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猫疱疹病毒HR-1毒株的分离鉴定及其间接ELISA方法的建立

附表第5-6页
摘要第6-7页
abstract第7-8页
英文缩略表第12-13页
第一章 引言第13-19页
    1.1 猫疱疹病毒生物学特征第13-15页
        1.1.1 猫疱疹病毒概述第13页
        1.1.2 病毒粒子及其理化特性第13页
        1.1.3 FHV-1基因组第13-14页
        1.1.4 囊膜糖蛋白第14-15页
    1.2 流行病学第15-16页
    1.3 临床症状第16页
    1.4 病理剖检变化第16页
    1.5 诊断及防控第16-18页
        1.5.1 病毒分离第17页
        1.5.2 分子生物学诊断第17页
        1.5.3 血清学诊断第17页
        1.5.4 防治第17-18页
    1.6 目的意义第18-19页
第二章 FHV-1分离鉴定及致病性分析第19-29页
    2.1 材料和方法第19-23页
        2.1.1 病料样品来源第19页
        2.1.2 细胞、实验动物第19页
        2.1.3 实验试剂、耗材第19页
        2.1.4 主要仪器第19页
        2.1.5 引物合成第19-20页
        2.1.6 病毒分离第20页
        2.1.7 蚀斑纯化第20页
        2.1.8 PCR鉴定及测序第20-22页
        2.1.9 IFA鉴定第22页
        2.1.10 动物回归试验第22-23页
    2.2 结果第23-27页
        2.2.1 病毒分离纯化及TCID_(50)测定第23页
        2.2.2 透射电镜观察第23-24页
        2.2.3 PCR鉴定第24页
        2.2.4 IFA鉴定第24页
        2.2.5 HR-1感染家猫临床症状观察第24-25页
        2.2.6 病理组织学变化第25-26页
        2.2.7 脏器中病毒载量检测第26页
        2.2.8 拭子样品病毒载量检测第26-27页
    2.3 讨论第27-29页
第三章 FHV-1 gD重组蛋白表达及抗原性分析第29-36页
    3.1 材料和方法第29-33页
        3.1.1 主要材料第29页
        3.1.2 主要试剂第29页
        3.1.3 主要仪器第29页
        3.1.4 FHV-1 gD抗原表位及跨膜区预测第29页
        3.1.5 引物设计与合成第29-30页
        3.1.6 重组质粒的构建第30-31页
        3.1.7 目的蛋白的诱导表达第31页
        3.1.8 目的蛋白的纯化第31-32页
        3.1.9 重组蛋白浓度测定第32页
        3.1.10 Western Blot鉴定重组蛋白抗原性第32-33页
    3.2 结果第33-35页
        3.2.1 FHV-1 gD糖蛋白跨膜区及主要抗原表位区预测分析第33页
        3.2.2 目的基因的PCR的扩增第33-34页
        3.2.3 目的蛋白gD-483的可溶性表达第34页
        3.2.4 目的蛋白gD-483的纯化及浓度测定第34页
        3.2.5 Western Blot鉴定gD-483的抗原性第34-35页
    3.3 讨论第35-36页
第四章 FHV-1间接ELISA诊断方法的建立第36-44页
    4.1 材料和方法第36-39页
        4.1.1 血清第36页
        4.1.2 主要试剂第36页
        4.1.3 常规间接ELISA方法步骤第36页
        4.1.4 间接ELISA方法检测条件优化第36-37页
        4.1.5 血清阴阳性临界值的确立第37-38页
        4.1.6 间接ELISA诊断方法效果评价第38页
        4.1.7 间接ELISA方法的初步应用第38-39页
    4.2 结果第39-42页
        4.2.1 间接ELISA条件优化结果第39-41页
        4.2.2 血清阴阳性临界值的确立第41页
        4.2.3 间接ELISA效果评价第41-42页
        4.2.4 临床血清样品检测第42页
    4.3 讨论第42-44页
第五章 全文结论第44-45页
参考文献第45-51页
致谢第51-52页
作者简历第52页

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