| 摘要 | 第10-14页 |
| ABSTRACT | 第14-17页 |
| 缩略语中英文对照表 | 第18-20页 |
| 上篇 文献综述 | 第20-128页 |
| 第一章 let-7基因功能研究进展 | 第20-44页 |
| 1 let-7家族特征 | 第21-24页 |
| 1.1 let-7的发现 | 第21页 |
| 1.2 let-7的命名 | 第21-22页 |
| 1.3 let-7的产生 | 第22-23页 |
| 1.4 let-7序列特点 | 第23-24页 |
| 2 let-7生物学功能 | 第24-31页 |
| 2.1 let-7在线虫中的功能 | 第24-25页 |
| 2.2 let-7在果蝇中的功能 | 第25-26页 |
| 2.3 let-7在脊椎动物中的功能 | 第26页 |
| 2.4 let-7与早期发育 | 第26-28页 |
| 2.5 let-7与癌症 | 第28-29页 |
| 2.6 let-7与神经系统 | 第29-30页 |
| 2.7 let-7与心肌功能 | 第30页 |
| 2.8 let-7与细胞重编程 | 第30-31页 |
| 3 let-7的表达调控 | 第31-34页 |
| 3.1 let-7在转录水平的调控 | 第31页 |
| 3.2 末端尿嘧啶转移酶(TUTases)对let-7的调控 | 第31-32页 |
| 3.3 Lin28对let-7的负调控 | 第32-34页 |
| 参考文献 | 第34-44页 |
| 第二章 细胞凋亡研究进展 | 第44-90页 |
| 1 细胞凋亡概述 | 第44-57页 |
| 1.1 细胞凋亡形态及生化变化 | 第44-45页 |
| 1.2 细胞凋亡途径 | 第45-47页 |
| 1.3 细胞凋亡相关蛋白 | 第47-55页 |
| 1.4 细胞凋亡的检测方法 | 第55-57页 |
| 2 细胞凋亡的作用 | 第57-62页 |
| 2.1 细胞凋亡与形态发生 | 第57-58页 |
| 2.2 细胞凋亡与个体发育 | 第58-60页 |
| 2.3 细胞凋亡与器官功能 | 第60-62页 |
| 3 细胞凋亡与卵泡闭锁关系研究 | 第62-67页 |
| 3.1 卵泡发育及闭锁 | 第62-63页 |
| 3.2 颗粒细胞凋亡与卵泡闭锁 | 第63-64页 |
| 3.3 卵泡颗粒细胞凋亡的调控 | 第64-67页 |
| 参考文献 | 第67-90页 |
| 第三章 自噬的过程、调控及其功能研究 | 第90-128页 |
| 1 自噬概述 | 第90-97页 |
| 1.1 自噬的定义 | 第90-91页 |
| 1.2 自噬的分类 | 第91-92页 |
| 1.3 自噬的形态学过程 | 第92-93页 |
| 1.4 自噬的发生机理 | 第93-97页 |
| 2 自噬的调控 | 第97-104页 |
| 2.1 自噬的转录调控 | 第97-100页 |
| 2.2 自噬的转录后调控 | 第100-101页 |
| 2.3 自噬的翻译后调控 | 第101-104页 |
| 3 自噬的功能 | 第104-109页 |
| 3.1 降解产物的利用 | 第104-105页 |
| 3.2 大分子蛋白和细胞器的清除 | 第105-107页 |
| 3.3 从细胞质到溶酶体/内涵体 | 第107页 |
| 3.4 隔离/打包 | 第107-109页 |
| 参考文献 | 第109-128页 |
| 下篇 试验部分 | 第128-214页 |
| 第四章 let-7g通过靶向TGFBR1调控猪卵泡颗粒细胞的凋亡 | 第128-162页 |
| 1 引言 | 第128-129页 |
| 2 材料与方法 | 第129-145页 |
| 2.1 let-7g生物信息学分析 | 第129页 |
| 2.2 细胞培养 | 第129-131页 |
| 2.3 miRNA转染 | 第131页 |
| 2.4 凋亡检测 | 第131-132页 |
| 2.5 RNA的提取 | 第132-133页 |
| 2.6 cDNA的反转录 | 第133页 |
| 2.7 实时荧光定量PCR(Quantitative Real Time PCR,qRT-PCR) | 第133-135页 |
| 2.8 Caspase-3活性检测 | 第135-137页 |
| 2.9 质粒的构建 | 第137-140页 |
| 2.10 荧光素酶活性检测 | 第140页 |
| 2.11 Western blot | 第140-143页 |
| 2.12 siRNA干扰 | 第143-144页 |
