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绞股蓝籽油抗肿瘤活性成分分析及生物学功能研究

摘要第3-6页
Abstract第6-8页
英文缩写词表第16-17页
第1章 绪论第17-51页
    1.1 绞股蓝研究概述第17-24页
        1.1.1 绞股蓝种质资源研究第17-18页
        1.1.2 绞股蓝药用研究历史第18-19页
        1.1.3 绞股蓝主要化学成分的研究第19-22页
        1.1.4 绞股蓝药理作用的研究第22-24页
    1.2 绞股蓝种子的研究进展第24-25页
    1.3 功能性油脂提取技术的研究第25-28页
    1.4 功能性植物油脂的研究进展第28-30页
        1.4.1 多不饱和脂肪酸的生理活性第28-29页
        1.4.2 非脂肪酸类活性成分的生理活性第29页
        1.4.3 代表性功能性植物油脂的研究及应用第29-30页
    1.5 共轭亚麻酸的研究进展第30-35页
        1.5.1 共轭亚麻酸简介第30-31页
        1.5.2 共轭亚麻酸的来源及制备第31-32页
        1.5.3 共轭亚麻酸的稳定性第32-33页
        1.5.4 共轭亚麻酸的生理功能第33-35页
    1.6 本研究的立论依据、研究内容、目的及意义第35-38页
    1.7 参考文献第38-51页
第2章 绞股蓝籽油基本属性及主要成分分析第51-69页
    2.1 前言第51页
    2.2 材料和方法第51-56页
        2.2.1 材料第51-52页
        2.2.2 仪器设备第52页
        2.2.3 绞股蓝种子预处理第52页
        2.2.4 绞股蓝种子主要成分分析第52-53页
        2.2.5 油脂的快速提取第53页
        2.2.6 油脂特征常数分析第53-54页
        2.2.7 总脂肪酸含量测定第54页
        2.2.8 油脂脂肪酸组成分析第54-55页
        2.2.9 甘油三酯sn-2位脂肪酸组成分析第55页
        2.2.10 挥发性成分分析第55-56页
        2.2.11 不皂化物成分分析第56页
        2.2.12 红外光谱(FT-IR)分析第56页
        2.2.13 热重-差热(TG-DTA)分析第56页
        2.2.14 数据分析第56页
    2.3 结果与讨论第56-66页
        2.3.1 绞股蓝种子主要组成成分分析第56-57页
        2.3.2 绞股蓝籽油理化常数测定第57-58页
        2.3.3 绞股蓝籽油脂肪酸组成分析第58-59页
        2.3.4 绞股蓝籽油甘油三酯sn-2位脂肪酸组成分析第59-61页
        2.3.5 绞股蓝籽油挥发性成分分析第61-62页
        2.3.6 绞股蓝籽油不皂化物成分分析第62-63页
        2.3.7 绞股蓝籽油红外光谱(FT-IR)分析第63-64页
        2.3.8 绞股蓝籽油热重-差热(TG-DTA)分析第64页
        2.3.9 讨论第64-66页
    2.4 本章小结第66-67页
    2.5 参考文献第67-69页
第3章 绞股蓝籽油提取工艺研究第69-87页
    3.1 前言第69-70页
    3.2 材料和方法第70-72页
        3.2.1 材料第70页
        3.2.2 仪器设备第70页
        3.2.3 油脂的提取第70-71页
        3.2.4 实验设计第71页
        3.2.5 绞股蓝籽油提取率的计算第71页
        3.2.6 绞股蓝种子粉表面微观结构的观察第71页
        3.2.7 绞股蓝籽油理化常数的比较第71-72页
        3.2.8 绞股蓝籽油脂肪酸组成的比较第72页
        3.2.9 数据分析第72页
    3.3 结果与讨论第72-83页
        3.3.1 单因素试验结果第72-75页
        3.3.2 响应面试验设计及运行结果第75-76页
        3.3.3 响应面二次回归模型拟合及方差分析第76-77页
        3.3.4 各参数的交互作用第77-79页
        3.3.5 最佳萃取工艺的验证试验第79页
        3.3.6 不同提取方法对绞股蓝种子粉表面微观结构的影响第79-80页
