致谢 | 第5-6页 |
摘要 | 第6-8页 |
Abstract | 第8-9页 |
符号及英文缩略表 | 第14-15页 |
文献综述 | 第15-23页 |
引言 | 第23-24页 |
1 材料与方法 | 第24-38页 |
1.1 试验材料 | 第24-27页 |
1.1.1 菌株、质粒、细胞系及实验动物 | 第24页 |
1.1.2 主要试剂与主要仪器 | 第24-25页 |
1.1.3 培养基及试剂的配制 | 第25-27页 |
1.2 鸭疫里默氏杆菌OmpA/motb蛋白的表达纯化及免疫原性 | 第27-30页 |
1.2.1 融合表达载体pET30a-OmpA/motb的构建 | 第27-28页 |
1.2.2 重组蛋白OmpA/motb的表达与纯化 | 第28-29页 |
1.2.3 抗OmpA/motb蛋白多克隆抗体的制备 | 第29-30页 |
1.2.4 抗OmpA/motb蛋白多克隆抗体的特异性鉴定 | 第30页 |
1.2.5 抗OmpA/motb蛋白多克隆抗体的纯化 | 第30页 |
1.3 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体的制备 | 第30-32页 |
1.3.1 动物免疫 | 第30-31页 |
1.3.2 细胞融合 | 第31页 |
1.3.3 杂交瘤细胞的克隆化 | 第31页 |
1.3.4 杂交瘤细胞株的稳定性检测 | 第31-32页 |
1.3.5 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体亚类的鉴定 | 第32页 |
1.3.6 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体腹水的制备 | 第32页 |
1.3.7 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体的特异性鉴定 | 第32页 |
1.3.8 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体腹水的纯化 | 第32页 |
1.4 鸭疫里默氏杆菌免疫胶体金快速检测技术研究 | 第32-38页 |
1.4.1 胶体金的制备与鉴定 | 第32-33页 |
1.4.2 单克隆抗体及多克隆抗体最适标记条件的确定 | 第33页 |
1.4.3 胶体金–抗体复合物的制备 | 第33-34页 |
1.4.4 鸭疫里默氏杆菌胶体金试纸条的制备 | 第34-36页 |
1.4.5 鸭疫里默氏杆菌免疫试纸条的特异性及敏感性试验 | 第36-38页 |
2 结果 | 第38-48页 |
2.1 RAOmpA/motb蛋白的原核表达及免疫原性研究 | 第38-40页 |
2.1.1 ompA/motb基因的扩增 | 第38页 |
2.1.2 重组载体pET30a-OmpA/motb的构建 | 第38-39页 |
2.1.3 重组蛋白OmpA/motb的诱导表达与纯化 | 第39页 |
2.1.4 重组蛋白OmpA/motb的抗原性分析 | 第39页 |
2.1.5 抗OmpA/motb兔多克隆抗体的效价测定 | 第39-40页 |
2.1.6 抗OmpA/motb多克隆抗体的特异性检测 | 第40页 |
2.2 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体的制备及特性鉴定 | 第40-42页 |
2.2.1 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体细胞株的建立及稳定性检测 | 第40-41页 |
2.2.2 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体亚类测定 | 第41页 |
2.2.3 鸭疫里默氏杆菌单抗腹水的效价检测 | 第41页 |
2.2.4 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体的特异性检测 | 第41-42页 |
2.2.5 鸭疫里默氏杆菌单克隆抗体的纯化 | 第42页 |
2.3 鸭疫里默氏杆菌免疫胶体金快速检测技术研究 | 第42-48页 |
2.3.1 胶体金的制备 | 第42-43页 |
2.3.2 最适标记条件的确定 | 第43-44页 |
2.3.3 封闭液的选择 | 第44页 |
2.3.4 胶体金稀释液的选择及pH的调整 | 第44-45页 |
2.3.5 最适反应体系确立 | 第45页 |
2.3.6 硝酸纤维素膜的选择 | 第45页 |
2.3.7 金标垫的选择 | 第45-46页 |
2.3.8 不同抗体浓度对显色的影响 | 第46页 |
2.3.9 鸭疫里默氏杆菌免疫胶体金试纸条特异性检测 | 第46页 |
2.3.10 胶体金免疫层析试纸条敏感性检测 | 第46-48页 |
3 讨论 | 第48-50页 |
4 结论 | 第50-51页 |
参考文献 | 第51-58页 |
个人简介 | 第58页 |