摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
缩略语表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-21页 |
1.1 生物固氮的意义 | 第11页 |
1.2 根瘤菌和豆科植物之间的分子信号识别与侵染 | 第11-13页 |
1.3 根瘤器官的发生 | 第13-14页 |
1.4 结瘤信号转导途径 | 第14-16页 |
1.5 结瘤信号传导模式图 | 第16页 |
1.6 Rboh基因对生物固氮作用的影响 | 第16-19页 |
1.7 小G蛋白和Rboh的关系 | 第19页 |
1.8 研究的目的与意义 | 第19-21页 |
2 材料与方法 | 第21-32页 |
2.1 材料 | 第21-26页 |
2.1.1 植物材料 | 第21页 |
2.1.2 菌株和质粒 | 第21页 |
2.1.3 主要分子生物学试剂 | 第21-22页 |
2.1.4 培养基 | 第22-25页 |
2.1.5 缓冲液和反应试剂 | 第25-26页 |
2.2 方法 | 第26-32页 |
2.2.1 重组质粒的构建 | 第26页 |
2.2.2 Western Blotting | 第26-27页 |
2.2.3 基因的时空表达 | 第27-28页 |
2.2.4 BiFC实验 | 第28-29页 |
2.2.5 农杆菌介导的毛根转化 | 第29-30页 |
2.2.6 组织化学染色 | 第30页 |
2.2.7 转基因植株根毛的观察 | 第30页 |
2.2.8 突变体植株根瘤原基数目的统计 | 第30页 |
2.2.9 NBT对根瘤原基ROS染色 | 第30-31页 |
2.2.10 分析软件及生物信息学网站 | 第31-32页 |
3 结果与分析 | 第32-41页 |
3.1 LjRbohA蛋白结构分析 | 第32-33页 |
3.2 烟草叶肉细胞中LjRbohA亚细胞定位 | 第33-34页 |
3.3 LjRbohA基因的表达分析 | 第34-35页 |
3.4 LjRbohA在根瘤发育阶段组织的特异性表达 | 第35-36页 |
3.5 LjRbohA LOREI突变体30032291的鉴定 | 第36-37页 |
3.6 纯合突变体30032291表型鉴定分析 | 第37-39页 |
3.7 野生型和突变体用NBT方法对根瘤原基ROS染色 | 第39页 |
3.8 LjRbohA和Rac2CA在烟草细胞内的相互作用 | 第39-41页 |
4 总结、讨论及展望 | 第41-45页 |
4.1 总结 | 第41-42页 |
4.2 讨论 | 第42-43页 |
4.3 展望 | 第43-45页 |
参考文献 | 第45-49页 |
附录一: 本研究所用引物 | 第49-51页 |
附录二:LjRbohA cDNA和氨基酸序列 | 第51-55页 |
致谢 | 第55页 |