| 摘要 | 第10-12页 |
| Abstract | 第12-13页 |
| 第一章 前言 | 第14-21页 |
| 1.1 神经胶质瘤概述 | 第14-16页 |
| 1.2 Tagln3概述 | 第16-20页 |
| 1.2.1 Tagln3蛋白结构 | 第16页 |
| 1.2.2 Tagln3的功能及作用机制 | 第16-18页 |
| 1.2.3 Tagln3与脑部疾病 | 第18-19页 |
| 1.2.4 Tagln3与神经胶质瘤 | 第19-20页 |
| 1.3 研究的目的与意义 | 第20-21页 |
| 第二章 实验材料与方法 | 第21-47页 |
| 2.1 实验材料 | 第21-26页 |
| 2.1.1 小鼠组织、细胞系、质粒、siRNA、感受态细胞及cDNA | 第21页 |
| 2.1.2 实验试剂 | 第21-23页 |
| 2.1.3 实验仪器与耗材 | 第23-24页 |
| 2.1.4 试剂和溶液的配置 | 第24-26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-47页 |
| 2.2.1 实时定量PCR | 第26-29页 |
| 2.2.2 Western Blot蛋白印迹法 | 第29-31页 |
| 2.2.3 细胞的培养 | 第31-32页 |
| 2.2.4 重组质粒的构建 | 第32-37页 |
| 2.2.5 细胞转染 | 第37-39页 |
| 2.2.6 MTT细胞增殖实验 | 第39页 |
| 2.2.7 流式细胞仪检测细胞周期 | 第39-40页 |
| 2.2.8 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第40-41页 |
| 2.2.9 寻找相互作用蛋白 | 第41-45页 |
| 2.2.10 细胞划痕迁移实验 | 第45页 |
| 2.2.11 Transwell细胞侵袭实验 | 第45-47页 |
| 第三章 实验结果与讨论 | 第47-72页 |
| 3.1 Tagln3的表达分析 | 第47-49页 |
| 3.1.1 Tagln3在小鼠组织中表达情况 | 第47-48页 |
| 3.1.2 Tagln3在神经胶质瘤细胞的表达情况 | 第48-49页 |
| 3.2 pEGFP-C1-Tagln3质粒载体的构建 | 第49-51页 |
| 3.3 小干扰RNA敲降Tagln3效率验证 | 第51-52页 |
| 3.4 Tagln3对神经胶质瘤细胞U251的影响 | 第52-55页 |
| 3.4.1 Tagln3对U251增殖的影响 | 第52-53页 |
| 3.4.2 Tagln3对U251细胞周期的影响 | 第53-54页 |
| 3.4.3 Tagln3对U251细胞凋亡的影响 | 第54-55页 |
| 3.5 寻找Tagln3在神经胶质瘤细胞U251中的相互作用蛋白 | 第55-59页 |
| 3.5.1 pGEX-4T1-Tagln3原核表达载体的构建 | 第55-56页 |
| 3.5.2 GST-Tagln3蛋白纯化 | 第56-57页 |
| 3.5.3 在U251细胞中用GST large scale pull down寻找相互作用蛋白 | 第57-59页 |
| 3.6 Tagln3与eEF1A2相互作用 | 第59-64页 |
| 3.6.1 eEF1A2概述 | 第59-60页 |
| 3.6.2 Tagln3与eEF1A2相关性分析 | 第60-61页 |
| 3.6.3 pEGFP-C1-eEF1A2质粒载体的构建 | 第61-63页 |
| 3.6.4 GST pull down验证Tagln3与eEF1A2的相互作用 | 第63页 |
| 3.6.5 过表达或敲降Tagln3对eEF1A2蛋白表达的影响 | 第63-64页 |
| 3.7 小干扰RNA对eEF1A2敲降效率的验证 | 第64-65页 |
| 3.8 Tagln3与eEF1A2相互作用对U251细胞增殖的影响 | 第65-66页 |
| 3.9 探索Tagln3在U251细胞中的调控通路 | 第66-72页 |
| 3.9.1 肿瘤相关信号通路 | 第66-69页 |
| 3.9.2 microRNA对Tagln3的调控作用 | 第69-72页 |
| 第四章 总结和展望 | 第72-75页 |
| 4.1 总结 | 第72-74页 |
| 4.2 展望 | 第74-75页 |
| 参考文献 | 第75-79页 |
| 硕士期间科研成果 | 第79-80页 |
| 致谢 | 第80页 |
