| 致谢 | 第1-7页 |
| 摘要 | 第7-8页 |
| 1. 文献综述 | 第8-12页 |
| ·研究烟碱的意义 | 第8页 |
| ·烟碱的生物合成 | 第8-9页 |
| ·影响烟碱合成的因素 | 第9-10页 |
| ·氮素对烟碱合成的影响 | 第9页 |
| ·打顶对烟碱合成的影响 | 第9-10页 |
| ·基因差异表达的研究方法——抑制性消减杂交(SSH)技术 | 第10-12页 |
| 2. 引言 | 第12-14页 |
| ·研究的依据和目的 | 第12-13页 |
| ·研究的内容和技术路线 | 第13-14页 |
| 3. 材料与方法 | 第14-26页 |
| ·材料、试剂与仪器 | 第14页 |
| ·材料 | 第14页 |
| ·主要试剂 | 第14页 |
| ·主要仪器 | 第14页 |
| ·实验方法 | 第14-26页 |
| ·总RNA的提取 | 第14-15页 |
| ·mRNA的分离 | 第15页 |
| ·消减文库的构建 | 第15-23页 |
| ·cDNA第一条链的制备 | 第15-16页 |
| ·cDNA第二链的合成 | 第16-17页 |
| ·cDNA检测 | 第17页 |
| ·Rsa Ⅰ酶切 | 第17-18页 |
| ·接头连接 | 第18-19页 |
| ·连接效率检测 | 第19-20页 |
| ·第一次杂交 | 第20页 |
| ·第二次杂交 | 第20-21页 |
| ·选择性PCR扩增 | 第21-22页 |
| ·SSH第二次PCR产物的纯化 | 第22-23页 |
| ·消减cDNA文库的筛选(T/A克隆法) | 第23-24页 |
| ·连接 | 第23页 |
| ·转化 | 第23页 |
| ·阳性克隆的挑选与扩增 | 第23-24页 |
| ·反向Northern杂交筛选 | 第24-26页 |
| ·杂交点阵膜的制备 | 第24页 |
| ·探针标记 | 第24-25页 |
| ·检测探针效率 | 第25页 |
| ·预杂交和杂交 | 第25-26页 |
| ·差异筛选 | 第26页 |
| 4. 结果与分析 | 第26-37页 |
| ·总RNA质量的检测 | 第26页 |
| ·cDNA检测以及RSA Ⅰ酶切 | 第26-27页 |
| ·连接效率检测 | 第27-28页 |
| ·SSH-cDNA文库的构建 | 第28页 |
| ·SSH-cDNA文库的筛选 | 第28-31页 |
| ·菌落PCR验证 | 第28-29页 |
| ·差异表达基因片段的反向Northern验证 | 第29-31页 |
| ·反向Northern杂交探针效率检测 | 第29-30页 |
| ·反向Northern验证 | 第30-31页 |
| ·ESTs生物信息学分析 | 第31-36页 |
| ·序列比对和预测结果 | 第31-33页 |
| ·ESTs序列功能注释(Functional Annotation) | 第33-36页 |
| ·3个EST的RT-PCR分析 | 第36-37页 |
| 5. 结论与讨论 | 第37-39页 |
| 参考文献 | 第39-45页 |
| ABSTRACT | 第45-46页 |