        3.3.7 不同提取方法对绞股蓝籽油理化常数的影响第80-81页
        3.3.8 不同提取方法对绞股蓝籽油脂肪酸组成的影响第81-82页
        3.3.9 讨论第82-83页
    3.4 小结第83-84页
    3.5 参考文献第84-87页
第4章 绞股蓝籽油食品安全性毒理学评价第87-93页
    4.1 前言第87页
    4.2 材料和方法第87-88页
        4.2.1 实验材料第87页
        4.2.2 仪器设备第87页
        4.2.3 急性经口毒性试验第87-88页
        4.2.4 小鼠骨髓嗜多染红细胞微核试验第88页
        4.2.5 小鼠精子畸形试验第88页
        4.2.6 数据分析第88页
    4.3 结果与讨论第88-91页
        4.3.1 急性毒性试验第88-89页
        4.3.2 骨髓嗜多染红细胞微核试验第89-90页
        4.3.3 精子畸形试验第90页
        4.3.4 讨论第90-91页
    4.4 小结第91页
    4.5 参考文献第91-93页
第5章 绞股蓝籽油体内外抗氧化活性研究第93-111页
    5.1 前言第93-94页
    5.2 材料和方法第94-97页
        5.2.1 实验材料第94-95页
        5.2.2 仪器设备第95页
        5.2.3 体外抗氧化活性评价试验第95-96页
        5.2.4 体内抗氧化活性评价试验第96-97页
        5.2.5 数据分析第97页
    5.3 结果与讨论第97-106页
        5.3.1 绞股蓝籽油清除DPPH自由基能力的测定第97-98页
        5.3.2 绞股蓝籽油清除羟基自由基能力的测定第98-99页
        5.3.3 绞股蓝籽油亚铁还原能力的测定第99-100页
        5.3.4 绞股蓝籽油对衰老小鼠体重的影响第100页
        5.3.5 绞股蓝籽油对衰老小鼠脏器指数的影响第100页
        5.3.6 绞股蓝籽油对小鼠血清生化指标的影响第100-103页
        5.3.7 绞股蓝籽油对小鼠肝脏抗氧化活性指标的影响第103-105页
        5.3.8 讨论第105-106页
    5.4 本章小结第106-107页
    5.5 参考文献第107-111页
第6章 绞股蓝籽油抗肿瘤活性成分筛选第111-123页
    6.1 前言第111页
    6.2 材料和方法第111-115页
        6.2.1 实验材料第111-112页
        6.2.2 肿瘤细胞来源及培养第112页
        6.2.3 试剂配制第112-113页
        6.2.4 仪器设备第113页
        6.2.5 细胞分组及加药处理第113-114页
        6.2.6 正常细胞的分离及制备第114页
        6.2.7 台盼蓝拒染法检测细胞存活率第114页
        6.2.8 MTT法检测细胞存活率第114-115页
        6.2.9 数据分析第115页
    6.3 结果与讨论第115-120页
        6.3.1 GPSO对肿瘤细胞存活率的影响第115-116页
        6.3.2 GPFA对肿瘤细胞存活率的影响第116-119页
        6.3.3 GPUSM对肿瘤细胞存活率的影响第119-120页
        6.3.4 讨论第120页
    6.4 本章小结第120-121页
    6.5 参考文献第121-123页
第7章 绞股蓝籽油脂肪酸杀伤肿瘤细胞作用机制探讨第123-149页
    7.1 前言第123页
    7.2 材料和方法第123-130页
        7.2.1 实验材料第123页
        7.2.2 肿瘤细胞来源及培养第123-124页
        7.2.3 试剂配制第124页
        7.2.4 仪器设备第124页
        7.2.5 荧光染色法观察细胞核形态变化第124-125页
        7.2.6 彗星电泳检测细胞DNA损伤第125页
        7.2.7 流式细胞术检测细胞DNA的片段化第125页
        7.2.8 扫描电子显微镜观察细胞膜表面超微结构第125-126页
        7.2.9 荧光偏振法检测细胞膜流动性第126页
        7.2.10 流式细胞术检测细胞质膜通透性第126页
