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Nrf2介导抗氧化防御与UPRmt在镉致鸡肾脏线粒体损伤中的作用

摘要第10-11页
英文摘要第11-12页
1 引言第13-18页
    1.1 镉的概述第13页
        1.1.1 镉的理化性质第13页
        1.1.2 镉的污染现状及危害第13页
    1.2 镉的肾毒性作用第13-14页
    1.3 镉毒性与核受体应答第14页
    1.4 镉与氧化应激第14-15页
        1.4.1 氧化应激第14页
        1.4.2 镉致氧化应激第14-15页
    1.5 镉与线粒体损伤第15-16页
        1.5.1 线粒体损伤概述第15页
        1.5.2 氧化应激与线粒体损伤第15-16页
        1.5.3 线粒体未折叠蛋白反应第16页
    1.6 镉与Nrf2信号通路第16-17页
        1.6.1 Nrf2概述第16-17页
        1.6.2 Nrf2抗氧化机制第17页
        1.6.3 镉与Nrf2信号通路第17页
    1.7 试验的目的与意义第17-18页
2 材料与方法第18-27页
    2.1 药品与试剂第18页
    2.2 主要仪器第18-19页
    2.3 试验动物与染毒方法第19页
    2.4 组织样品的采集与处理第19页
    2.5 鸡肾脏形态结构观察第19-20页
        2.5.1 肾脏病理解剖学观察第19-20页
        2.5.2 肾脏病理组织学观察第20页
        2.5.3 肾脏超微结构观察第20页
    2.6 鸡肾脏功能检测第20页
    2.7 鸡肾脏组织抗氧化功能的测定方法第20-21页
        2.7.1 肾脏组织中蛋白定量测定第20页
        2.7.2 肾脏组织中氧化产物的测定第20页
        2.7.3 肾脏组织中抗氧化酶的检测第20-21页
        2.7.4 肾脏组织中抗氧化水平的检测第21页
    2.8 肾脏组织中CYP450酶系的检测第21页
        2.8.1 肾微粒体的制备第21页
        2.8.2 肾脏组织中CYP450酶系的测定第21页
    2.9 鸡肾脏组织mRNA表达水平的检测第21-23页
        2.9.1 鸡肾脏组织总RNA的提取第21页
        2.9.2 RNA反转录反应第21-22页
        2.9.3 看家基因引物的设计及合成第22页
        2.9.4 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)第22-23页
    2.10 镉致鸡肾脏线粒体损伤的检测第23-24页
        2.10.1 线粒体形态结构观察第23页
        2.10.2 线粒体膜电位的检测第23页
        2.10.3 线粒体功能及未折叠蛋白反应相关因子的mRNA表达的检测第23-24页
    2.11 肾脏组织中Nrf2信号通路的检测第24-25页
        2.11.1 肾脏组织中Nrf2蛋白表达水平的测定第24页
        2.11.2 肾脏Nrf2基因表达水平的测定第24页
        2.11.3 肾脏Nrf2信号通路相关分子表达的测定第24-25页
    2.12 肾脏组织中核受体及CYP450亚基基因水平的测定第25-26页
    2.13 试验数据的分析与统计第26-27页
3 结果第27-41页
    3.1 肾脏组织形态学观察结果第27-28页
        3.1.1 肾脏病理组织学观察结果第27页
        3.1.2 肾脏超微结构观察结果第27-28页
    3.2 镉致肾脏功能损伤的检测结果第28-29页
    3.3 镉暴露干扰肾脏线粒体的损伤的检测结果第29-32页
        3.3.1 线粒体超微结构结果第29页
        3.3.2 线粒体膜电位的检测结果第29-30页
        3.3.3 线粒体功能蛋白相关分子的检测结果第30-31页
        3.3.4 线粒体未折叠蛋白反应相关分子的检测结果第31-32页
    3.4 镉暴露干扰鸡肾脏组织中抗氧化功能的检测结果第32-35页
        3.4.1 肾脏组织中H_2O_2与MDA含量检测结果第32-33页
        3.4.2 肾脏组织中抗氧化酶活性的检测结果第33-34页
        3.4.3 肾脏组织中T-AOC能力的检测结果第34-35页
    3.5 镉暴露干扰肾脏组织中Nrf2信号通路的检测结果第35-37页
        3.5.1 肾脏组织中Nrf2mRNA表达水平的检测结果第35页
        3.5.2 肾脏组织中Nrf2蛋白表达水平的检测结果第35-36页
        3.5.3 肾脏组织中Nrf2信号通路相关分子的检测结果第36-37页
    3.6 镉暴露干扰肾脏核受体应答与CYP450酶系的检测结果第37-41页
        3.6.1 肾脏组织中CYP450酶系蛋白活性的检测结果第37-38页
        3.6.2 肾脏组织中核受体CAR、AHR与PXR的检测结果第38-39页
        3.6.3 肾脏组织中CYP450酶系亚型mRNA的检测结果第39-41页
4 讨论第41-46页
    4.1 镉致鸡肾脏的毒性作用第41页
    4.2 镉对鸡肾脏线粒体损伤的影响第41-42页
    4.3 镉对鸡肾脏线粒体未折叠蛋白反应的影响第42-43页
    4.4 镉对鸡肾脏氧化应激及Nrf2信号通路的影响第43-44页
    4.5 镉对鸡肾脏核受体应答的影响第44-46页
5 结论第46-47页
致谢第47-48页
参考文献第48-56页
攻读硕士学位期间发表的学术论文第56页

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