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NGF在卵母细胞成熟过程中的功能研究

摘要第5-7页
ABSTRACT第7-8页
符号说明第13-15页
第1章 绪论第15-41页
    1.1 卵泡发生第15-25页
        1.1.1 原始卵泡第16页
        1.1.2 初级卵泡第16-17页
        1.1.3 次级卵泡第17-24页
            1.1.3.1 有腔卵泡形成第18-19页
            1.1.3.2 激素合成与分泌第19-22页
            1.1.3.3 卵母细胞减数分裂恢复第22-23页
            1.1.3.4 卵丘细胞扩展第23-24页
        1.1.4 成熟卵泡排卵第24-25页
    1.2 颗粒细胞和卵母细胞的交流第25-32页
        1.2.1 颗粒细胞和卵母细胞交流的结构基础第25-29页
        1.2.2 卵母细胞和颗粒细胞之间的双向交流第29-32页
    1.3 多囊卵巢综合征第32-41页
        1.3.1 多囊卵巢综合征的临床诊断第32-33页
        1.3.2 PCOS的研究及进展第33-40页
            1.3.2.1 卵巢外因素与PCOS第33-35页
            1.3.2.2 卵巢内因素与PCOS第35-37页
            1.3.2.3 NGF与PCOS第37-39页
            1.3.2.4 GDF9和BMP15与PCOS第39-40页
        1.3.3 多囊卵巢综合征的治疗第40-41页
第2章 高浓度的NGF抑制卵母细胞成熟的研究第41-67页
    2.1 引言第41-43页
    2.2 研究结果第43-59页
        2.2.1 高浓度的NGF抑制COC的减数分裂成熟第43-49页
            2.2.1.1 NGF以及NGF受体的格拉夫卵泡阶段的细胞定位第43-45页
            2.2.1.2 NGF促进裸卵减数分裂重新启动第45-46页
            2.2.1.3 NGF提高裸卵中成熟促进因子的表达第46-47页
            2.2.1.4 高浓度的NGF抑制COC的减数分裂成熟第47-49页
        2.2.2 高浓度的NGF抑制COC中卵丘细胞的糖酵解第49-50页
        2.2.3 高浓度NGF对于糖酵解的抑制效应依赖于双向交流第50-53页
            2.2.3.1 NGF抑制COC的卵丘细胞中的糖酵解依赖于卵母细胞第50-52页
            2.2.3.2 NGF抑制COC中的卵母细胞旁分泌因子表达第52-53页
        2.2.4 高浓度NGF通过卵丘细胞调控卵母细胞旁分泌因子的表达第53-56页
            2.2.4.1 高浓度NGF抑制卵母细胞旁分泌因子的表达依赖于卵丘细胞第53-55页
            2.2.4.2 高浓度的NGF刺激颗粒细胞,分泌抑制性因子调控ODPFs的合成第55-56页
        2.2.5 PCOS来源的卵丘细胞中的糖酵解水平下降第56-57页
        2.2.6 模式图第57-59页
    2.3 高浓度的NGF对COC的成熟抑制依赖于NPPC/NPR2途径第59-63页
        2.3.1 引言第59页
        2.3.2 NGF调控Impdh和Npr2表达第59-60页
        2.3.3 NGF可以直接调控卵丘细胞中的Npr2表达第60-61页
        2.3.4 Npr2在PCOS患者来源的卵丘细胞中的表达第61-62页
        2.3.5 本节小结第62-63页
    2.4 结果分析与讨论第63-67页
第3章 实验材料与方法第67-83页
    3.1 实验动物与试剂第67-70页
        3.1.1 实验动物第67页
        3.1.2 动物实验的试剂第67页
        3.1.3 小鼠细胞和人颗粒细胞分离的试剂第67-68页
        3.1.4 小鼠细胞培养试剂第68页
        3.1.5 小鼠卵巢组织免疫组化的试剂和材料第68页
        3.1.6 分子生物学相关材料和试剂第68-70页
        3.1.7 人卵泡液NGF检测第70页
    3.2 实验器材第70-71页
        3.2.1 小鼠实验相关器材第70页
        3.2.2 细胞分离相关器材第70-71页
        3.2.3 细胞培养相关器材第71页
        3.2.4 其他器材第71页
    3.3 实验方法第71-81页
        3.3.1 小鼠COC的分离与收集第71-72页
        3.3.2 不同直径的卵泡分离第72页
        3.3.3 裸卵和CCs/OOX的制作第72页
        3.3.4 卵母细胞体外减数分裂成熟的评估第72-73页
        3.3.5 第一极体体积计算第73页
        3.3.6 COC,裸卵,卵丘细胞的培养以及裸卵和卵丘细胞的共培养第73页
        3.3.7 小鼠卵泡液浓度估算第73-74页
        3.3.8 总RNA抽提第74-75页
        3.3.9 总RNA反转录与实时荧光定量PCR(real-time PCR)第75-76页
        3.3.10 卵巢免疫组化(IHC)第76-78页
        3.3.11 人的壁层颗粒细胞、卵丘细胞和卵泡液的收集第78-80页
        3.3.12 人卵泡液中NGF浓度的检测第80-81页
    3.4 数据分析第81-83页
参考文献第83-109页
致谢第109-111页
攻读博士学位期间的主要研究成果第111页

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