        7.2.11 流式细胞术检测细胞质膜电位第126-127页
        7.2.12 流式细胞术检测细胞内钙离子浓度第127页
        7.2.13 细胞内活性氧水平的检测第127页
        7.2.14 细胞内谷胱甘肽及丙二醛含量的检测第127-128页
        7.2.15 细胞线粒体膜电位的检测第128页
        7.2.16 细胞凋亡率的检测(Annexin V-PE/7-AAD试验)第128页
        7.2.17 免疫荧光观察凋亡相关因子的定位变化第128-129页
        7.2.18 免疫印迹检测凋亡相关蛋白的表达变化第129-130页
        7.2.19 活性氧抑制剂实验第130页
        7.2.20 数据分析第130页
    7.3 结果与讨论第130-146页
        7.3.1 GPFA对白血病细胞的选择性杀伤作用第130-131页
        7.3.2 GPFA对白血病细胞形态及细胞核形态的影响第131-133页
        7.3.3 GPFA对K562细胞DNA的损伤作用第133-134页
        7.3.4 GPFA对U937细胞DNA片段化的影响第134-135页
        7.3.5 GPFA对U937细胞膜表面超微结构的影响第135页
        7.3.6 GPFA对K562细胞膜流动性的影响第135-136页
        7.3.7 GPFA对K562细胞质膜电位及胞内钙离子浓度的影响第136-137页
        7.3.8 GPFA对K562细胞内活性氧水平的影响第137-139页
        7.3.9 GPFA对K562细胞线粒体膜电位的影响第139-140页
        7.3.10 GPFA对K562细胞凋亡率的影响第140-141页
        7.3.11 GPFA对K562细胞凋亡相关蛋白表达的影响第141-142页
        7.3.12 活性氧抑制剂实验结果第142-146页
        7.3.13 讨论第146页
    7.4 本章小结第146-147页
    7.5 参考文献第147-149页
第8章 绞股蓝籽油对S180细胞离体及在体抗肿瘤作用研究第149-169页
    8.1 前言第149页
    8.2 材料和方法第149-153页
        8.2.1 实验材料第149页
        8.2.2 试剂配制第149-150页
        8.2.3 仪器设备第150页
        8.2.4 体外抗肿瘤活性的检测第150页
        8.2.5 S180荷瘤小鼠模型的建立第150-151页
        8.2.6 实验分组及给药处理第151页
        8.2.7 血清或组织中生化指标测定第151-152页
        8.2.8 肿瘤组织形态学观察第152-153页
        8.2.9 TUNEL试验第153页
        8.2.10 数据分析第153页
    8.3 结果与讨论第153-167页
        8.3.1 GPFA对S180细胞形态及细胞核形态的影响第153-154页
        8.3.2 GPFA对S180细胞DNA片段化的影响第154页
        8.3.3 GPFA对S180细胞质膜通透性及细胞膜表面超微结构的影响第154-155页
        8.3.4 GPFA对S180细胞膜流动性的影响第155-156页
        8.3.5 GPFA对S180细胞内活性氧水平及丙二醛含量的影响第156-157页
        8.3.6 GPFA对S180细胞凋亡率的影响第157-158页
        8.3.7 活性氧抑制剂实验第158-160页
        8.3.8 治疗型抗肿瘤实验结果第160-161页
        8.3.9 预防型抗肿瘤实验结果第161-163页
        8.3.10 GPSO对S180荷瘤小鼠肿瘤组织脂质过氧化水平的影响第163-164页
        8.3.11 GPSO对S180荷瘤小鼠肿瘤组织形态学影响第164-165页
        8.3.12 GPSO对S180荷瘤小鼠肿瘤组织细胞凋亡的影响第165-166页
        8.3.13 讨论第166-167页
    8.4 本章小结第167-168页
    8.5 参考文献第168-169页
总结与展望第169-173页
致谢第173-175页
攻读博士学位期间科研成果第175-176页

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