| 2.13 TGF-β1处理细胞及miRNA定量 | 第144-145页 |
| 2.14 数据分析 | 第145页 |
| 3 试验结果 | 第145-154页 |
| 3.1 猪let-7g特征分析 | 第145-146页 |
| 3.2 let-7g促进猪颗粒细胞凋亡 | 第146-147页 |
| 3.3 TGFBR1是let-7g靶基因 | 第147-148页 |
| 3.4 let-7g在颗粒细胞中下调TGFBR1 | 第148-149页 |
| 3.5 敲减TGFBR1之后,颗粒细胞凋亡率上升 | 第149-150页 |
| 3.6 let-7g通过靶向TGFBR1调控颗粒细胞凋亡 | 第150-151页 |
| 3.7 let-7g在颗粒细胞中调控TGFp信号通路 | 第151-152页 |
| 3.8 let-7g的表达受TGF-β1的调控 | 第152-154页 |
| 4 讨论 | 第154-156页 |
| 参考文献 | 第156-162页 |
| 第五章 let-7g通过调控IGF1R诱导小鼠颗粒细胞自噬 | 第162-184页 |
| 1 引言 | 第162-163页 |
| 2 材料与方法 | 第163-167页 |
| 2.1 细胞培养 | 第163页 |
| 2.2 质粒构建 | 第163-164页 |
| 2.3 转染 | 第164页 |
| 2.4 GFP-LC3荧光及MDC标记检测 | 第164-165页 |
| 2.5 Western blot及抗体 | 第165页 |
| 2.6 qRT-PCR检测 | 第165页 |
| 2.7 双荧光素酶活性检测 | 第165页 |
| 2.8 TUNEL检测 | 第165-166页 |
| 2.9 CCK8检测 | 第166-167页 |
| 2.10 细胞凋亡检测 | 第167页 |
| 2.11 数据分析 | 第167页 |
| 3 试验结果 | 第167-176页 |
| 3.1 let-7g诱导颗粒细胞自噬 | 第167-168页 |
| 3.2 let-7g靶向IGF1R | 第168-170页 |
| 3.3 敲减IGF1R促进细胞自噬 | 第170页 |
| 3.4 let-7g下调IGF1R/Akt/mTOR信号通路 | 第170-173页 |
| 3.5 过表达IGF1R可以抑制let-7g诱导的自噬 | 第173-174页 |
| 3.6 let-7g诱导的自噬参与到了细胞凋亡过程 | 第174-176页 |
| 4 讨论 | 第176-178页 |
| 参考文献 | 第178-184页 |
| 第六章 FSH通过HIF-1α上调小鼠颗粒细胞自噬 | 第184-214页 |
| 1 引言 | 第184-185页 |
| 2 材料与方法 | 第185-192页 |
| 2.1 实验动物处理 | 第185页 |
| 2.2 免疫组化 | 第185-186页 |
| 2.3 Western blot及抗体 | 第186-187页 |
| 2.4 qRT-PCR检测 | 第187-189页 |
| 2.5 CCK8检测 | 第189页 |
| 2.6 细胞内ROS活性检测 | 第189-190页 |
| 2.7 细胞内AMPK活性检测 | 第190-191页 |
| 2.8 小鼠原代颗粒细胞培养 | 第191-192页 |
| 2.9 细胞转染 | 第192页 |
| 2.10 GFP-LC3检测 | 第192页 |
| 2.11 数据分析 | 第192页 |
| 3 试验结果 | 第192-204页 |
| 3.1 FSH促进小鼠颗粒细胞自噬 | 第192-193页 |
| 3.2 FSH通过Akt/mTOR信号通路调控细胞自噬 | 第193-195页 |
| 3.3 FSH上调颗粒细胞中HIF-1α,AMPK的水平 | 第195-197页 |
| 3.4 HIF-1α是FSH调控自噬的关键因子 | 第197-199页 |
| 3.5 FSH在体外上调HIF-1α调控自噬活性 | 第199页 |
| 3.6 敲减HIF-1α,Beclin1,Bnip3缓解FSH上调的自噬活性 | 第199-202页 |
| 3.7 颗粒细胞中的自噬与卵泡发育相关 | 第202-204页 |
| 4 讨论 | 第204-208页 |
| 参考文献 | 第208-214页 |
| 全文结论 | 第214-216页 |
| 创新 | 第216-218页 |
| 致谢 | 第218-220页 |
| 攻读博士学位期间发表的论文 | 第220-222页 |
| 附录 | 第222-230页 |
