| 摘要 | 第2-4页 |
| Abstract | 第4-5页 |
| 引言 | 第9-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-25页 |
| 1.1 生物丁醇 | 第10-12页 |
| 1.1.1 丁醇的理化性质 | 第10页 |
| 1.1.2 丁醇的应用 | 第10-11页 |
| 1.1.3 丁醇的工业制法 | 第11页 |
| 1.1.4 丁醇的发酵菌株 | 第11-12页 |
| 1.2 丙酮丁醇梭状芽孢杆菌的代谢途径 | 第12-14页 |
| 1.2.1 EMP途径 | 第13页 |
| 1.2.2 HMP途径 | 第13页 |
| 1.2.3 产酸途径 | 第13页 |
| 1.2.4 产溶剂途径 | 第13-14页 |
| 1.3 丙酮丁醇梭状芽孢杆菌的糖转运系统 | 第14-17页 |
| 1.3.1 PTS系统的糖转运 | 第14-16页 |
| 1.3.2 非PTS系统的糖转运 | 第16-17页 |
| 1.4 生物丁醇研究进展 | 第17-23页 |
| 1.4.1 发酵原料的选择—非粮作物及生物基废料 | 第17-19页 |
| 1.4.2 生物过程工程调控(pH、ORP和外源物添加等调控) | 第19-20页 |
| 1.4.3 耦联新型高效分离技术 | 第20-21页 |
| 1.4.4 菌株改造 | 第21-23页 |
| 1.5 课题的目的及意义 | 第23-25页 |
| 2 敲除、过表达和回补基因工程菌株构建 | 第25-50页 |
| 2.1 引言 | 第25页 |
| 2.2 实验材料 | 第25-30页 |
| 2.2.1 菌株和质粒 | 第25-27页 |
| 2.2.2 实验试剂 | 第27-28页 |
| 2.2.3 本章所用抗生素及培养基 | 第28-29页 |
| 2.2.4 本章主要实验仪器 | 第29-30页 |
| 2.3 实验方法 | 第30-35页 |
| 2.3.1 分子实验操作 | 第30-34页 |
| 2.3.2 梭菌的电转与保藏 | 第34-35页 |
| 2.4 基因工程菌株的构建 | 第35-44页 |
| 2.4.1 敲除突变菌株的构建 | 第35-39页 |
| 2.4.2 过表达突变菌株的构建 | 第39-41页 |
| 2.4.3 回补突变菌株的构建 | 第41-43页 |
| 2.4.4 空载菌株的构建 | 第43-44页 |
| 2.5 结果与讨论 | 第44-48页 |
| 2.5.1 敲除菌株验证 | 第44-45页 |
| 2.5.2 过表达菌株构建验证 | 第45-46页 |
| 2.5.3 回补菌株构建验证 | 第46-47页 |
| 2.5.4 空载菌株构建验证 | 第47-48页 |
| 2.6 本章小结 | 第48-50页 |
| 3 基因工程菌株发酵动力学 | 第50-66页 |
| 3.1 引言 | 第50页 |
| 3.2 实验材料与仪器 | 第50-52页 |
| 3.2.1 实验菌株 | 第50页 |
| 3.2.2 本章所用实验试剂 | 第50-51页 |
| 3.2.3 本章所用实验仪器 | 第51-52页 |
| 3.3 实验方法 | 第52-54页 |
| 3.3.1 培养基 | 第52-53页 |
| 3.3.2 培养方法 | 第53页 |
| 3.3.3 样品分析方法 | 第53-54页 |
| 3.4 结果与讨论 | 第54-64页 |
| 3.4.1 敲除菌株发酵性能的研究 | 第54-58页 |
| 3.4.2 过表达菌株发酵性能的研究 | 第58-63页 |
| 3.4.3 回补菌株发酵性能的研究 | 第63-64页 |
| 3.5 本章小结 | 第64-66页 |
| 4 各过表达突变菌株以模拟液与菊芋块茎水解液为碳源的发酵情况 | 第66-72页 |
| 4.1 引言 | 第66页 |
| 4.2 实验材料与仪器 | 第66页 |
| 4.2.1 实验菌株 | 第66页 |
| 4.2.2 实验试剂 | 第66页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第66页 |
| 4.3 实验方法 | 第66-67页 |
| 4.3.1 培养基 | 第66-67页 |
| 4.3.2 培养方法 | 第67页 |
| 4.3.3 样品分析方法 | 第67页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第67-71页 |
| 4.4.1 以混合糖为碳源进行的发酵 | 第67-68页 |
| 4.4.2 以实际物料菊芋为碳源进行的发酵 | 第68-71页 |
| 4.5 本章小结 | 第71-72页 |
| 结论 | 第72-74页 |
| 创新点 | 第74-75页 |
| 展望 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-83页 |
| 附录A CAP0066基因序列 | 第83-84页 |
| 附录B CAP0067基因序列 | 第84-85页 |
| 附录C CAP0068基因序列 | 第85-86页 |
| 附录D thl启动子基因序列 | 第86-87页 |
| 附录E 序列比对结果 | 第87-90页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第90-91页 |
| 致谢 | 第91-93页 |