摘要 | 第3-5页 |
abstract | 第5-6页 |
第一章 绪论 | 第13-21页 |
1.1 MFN2 基因的发现及蛋白结构 | 第13页 |
1.2 MFN2 基因的功能研究 | 第13-15页 |
1.2.1 自噬与Mfn2 的关系 | 第14页 |
1.2.2 细胞周期与Mfn2 的关系 | 第14页 |
1.2.3 细胞凋亡与Mfn2 的关系 | 第14-15页 |
1.3 MFN2 与疾病的关系 | 第15-19页 |
1.3.1 Mfn2 与原发性高血压的关联 | 第15页 |
1.3.2 Mfn2 与肥胖的关联 | 第15页 |
1.3.3 Mfn2 与糖尿病的关联 | 第15-16页 |
1.3.4 Mfn2 与癌症的关联 | 第16-19页 |
1.4 肺癌 | 第19-21页 |
第二章 实验材料和方法 | 第21-39页 |
2.1 主要设备和试剂 | 第21-24页 |
2.2 实验方法步骤 | 第24-39页 |
2.2.1 免疫组化染色 | 第24-25页 |
2.2.2 细胞周期检测 | 第25页 |
2.2.3 细胞凋亡检测 | 第25-26页 |
2.2.4 细胞侵袭实验 | 第26页 |
2.2.5 细胞划痕实验 | 第26-27页 |
2.2.6 细胞培养及慢病毒感染 | 第27-28页 |
2.2.7 Cellomics细胞增殖筛选 | 第28-29页 |
2.2.8 总RNA提取、cDNA制备和实时定量PCR | 第29-32页 |
2.2.9 人源MFN2 基因shRNA的设计及慢病毒载体的构建 | 第32-34页 |
2.2.10 慢病毒包装 | 第34-35页 |
2.2.11 MTT实验 | 第35页 |
2.2.12 蛋白印迹实验(Western Blot) | 第35-36页 |
2.2.13 裸鼠成瘤模型的构建 | 第36-37页 |
2.2.14 基因表达谱芯片分析 | 第37-39页 |
第三章 实验结果 | 第39-75页 |
3.1 MFN2 基因在肺腺癌组织中异常高表达 | 第39-43页 |
3.2 慢病毒介导的RNAi策略可有效抑制人肺腺癌细胞系A549中MFN2 基因的表达 | 第43-50页 |
3.3 人肺腺癌细胞A549 中敲除MFN2 抑制细胞增殖 | 第50-54页 |
3.4 人肺腺癌细胞A549 中敲减MFN2 后抑制细胞侵袭能力 | 第54-56页 |
3.5 敲减MFN2 抑制人肺腺癌细胞A549 在异位移植裸鼠肿瘤模型中的生长 | 第56-59页 |
3.6 MFN2 基因敲减导致人肺腺癌细胞A549 中的基因表达网络紊乱 | 第59-62页 |
3.7 MFN2 调控MLF1IP表达影响人肺腺癌细胞的增殖 | 第62-66页 |
3.8 MFN2 下游靶基因MLF1IP在肺腺癌组织中高表达 | 第66-75页 |
第四章 讨论 | 第75-78页 |
第五章 结论 | 第78-79页 |
参考文献 | 第79-87页 |
致谢 | 第87-88页 |
学术论文和科研成果目录 | 第88-92页 |