| 摘要 | 第4-5页 |
| ABSTRACT | 第5页 |
| 1 引言 | 第8-16页 |
| 1.1 瓜实蝇的研究现状 | 第8-11页 |
| 1.1.1 瓜实蝇概述 | 第8页 |
| 1.1.2 瓜实蝇防治方法 | 第8-11页 |
| 1.2 转基因昆虫不育技术 | 第11-12页 |
| 1.2.1 RIDL | 第11页 |
| 1.2.2 TESS | 第11-12页 |
| 1.3 性别决定基因的研究 | 第12-14页 |
| 1.3.1 果蝇性别决定研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3.2 其他昆虫性别决定研究进展 | 第13-14页 |
| 1.4 昆虫性别决定调控基因功能的研究方法 | 第14-15页 |
| 1.4.1 基因功能的研究方法 | 第14页 |
| 1.4.2 昆虫RNAi的研究方法 | 第14-15页 |
| 1.5 本研究的目的与意义 | 第15-16页 |
| 2 材料与方法 | 第16-24页 |
| 2.1 材料与试剂、设备 | 第16页 |
| 2.1.1 供试昆虫 | 第16页 |
| 2.1.2 主要试剂和仪器设备 | 第16页 |
| 2.2 实验方法 | 第16-24页 |
| 2.2.1 瓜实蝇总RNA提取 | 第16-17页 |
| 2.2.2 第一链cDNA合成 | 第17-18页 |
| 2.2.3 引物设计 | 第18页 |
| 2.2.4 瓜实蝇dsx和tra2 cDNA序列获取 | 第18-21页 |
| 2.2.5 荧光定量qPCR | 第21页 |
| 2.2.6 PCR扩增目dsRNA模板基因片段 | 第21页 |
| 2.2.7 dsRNA合成 | 第21-22页 |
| 2.2.8 瓜实蝇成虫饲料配置 | 第22页 |
| 2.2.9 瓜实蝇成虫饲喂处理 | 第22-23页 |
| 2.2.10 饲喂效果检测 | 第23-24页 |
| 3 结果与分析 | 第24-48页 |
| 3.1 总RNA提取结果 | 第24页 |
| 3.2 引物设计结果 | 第24-26页 |
| 3.2.1 获取dsx、tra2基因所用引物 | 第24-25页 |
| 3.2.2 不同发育阶段荧光定量所用引物 | 第25-26页 |
| 3.2.3 ds RNA合成所用引物 | 第26页 |
| 3.3 瓜实蝇dsx测序结果与分析 | 第26-36页 |
| 3.3.1 瓜实蝇dsx基因cDNA序列分析 | 第26-29页 |
| 3.3.2 瓜实蝇dsx基因氨基酸序列分析 | 第29-36页 |
| 3.4 瓜实蝇tra2测序结果与分析 | 第36-41页 |
| 3.4.1 瓜实蝇tra2基因cDNA序列分析 | 第36-38页 |
| 3.4.2 瓜实蝇tra2基因氨基酸序列分析 | 第38-41页 |
| 3.5 qPCR检测dsx和tra2基因在瓜实蝇不同发育阶段的表达 | 第41-43页 |
| 3.5.1 荧光定量标准曲线 | 第41页 |
| 3.5.2 瓜实蝇dsx和tra2基因在不同发育阶段的表达情况 | 第41-43页 |
| 3.6 dsRNA合成及降解结果 | 第43-44页 |
| 3.7 qPCR检测饲喂后基因的表达量 | 第44-46页 |
| 3.8 产卵量及孵化率统计 | 第46-48页 |
| 4 讨论 | 第48-52页 |
| 4.1 瓜实蝇性别决定基因dsx和tra2的序列分析 | 第48-49页 |
| 4.2 瓜实蝇不同发育阶段dsx和tra2的表达分析 | 第49-50页 |
| 4.3 RNAi技术技术揭示dsx和tra2在瓜实蝇性别决定中的作用 | 第50-52页 |
| 5 结论 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-62页 |
| 附录 | 第62-63页 |
| 致谢 | 第63页 |
