摘要 | 第8-9页 |
ABSTRACT | 第9页 |
1 前言 | 第10-26页 |
1.1 Hippo信号通路概述 | 第10页 |
1.2 Hippo信号通路的组成 | 第10-12页 |
1.3 Mst1和Mst2 | 第12-20页 |
1.3.1 Mst1和Mst2的活性调控 | 第13-16页 |
1.3.2 Mst1/2激酶的底物 | 第16-20页 |
1.4 Hippo信号通路与组织再生 | 第20-23页 |
1.4.1 Hippo信号通路和干细胞 | 第21页 |
1.4.2 Hippo信号通路与肝再生 | 第21-22页 |
1.4.3 Hippo信号通路与肠道再生 | 第22-23页 |
1.4.4 Hippo信号通路与心脏再生 | 第23页 |
1.5 研究目的和意义 | 第23-26页 |
2 实验材料与方法 | 第26-46页 |
2.1 实验材料 | 第26-29页 |
2.1.1 细胞和菌株 | 第26页 |
2.1.2 实验仪器与耗材 | 第26-27页 |
2.1.3 实验药品和试剂 | 第27-29页 |
2.2 实验方法 | 第29-46页 |
2.2.1 细胞相关实验方法 | 第29-30页 |
2.2.2 分子克隆 | 第30-36页 |
2.2.3 蛋白质相关实验与方法 | 第36-41页 |
2.2.4 荧光定量PCR | 第41-43页 |
2.2.5 小鼠肝原代细胞的分离与培养 | 第43-46页 |
3 结果与分析 | 第46-56页 |
3.1 高通量筛选系统的构建和优化 | 第46-49页 |
3.1.1 底物GST-Mob1的浓度确定 | 第47页 |
3.1.2 激酶浓度和反应时间的确定 | 第47-48页 |
3.1.3 ATP浓度的确定 | 第48-49页 |
3.1.4 Z-factor的计算 | 第49页 |
3.2 小分子化合物的筛选 | 第49-51页 |
3.3 体外激酶实验验证XMU-MP-1对Mst1/2的抑制效果 | 第51-53页 |
3.3.1 XMU-MP-1对Mst1/2的抑制是剂量依赖性的 | 第51-52页 |
3.3.2 XMU-MP-1对Mst1/2的抑制是ATP竞争性的 | 第52-53页 |
3.4 不同细胞系中检测XMU-MP-1对Mst1/2激酶活性的抑制 | 第53-56页 |
3.4.1 肝脏细胞中XMU-MP-1对Mst1/2激酶活性的抑制 | 第53-54页 |
3.4.2 在各种细胞系中XMU-MP-1对Mst1/2的抑制 | 第54-56页 |
4 结论和展望 | 第56-58页 |
参考文献 | 第58-68页 |
致谢 | 第68页 |