNA提取 | 第45-46页 |
| ·时间表达谱分析 | 第46-54页 |
| ·miR-363和363~*的表达及比较 | 第46-48页 |
| ·雌性高表达的miRNAs | 第48-50页 |
| ·雄性高表达的miRNAs | 第50-53页 |
| ·其它miRNAs的表达 | 第53-54页 |
| ·空间表达模式分析 | 第54-58页 |
| ·斑点杂交结果 | 第54-55页 |
| ·gga-miR-363的表达 | 第55-56页 |
| ·gga-miR-1810的表达 | 第56-58页 |
| 4 讨论 | 第58-63页 |
| ·MIRNA的保守性 | 第58页 |
| ·新MIRNA的确认 | 第58-59页 |
| ·MIRNA的表达谱 | 第59-60页 |
| ·MIRNAISH方法的改进 | 第60页 |
| ·早期鸡胚性分化相关候选MIRNAs的功能分析 | 第60-63页 |
| ·miR-363功能的预测 | 第60-61页 |
| ·miR-1810功能的预测 | 第61-62页 |
| ·miR-200b、miR-1599和miR-551b功能的预测 | 第62-63页 |
| 5 小结 | 第63-65页 |
| ·本研究所取得的结果 | 第63页 |
| ·本研究的创新点和特色 | 第63-64页 |
| ·下一步需要研究的问题 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-73页 |
| 致谢 | 第73-74页 |
| 在读期间发表的论文 | 第74页 |
