农杆菌介导的玉米转化体系的优化与抗蚜虫基因的转化研究
| 致谢 | 第1-8页 |
| 摘要 | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第9-18页 |
| 1 玉米的遗传转化概况 | 第9页 |
| 2 遗传转化方法 | 第9-15页 |
| ·遗传转化类型 | 第10-11页 |
| ·农杆菌介导的遗传转化在玉米上的应用 | 第11页 |
| ·农杆菌转化的范围及优点 | 第11-12页 |
| ·影响转化的因素 | 第12-15页 |
| ·外植体 | 第12页 |
| ·农杆菌的培养及浓度 | 第12-13页 |
| ·共培养时间 | 第13页 |
| ·转化细胞的选择 | 第13页 |
| ·标记基因 | 第13-15页 |
| 3 农杆菌转化存在的问题 | 第15页 |
| 4 玉米抗蚜虫的研究进展 | 第15-16页 |
| 5 研究意义 | 第16-18页 |
| 第二章 胚性愈伤组织的诱导、继代与再生 | 第18-27页 |
| 1 材料与方法 | 第18-20页 |
| ·材料 | 第18页 |
| ·培养基 | 第18-19页 |
| ·方法 | 第19-20页 |
| ·愈伤组织的诱导 | 第19-20页 |
| ·愈伤组织的继代 | 第20页 |
| ·分化预处理方法的比较 | 第20页 |
| 2 结果与分析 | 第20-25页 |
| ·基因型对愈伤组织诱导的影响 | 第20-22页 |
| ·不同基因型的继代能力 | 第22页 |
| ·不同分化预处理对再生率的影响 | 第22-24页 |
| ·不同分化预处理对再生进程的影响 | 第24-25页 |
| 3 讨论 | 第25-27页 |
| 第三章 玉米愈伤组织对抗生素的敏感性测定 | 第27-36页 |
| 1 材料与方法 | 第27-29页 |
| ·材料 | 第27页 |
| ·基本培养基 | 第27页 |
| ·各种抗生素的配制 | 第27-28页 |
| ·方法 | 第28-29页 |
| ·愈伤组织对Kan的敏感性测定 | 第28-29页 |
| ·愈伤组织对G418的敏感性测定 | 第29页 |
| ·Cef对愈伤组织继代及再生的影响 | 第29页 |
| ·愈伤组织对PPT的敏感性测定 | 第29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-34页 |
| ·Kan对愈伤组织生长及分化的影响 | 第30-31页 |
| ·G418对愈伤生长和分化的影响 | 第31-32页 |
| ·PPT对愈伤组织生长及分化的影响 | 第32-33页 |
| ·Cef对愈伤组织生长及分化的影响 | 第33-34页 |
| 3 讨论 | 第34-36页 |
| ·Kan、PPT、G418筛选浓度的确定 | 第34页 |
| ·cef筛选浓度的确定 | 第34-36页 |
| 第四章 农杆菌转化条件的优化及抗蚜虫基因的转化 | 第36-56页 |
| 1 材料和方法 | 第36-38页 |
| ·材料 | 第36页 |
| ·酶和试剂 | 第36页 |
| ·培养基的配制 | 第36-37页 |
| ·农杆菌的保存 | 第37页 |
| ·GUS基因组织化学染色 | 第37-38页 |
| ·玉米愈伤组织的转化和筛选 | 第38页 |
| 2 载体的构建及转化 | 第38-45页 |
| ·引物 | 第38-39页 |
| ·PartEβF质粒的扩繁 | 第39-45页 |
| ·大肠杆菌感受态的制备及转化 | 第39-41页 |
| ·基因序列的扩增与质粒的提取 | 第41-42页 |
| ·载体的构建 | 第42-44页 |
| ·表达载体转入农杆菌 | 第44-45页 |
| 3 农杆菌转化的部分条件的优化 | 第45-46页 |
| ·Cef抗菌素对农杆菌抑制效果的测定 | 第45页 |
| ·不同条件对转化的影响(转化gus基因) | 第45-46页 |
| ·乙酰丁香酮(AS)对遗传转化的影响 | 第45页 |
| ·不同浸染液对转化的影响 | 第45-46页 |
| ·浸染时间对转化的影响 | 第46页 |
| ·侵染后不同处理对转化的影响 | 第46页 |
| 4 结果与分析 | 第46-51页 |
| ·抗生素对农杆菌的抑制作用 | 第46-47页 |
| ·不同因素对玉米遗传转化的影响 | 第47-51页 |
| ·浸染与共培养时加入AS对玉米遗传转化的影响 | 第47-48页 |
| ·浸染时用不同浸染液对转化的影响 | 第48-50页 |
| ·浸染时间对转化的影响 | 第50页 |
| ·基因型对转化的影响 | 第50-51页 |
| ·共培养后不同处理对转化的影响 | 第51页 |
| 5 对EβF合成酶基因的转化 | 第51-53页 |
| ·农杆菌转化基因的试验流程 | 第51-52页 |
| ·对EβF合成酶基因进行转化 | 第52-53页 |
| 6 讨论 | 第53-56页 |
| 参考文献 | 第56-63页 |
| ABSTRACT | 第63-64页 |
