| 致谢 | 第4-7页 |
| 摘要 | 第7-9页 |
| 1 文献综述 | 第9-14页 |
| 1.1 种子的寿命 | 第9页 |
| 1.2 种子老化的研究方法 | 第9页 |
| 1.3 人工控制劣变的研究进展 | 第9-13页 |
| 1.3.1 种子老化学说 | 第9-10页 |
| 1.3.2 人工种子老化对线粒体的影响 | 第10页 |
| 1.3.3 人工种子老化的生理生化研究 | 第10-13页 |
| 1.4 数字基因表达谱技术 | 第13-14页 |
| 1.4.1 RNA-seq的原理 | 第13页 |
| 1.4.2 RNA-seq的应用 | 第13-14页 |
| 2 引言 | 第14-15页 |
| 2.1 研究目的 | 第14页 |
| 2.2 研究内容 | 第14页 |
| 2.3 技术线路 | 第14-15页 |
| 3 材料与方法 | 第15-25页 |
| 3.1 材料 | 第15页 |
| 3.2 方法 | 第15-25页 |
| 3.2.1 人工控制劣变处理 | 第15页 |
| 3.2.2 种子发芽率测定 | 第15-16页 |
| 3.2.3 种子含水量测定 | 第16页 |
| 3.2.4 种胚中过氧化氢含量测定 | 第16-17页 |
| 3.2.5 种胚中MDA含量测定 | 第17页 |
| 3.2.6 种胚中激素含量的测定 | 第17-18页 |
| 3.2.7 RNA-seq技术 | 第18-22页 |
| 3.2.8 RT-PCR反应 | 第22-23页 |
| 3.2.9 qRT-PCR的引物设计 | 第23-24页 |
| 3.2.10 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第24-25页 |
| 4 结果与分析 | 第25-53页 |
| 4.1 人工控制劣变处理对玉米种皮颜色和胚根的影响 | 第25页 |
| 4.2 人工控制劣变处理对玉米种子发芽率的影响 | 第25-26页 |
| 4.3 人工控制劣变过程中种子含水量变化 | 第26页 |
| 4.4 人工控制劣变处理对种胚中H2O2含量的影响 | 第26-27页 |
| 4.5 人工控制劣变处理对种胚中MDA含量的影响 | 第27-28页 |
| 4.6 人工控制劣变处理对种胚中激素含量的影响 | 第28-29页 |
| 4.6.1 人工控制劣变处理对种胚中IAA含量的影响 | 第28页 |
| 4.6.2 人工控制劣变处理对种胚中ABA含量的影响 | 第28页 |
| 4.6.3 人工控制劣变处理对种胚中JA-ME含量的影响 | 第28页 |
| 4.6.4 人工控制劣变处理对种胚中BR含量的影响 | 第28-29页 |
| 4.7 数字基因表达谱升级版(RNA-seq技术) | 第29-53页 |
| 4.7.1 RNA的质量检测 | 第29页 |
| 4.7.2 测序文库质量分析 | 第29-31页 |
| 4.7.3 测序文库的饱和度和随机性分析 | 第31-32页 |
| 4.7.4 差异表达基因的筛选 | 第32页 |
| 4.7.5 差异基因的qRT-PCR验证 | 第32-33页 |
| 4.7.6 差异表达基因在染色体上的分布 | 第33-34页 |
| 4.7.7 差异表达基因的Nr注释 | 第34-35页 |
| 4.7.8 差异表达基因的GO注释 | 第35-39页 |
| 4.7.9 差异基因的KEGG注释 | 第39-40页 |
| 4.7.10 差异表达基因的功能分类分析 | 第40-50页 |
| 4.7.11 利用EST序列预测新型miRNA | 第50-52页 |
| 4.7.12 新型miRNAs靶基因的预测 | 第52-53页 |
| 5 结论与讨论 | 第53-59页 |
| 5.1 结论 | 第53-54页 |
| 5.2 讨论 | 第54-59页 |
| 5.2.1 ROS含量及其抗氧化系统相关基因在种子老化过程中的相互作用 | 第54-55页 |
| 5.2.2 激素含量及其相关基因在种子老化过程中的作用 | 第55-56页 |
| 5.2.3 能量代谢相关基因在种子人工控制劣变过程中的作用 | 第56页 |
| 5.2.4 NAD和NADP的代谢失衡对种子老化的影响 | 第56-57页 |
| 5.2.5 人工控制劣变处理抑制蛋白质的正确折叠 | 第57页 |
| 5.2.6 种子人工控制劣变的分子机制 | 第57-59页 |
| 参考文献 | 第59-67页 |
| ABSTRACT | 第67-68页 |
