摘要 | 第6-8页 |
ABSTRACT | 第8-9页 |
缩略词表 | 第10-11页 |
1 前言 | 第11-22页 |
1.1 研究问题的由来 | 第11-12页 |
1.2 文献综述 | 第12-21页 |
1.2.1 bHLH转录因子的结构与功能 | 第12页 |
1.2.2 拟南芥中bHLH转录因子功能的研究进展 | 第12-16页 |
1.2.3 水稻中bHLH转录因子功能研究进展 | 第16-18页 |
1.2.4 基因功能研究技术进展 | 第18-20页 |
1.2.5 转录因子OsbHLH153的研究进展 | 第20-21页 |
1.3 研究目的和意义 | 第21-22页 |
2 材料与方法 | 第22-31页 |
2.1 材料 | 第22页 |
2.2 基因序列与蛋白序列的获取和分析 | 第22-23页 |
2.3 实验方法 | 第23-31页 |
2.3.1 突变体转基因阳性检测 | 第23-24页 |
2.3.2 突变体基因型检测 | 第24-25页 |
2.3.3 突变体靶标基因突变形式检测 | 第25页 |
2.3.4 载体的构建及遗传转化 | 第25-27页 |
2.3.5 田间种植、表型观察与统计 | 第27页 |
2.3.6 稳定遗传材料的获得 | 第27-28页 |
2.3.7 同源基因信息查找 | 第28-29页 |
2.3.8 酵母双杂交 | 第29-30页 |
2.3.9 水稻表达谱数据分析 | 第30-31页 |
3 结果与分析 | 第31-53页 |
3.1 转录因子OsbHLH153的基因信息分析 | 第31-33页 |
3.1.1 转录因子OsbHLH153的同源性分析 | 第31页 |
3.1.2 OsbHLH153同源因子的序列比对和进化树分析 | 第31-33页 |
3.2 利用CRISPR/CAS9基因编辑技术构建突变体 | 第33-40页 |
3.2.1 突变体材料的基因型与表型鉴定 | 第34-36页 |
3.2.2 突变体基因型与表型验证以及性状考察 | 第36-39页 |
3.2.3 单突突变体构建 | 第39-40页 |
3.3 过表达验证基因的功能 | 第40-45页 |
3.3.1 超表达载体的构建与遗传转化 | 第40-41页 |
3.3.2 超表达材料T0代苗子阳性检测 | 第41-42页 |
3.3.3 超表达材料组培阶段表型观测与分析 | 第42-45页 |
3.4 基因表达模式分析 | 第45-48页 |
3.4.1 三基因表达模式图谱分析 | 第45-47页 |
3.4.2 三基因表达模式载体构建 | 第47-48页 |
3.5 互作因子的查找和初步筛选 | 第48-53页 |
3.5.1 互作因子信息的查找 | 第48-50页 |
3.5.2 互作因子酵母双杂交载体构建 | 第50-51页 |
3.5.3 通过酵母双杂交进行互作因子的初步筛选 | 第51-53页 |
4 讨论 | 第53-55页 |
4.1 CRISPR/CAS9转基因材料的稳定性 | 第53页 |
4.2 水稻OsbHLH153的功能与拟南芥中AtbHLH135的功能分析 | 第53-55页 |
参考文献 | 第55-65页 |
附录 | 第65-83页 |
本研究所用到引物信息 | 第65-67页 |
部分实验的详细操作步骤 | 第67-83页 |
致谢 | 第83页 |