附表 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-7页 |
abstract | 第7-8页 |
英文缩略表 | 第12-13页 |
第一章 引言 | 第13-19页 |
1.1 猫疱疹病毒生物学特征 | 第13-15页 |
1.1.1 猫疱疹病毒概述 | 第13页 |
1.1.2 病毒粒子及其理化特性 | 第13页 |
1.1.3 FHV-1基因组 | 第13-14页 |
1.1.4 囊膜糖蛋白 | 第14-15页 |
1.2 流行病学 | 第15-16页 |
1.3 临床症状 | 第16页 |
1.4 病理剖检变化 | 第16页 |
1.5 诊断及防控 | 第16-18页 |
1.5.1 病毒分离 | 第17页 |
1.5.2 分子生物学诊断 | 第17页 |
1.5.3 血清学诊断 | 第17页 |
1.5.4 防治 | 第17-18页 |
1.6 目的意义 | 第18-19页 |
第二章 FHV-1分离鉴定及致病性分析 | 第19-29页 |
2.1 材料和方法 | 第19-23页 |
2.1.1 病料样品来源 | 第19页 |
2.1.2 细胞、实验动物 | 第19页 |
2.1.3 实验试剂、耗材 | 第19页 |
2.1.4 主要仪器 | 第19页 |
2.1.5 引物合成 | 第19-20页 |
2.1.6 病毒分离 | 第20页 |
2.1.7 蚀斑纯化 | 第20页 |
2.1.8 PCR鉴定及测序 | 第20-22页 |
2.1.9 IFA鉴定 | 第22页 |
2.1.10 动物回归试验 | 第22-23页 |
2.2 结果 | 第23-27页 |
2.2.1 病毒分离纯化及TCID_(50)测定 | 第23页 |
2.2.2 透射电镜观察 | 第23-24页 |
2.2.3 PCR鉴定 | 第24页 |
2.2.4 IFA鉴定 | 第24页 |
2.2.5 HR-1感染家猫临床症状观察 | 第24-25页 |
2.2.6 病理组织学变化 | 第25-26页 |
2.2.7 脏器中病毒载量检测 | 第26页 |
2.2.8 拭子样品病毒载量检测 | 第26-27页 |
2.3 讨论 | 第27-29页 |
第三章 FHV-1 gD重组蛋白表达及抗原性分析 | 第29-36页 |
3.1 材料和方法 | 第29-33页 |
3.1.1 主要材料 | 第29页 |
3.1.2 主要试剂 | 第29页 |
3.1.3 主要仪器 | 第29页 |
3.1.4 FHV-1 gD抗原表位及跨膜区预测 | 第29页 |
3.1.5 引物设计与合成 | 第29-30页 |
3.1.6 重组质粒的构建 | 第30-31页 |
3.1.7 目的蛋白的诱导表达 | 第31页 |
3.1.8 目的蛋白的纯化 | 第31-32页 |
3.1.9 重组蛋白浓度测定 | 第32页 |
3.1.10 Western Blot鉴定重组蛋白抗原性 | 第32-33页 |
3.2 结果 | 第33-35页 |
3.2.1 FHV-1 gD糖蛋白跨膜区及主要抗原表位区预测分析 | 第33页 |
3.2.2 目的基因的PCR的扩增 | 第33-34页 |
3.2.3 目的蛋白gD-483的可溶性表达 | 第34页 |
3.2.4 目的蛋白gD-483的纯化及浓度测定 | 第34页 |
3.2.5 Western Blot鉴定gD-483的抗原性 | 第34-35页 |
3.3 讨论 | 第35-36页 |
第四章 FHV-1间接ELISA诊断方法的建立 | 第36-44页 |
4.1 材料和方法 | 第36-39页 |
4.1.1 血清 | 第36页 |
4.1.2 主要试剂 | 第36页 |
4.1.3 常规间接ELISA方法步骤 | 第36页 |
4.1.4 间接ELISA方法检测条件优化 | 第36-37页 |
4.1.5 血清阴阳性临界值的确立 | 第37-38页 |
4.1.6 间接ELISA诊断方法效果评价 | 第38页 |
4.1.7 间接ELISA方法的初步应用 | 第38-39页 |
4.2 结果 | 第39-42页 |
4.2.1 间接ELISA条件优化结果 | 第39-41页 |
4.2.2 血清阴阳性临界值的确立 | 第41页 |
4.2.3 间接ELISA效果评价 | 第41-42页 |
4.2.4 临床血清样品检测 | 第42页 |
4.3 讨论 | 第42-44页 |
第五章 全文结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-51页 |
致谢 | 第51-52页 |
作者简历 | 第52页 |