摘要 | 第5-7页 |
Abstract | 第7-8页 |
第一章 绪论 | 第13-27页 |
1.1 生物标志物在生物材料生物安全性评价方面的研究 | 第13-15页 |
1.2 金属镍/镍钛合金生物材料生物标志物的研究 | 第15-17页 |
1.2.1 金属镍/镍铁合金的生物相容性研究现状 | 第15页 |
1.2.2 基于传统分子生物学方法的镍/镍离子细胞毒性生物标志物的研究 | 第15-16页 |
1.2.3 基于生物组学方法的镍/镍离子细胞毒性生物标志物的研究 | 第16-17页 |
1.3 基于多组学技术的生物材料生物标志物筛选研究 | 第17-21页 |
1.3.1 生物组学技术简介 | 第17-19页 |
1.3.2 生物信息学在筛选生物材料生物标志物中的应用 | 第19-21页 |
1.4 验证实验在生物材料生物标志物中的应用 | 第21-22页 |
1.5 高内涵技术在生物标志物功能验证中的应用 | 第22-23页 |
1.6 本论文主要内容 | 第23-24页 |
1.7 参考文献 | 第24-27页 |
第二章 基于多组学的镍离子细胞毒性生物标志物的筛选 | 第27-44页 |
2.1 细胞毒性实验 | 第27-31页 |
2.1.1 实验原理 | 第27页 |
2.1.2 实验材料与仪器 | 第27-28页 |
2.1.3 主要溶液的配制 | 第28-29页 |
2.1.4 实验方法与步骤 | 第29页 |
2.1.5 实验结果与讨论 | 第29-31页 |
2.2 基于转录组测序技术的基因组学实验及基因生物标志物的初步筛选 | 第31-33页 |
2.2.1 实验原理 | 第31页 |
2.2.2 实验材料与试剂 | 第31-32页 |
2.2.3 主要溶液的配制 | 第32页 |
2.2.4 实验方法与步骤 | 第32-33页 |
2.2.5 差异表达基因筛选 | 第33页 |
2.3 差异表达蛋白质的筛选 | 第33-35页 |
2.3.1 镍离子作用L929细胞的差异表达蛋白质数据信息 | 第33-34页 |
2.3.2 差异表达蛋白质的筛选 | 第34-35页 |
2.4 基于基因组学和蛋白质组学的候选生物标志物联合筛选 | 第35-36页 |
2.5 差异表达代谢物的筛选 | 第36-37页 |
2.5.1 镍离子作用L929细胞的差异表达代谢物数据信息 | 第36页 |
2.5.2 差异表达代谢物的筛选 | 第36-37页 |
2.6 生物学通路分析 | 第37-41页 |
2.6.1 差异表达基因/蛋白质的通路分析 | 第37-40页 |
2.6.2 差异表达代谢物的通路分析 | 第40-41页 |
2.7 本章小结 | 第41-42页 |
2.8 参考文献 | 第42-44页 |
第三章 镍离子细胞毒性生物标志物的表达水平验证实验 | 第44-59页 |
3.1 RT-PCR实验 | 第44-48页 |
3.1.1 实验材料与仪器 | 第44页 |
3.1.2 主要溶液的配制 | 第44-45页 |
3.1.3 实验方法与步骤 | 第45-46页 |
3.1.4 实验结果与讨论 | 第46-48页 |
3.2 Western blot实验 | 第48-51页 |
3.2.1 Western Blot实验原理 | 第48页 |
3.2.2 实验材料与仪器 | 第48-49页 |
3.2.3 主要溶液的配制 | 第49页 |
3.2.4 实验方法与步骤 | 第49页 |
3.2.5 实验结果与讨论 | 第49-51页 |
3.3 RT-PCR实验与Western Blot实验结果联合分析 | 第51-52页 |
3.4 LC-MS/GC-MS实验 | 第52-56页 |
3.4.1 实验原理 | 第52-53页 |
3.4.2 实验材料与仪器 | 第53页 |
3.4.3 主要溶液的配制 | 第53页 |
3.4.4 实验方法与步骤 | 第53页 |
3.4.5 实验结果与讨论 | 第53-56页 |
3.5 本章小结 | 第56-57页 |
3.6 参考文献 | 第57-59页 |
第四章 镍离子细胞毒性生物标志物的功能水平验证实验 | 第59-75页 |
4.1 基因干扰/过表达稳定细胞株构建 | 第59-62页 |
4.1.1 实验材料与仪器 | 第60-61页 |
4.1.2 实验方法与步骤 | 第61页 |
4.1.3 实验结果与讨论 | 第61-62页 |
4.2 Uqcrb基因功能验证--氧化应激实验 | 第62-66页 |
4.2.1 实验原理 | 第62-63页 |
4.2.2 实验材料与仪器 | 第63页 |
4.2.3 主要溶液的配制 | 第63-64页 |
4.2.4 实验方法与步骤 | 第64页 |
4.2.5 实验结果与讨论 | 第64-66页 |
4.3 Uqcrb基因功能验证--线粒体膜电位检测实验 | 第66-70页 |
4.3.1 实验原理 | 第66-67页 |
4.3.2 实验材料与仪器 | 第67页 |
4.3.3 主要溶液的配制 | 第67-68页 |
4.3.4 实验方法与步骤 | 第68页 |
4.3.5 实验结果与讨论 | 第68-70页 |
4.4 Csf1基因功能验证---细胞增殖实验 | 第70-74页 |
4.4.1 实验材料与仪器 | 第70页 |
4.4.2 主要溶液的配制 | 第70页 |
4.4.3 实验方法与步骤 | 第70页 |
4.4.4 实验结果与讨论 | 第70-74页 |
4.5 本章小结 | 第74页 |
4.6 参考文献 | 第74-75页 |
第五章 镍离子细胞毒性基因-蛋白质-代谢物标志物关联性验证 | 第75-92页 |
5.1 生物信息学分析 | 第75-82页 |
5.1.1 生物学通路分析 | 第75-80页 |
5.1.2 三个层次共有的重要代谢通路分析 | 第80-82页 |
5.2 基因干扰/过表达稳定细胞株构建 | 第82-84页 |
5.2.1 实验材料与仪器 | 第83页 |
5.2.2 实验方法 | 第83页 |
5.2.3 实验结果 | 第83-84页 |
5.3 Western blot实验 | 第84-86页 |
5.3.1 实验材料与仪器 | 第84页 |
5.3.2 主要溶液的配制 | 第84页 |
5.3.3 实验方法与步骤 | 第84-85页 |
5.3.4 实验结果与讨论 | 第85-86页 |
5.4 LC-MS/GC-MS实验 | 第86-88页 |
5.4.1 实验材料与仪器 | 第86页 |
5.4.2 主要溶液的配制 | 第86页 |
5.4.3 实验方法与步骤 | 第86-87页 |
5.4.4 实验结果与讨论 | 第87-88页 |
5.5 镍离子细胞毒性基因-蛋白质-代谢物标志物关联性综合分析 | 第88-90页 |
5.6 本章小结 | 第90-91页 |
5.7 参考文献 | 第91-92页 |
第六章 总结与展望 | 第92-95页 |
6.1 总结 | 第92-93页 |
6.2 展望 | 第93-95页 |
攻读硕士期间发表论文情况 | 第95-96页 |
致谢 | 第96-97页 |
附录 | 第97-105页 |