| 摘要 | 第6-8页 |
| Abstract | 第8-9页 |
| 第1章 文献综述 | 第10-24页 |
| 1.1 结核分枝杆菌药物外排泵 | 第10-11页 |
| 1.2 MFS家族转运蛋白的序列和结构特征 | 第11-12页 |
| 1.3 MFS家族转运蛋白的功能 | 第12-19页 |
| 1.4 MFS家族的转运机制 | 第19-20页 |
| 1.5 筛选转运蛋白的底物 | 第20-21页 |
| 1.6 靶定MFS药物外排泵的抑制剂研究进展 | 第21-22页 |
| 1.6.1 通过抑制外排泵基因表达实现外排抑制 | 第22页 |
| 1.6.2 诱饵分子实现外排抑制 | 第22页 |
| 1.6.3 消除外排动力来抑制外排 | 第22页 |
| 1.7 展望 | 第22-24页 |
| 第2章 引言 | 第24-26页 |
| 第3章 实验材料与方法 | 第26-42页 |
| 3.1 实验材料 | 第26-28页 |
| 3.1.1 实验菌株、质粒 | 第26页 |
| 3.1.2 培养基的配制 | 第26页 |
| 3.1.3 主要试剂 | 第26-27页 |
| 3.1.4 主要溶液 | 第27-28页 |
| 3.1.5 主要仪器 | 第28页 |
| 3.2 实验方法 | 第28-42页 |
| 3.2.1 生物信息学分析 | 第28页 |
| 3.2.2 构建Ms0232敲除耻垢分枝杆菌 | 第28-34页 |
| 3.2.3 构建回补菌株 | 第34页 |
| 3.2.4 生长曲线的测定 | 第34页 |
| 3.2.5 耻垢分枝杆菌对抗菌药物和染料的敏感分析 | 第34-35页 |
| 3.2.6 耻垢分枝杆菌对溴化乙锭(EB)的积累试验和膜电位检测试验 | 第35页 |
| 3.2.7 耻垢分枝杆菌Ms0232在氯霉素压力下的转录水平检测 | 第35-37页 |
| 3.2.8 耻垢分枝杆菌ΔMs0232菌株菌体表面特性 | 第37-38页 |
| 3.2.9 构建Rv1353c耻垢分枝杆菌重组菌株 | 第38页 |
| 3.2.10 Rv1353c重组蛋白在大肠杆菌中的表达与纯化 | 第38-40页 |
| 3.2.11 Rv1353c对Rv0191的转录调控分析 | 第40-41页 |
| 3.2.12 启动子活性测定 | 第41页 |
| 3.2.13 数据统计与分析 | 第41-42页 |
| 第4章 结果与分析 | 第42-58页 |
| 4.1 MFS家族转运蛋白RV0191在分枝杆菌属中序列保守 | 第42-43页 |
| 4.2 成功构建耻垢分枝杆菌MS0232敲除菌株 | 第43-45页 |
| 4.3 成功构建耻垢分枝杆菌ΔMS0232::RV0191回补菌株 | 第45页 |
| 4.4 MS0232缺失对耻垢分枝杆菌生长无影响 | 第45-46页 |
| 4.5 MS0232缺失菌株对氯霉素敏感 | 第46-47页 |
| 4.6 RV0191编码跨膜电化学梯度依赖型的MFS转运蛋白 | 第47-48页 |
| 4.7 氯霉素可以诱导耻垢分枝杆菌中MS0232转录水平上调 | 第48-49页 |
| 4.8 RV0191启动子活性在氯霉素压力下增强 | 第49-50页 |
| 4.9 MS0232缺失影响菌体表面特性 | 第50-51页 |
| 4.10 MS0232缺失改变耻垢分枝杆菌菌体形态 | 第51-52页 |
| 4.11 结核分枝杆菌RV0191上游调控因子的预测和蛋白纯化 | 第52页 |
| 4.12 结核分枝杆菌RV1353C与自身和RV0191启动子特异性结合 | 第52-55页 |
| 4.13 RV1353C重组耻垢分枝杆菌对氯霉素敏感 | 第55-56页 |
| 4.14 结核分枝杆菌RV1353C负调控RV0191的转录 | 第56-58页 |
| 第5章 实验结论与展望 | 第58-62页 |
| 5.1 实验结论 | 第58页 |
| 5.2 讨论与展望 | 第58-62页 |
| 参考文献 | 第62-74页 |
| 致谢 | 第74-76页 |
| 附录 | 第76-78页 |
| 硕士期间发表和撰写的论文 | 第78页 |
