摘要 | 第10-11页 |
英文摘要 | 第11-12页 |
1 引言 | 第13-18页 |
1.1 镉的概述 | 第13页 |
1.1.1 镉的理化性质 | 第13页 |
1.1.2 镉的污染现状及危害 | 第13页 |
1.2 镉的肾毒性作用 | 第13-14页 |
1.3 镉毒性与核受体应答 | 第14页 |
1.4 镉与氧化应激 | 第14-15页 |
1.4.1 氧化应激 | 第14页 |
1.4.2 镉致氧化应激 | 第14-15页 |
1.5 镉与线粒体损伤 | 第15-16页 |
1.5.1 线粒体损伤概述 | 第15页 |
1.5.2 氧化应激与线粒体损伤 | 第15-16页 |
1.5.3 线粒体未折叠蛋白反应 | 第16页 |
1.6 镉与Nrf2信号通路 | 第16-17页 |
1.6.1 Nrf2概述 | 第16-17页 |
1.6.2 Nrf2抗氧化机制 | 第17页 |
1.6.3 镉与Nrf2信号通路 | 第17页 |
1.7 试验的目的与意义 | 第17-18页 |
2 材料与方法 | 第18-27页 |
2.1 药品与试剂 | 第18页 |
2.2 主要仪器 | 第18-19页 |
2.3 试验动物与染毒方法 | 第19页 |
2.4 组织样品的采集与处理 | 第19页 |
2.5 鸡肾脏形态结构观察 | 第19-20页 |
2.5.1 肾脏病理解剖学观察 | 第19-20页 |
2.5.2 肾脏病理组织学观察 | 第20页 |
2.5.3 肾脏超微结构观察 | 第20页 |
2.6 鸡肾脏功能检测 | 第20页 |
2.7 鸡肾脏组织抗氧化功能的测定方法 | 第20-21页 |
2.7.1 肾脏组织中蛋白定量测定 | 第20页 |
2.7.2 肾脏组织中氧化产物的测定 | 第20页 |
2.7.3 肾脏组织中抗氧化酶的检测 | 第20-21页 |
2.7.4 肾脏组织中抗氧化水平的检测 | 第21页 |
2.8 肾脏组织中CYP450酶系的检测 | 第21页 |
2.8.1 肾微粒体的制备 | 第21页 |
2.8.2 肾脏组织中CYP450酶系的测定 | 第21页 |
2.9 鸡肾脏组织mRNA表达水平的检测 | 第21-23页 |
2.9.1 鸡肾脏组织总RNA的提取 | 第21页 |
2.9.2 RNA反转录反应 | 第21-22页 |
2.9.3 看家基因引物的设计及合成 | 第22页 |
2.9.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR) | 第22-23页 |
2.10 镉致鸡肾脏线粒体损伤的检测 | 第23-24页 |
2.10.1 线粒体形态结构观察 | 第23页 |
2.10.2 线粒体膜电位的检测 | 第23页 |
2.10.3 线粒体功能及未折叠蛋白反应相关因子的mRNA表达的检测 | 第23-24页 |
2.11 肾脏组织中Nrf2信号通路的检测 | 第24-25页 |
2.11.1 肾脏组织中Nrf2蛋白表达水平的测定 | 第24页 |
2.11.2 肾脏Nrf2基因表达水平的测定 | 第24页 |
2.11.3 肾脏Nrf2信号通路相关分子表达的测定 | 第24-25页 |
2.12 肾脏组织中核受体及CYP450亚基基因水平的测定 | 第25-26页 |
2.13 试验数据的分析与统计 | 第26-27页 |
3 结果 | 第27-41页 |
3.1 肾脏组织形态学观察结果 | 第27-28页 |
3.1.1 肾脏病理组织学观察结果 | 第27页 |
3.1.2 肾脏超微结构观察结果 | 第27-28页 |
3.2 镉致肾脏功能损伤的检测结果 | 第28-29页 |
3.3 镉暴露干扰肾脏线粒体的损伤的检测结果 | 第29-32页 |
3.3.1 线粒体超微结构结果 | 第29页 |
3.3.2 线粒体膜电位的检测结果 | 第29-30页 |
3.3.3 线粒体功能蛋白相关分子的检测结果 | 第30-31页 |
3.3.4 线粒体未折叠蛋白反应相关分子的检测结果 | 第31-32页 |
3.4 镉暴露干扰鸡肾脏组织中抗氧化功能的检测结果 | 第32-35页 |
3.4.1 肾脏组织中H_2O_2与MDA含量检测结果 | 第32-33页 |
3.4.2 肾脏组织中抗氧化酶活性的检测结果 | 第33-34页 |
3.4.3 肾脏组织中T-AOC能力的检测结果 | 第34-35页 |
3.5 镉暴露干扰肾脏组织中Nrf2信号通路的检测结果 | 第35-37页 |
3.5.1 肾脏组织中Nrf2mRNA表达水平的检测结果 | 第35页 |
3.5.2 肾脏组织中Nrf2蛋白表达水平的检测结果 | 第35-36页 |
3.5.3 肾脏组织中Nrf2信号通路相关分子的检测结果 | 第36-37页 |
3.6 镉暴露干扰肾脏核受体应答与CYP450酶系的检测结果 | 第37-41页 |
3.6.1 肾脏组织中CYP450酶系蛋白活性的检测结果 | 第37-38页 |
3.6.2 肾脏组织中核受体CAR、AHR与PXR的检测结果 | 第38-39页 |
3.6.3 肾脏组织中CYP450酶系亚型mRNA的检测结果 | 第39-41页 |
4 讨论 | 第41-46页 |
4.1 镉致鸡肾脏的毒性作用 | 第41页 |
4.2 镉对鸡肾脏线粒体损伤的影响 | 第41-42页 |
4.3 镉对鸡肾脏线粒体未折叠蛋白反应的影响 | 第42-43页 |
4.4 镉对鸡肾脏氧化应激及Nrf2信号通路的影响 | 第43-44页 |
4.5 镉对鸡肾脏核受体应答的影响 | 第44-46页 |
5 结论 | 第46-47页 |
致谢 | 第47-48页 |
参考文献 | 第48-56页 |
攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第56页 |