| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 实验器材及试剂 | 第7-12页 |
| 第1章 前言 | 第12-22页 |
| 1 表皮生长因子（EGF） | 第12-13页 |
| 2 表皮生长因子受体（EGFR） | 第13-16页 |
| 3 表皮生长因子受体底物 15（Eps15） | 第16-20页 |
| 4 本课题研究的目的、内容及意义 | 第20-22页 |
| 第2章 池蝶蚌Eps15基因的c DNA序列克隆及分析 | 第22-40页 |
| 1 材料与方法 | 第22-29页 |
| 1.1 材料 | 第22-23页 |
| 1.2 方法 | 第23-29页 |
| 1.2.1 池蝶蚌总RNA的提取 | 第23页 |
| 1.2.2 基因组DNA的消化处理 | 第23-24页 |
| 1.2.3 反转录PCR合成c DNA | 第24页 |
| 1.2.4 引物设计 | 第24-25页 |
| 1.2.5 池蝶蚌Eps15基因c DNA序列的克隆 | 第25-26页 |
| 1.2.6 目的片段的回收、连接、转化与测序 | 第26-28页 |
| 1.2.7 序列拼接及分析 | 第28-29页 |
| 2 结果与分析 | 第29-38页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第29页 |
| 2.2 池蝶蚌Eps15基因c DNA序列扩增结果及鉴定 | 第29-30页 |
| 2.3 池蝶蚌Eps15基因c DNA序列的基本分析 | 第30-33页 |
| 2.4 池蝶蚌Eps15基因的生物信息学分析 | 第33-38页 |
| 2.4.1 氨基酸组成及理化性质分析 | 第33-34页 |
| 2.4.2 蛋白质亲疏水性及信号肽 | 第34-35页 |
| 2.4.3 亚细胞定位预测分析 | 第35页 |
| 2.4.4 跨膜区结构预测分析 | 第35页 |
| 2.4.5 蛋白质二级结构预测分析 | 第35-37页 |
| 2.4.6 基因Hs-Eps15的系统进化分析 | 第37-38页 |
| 3 讨论 | 第38-40页 |
| 第3章 池蝶蚌Eps15基因在不同组织中的表达分析 | 第40-47页 |
| 1 材料和方法 | 第40-42页 |
| 1.1 材料 | 第40页 |
| 1.2 方法 | 第40-42页 |
| 1.2.1 池蝶蚌各组织总RNA提取 | 第40-41页 |
| 1.2.2 基因组DNA消化处理 | 第41页 |
| 1.2.3 反转录PCR合成c DNA | 第41页 |
| 1.2.4 引物设计 | 第41-42页 |
| 1.2.5 荧光定量PCR | 第42页 |
| 2 结果 | 第42-45页 |
| 2.1 总RNA提取 | 第42-43页 |
| 2.2 引物效果及反转录效果检测 | 第43-44页 |
| 2.3 池蝶蚌Eps15基因的组织表达谱分析 | 第44-45页 |
| 3 讨论 | 第45-47页 |
| 第4章 池蝶蚌Eps15蛋白的原核表达及免疫荧光定位 | 第47-66页 |
| 1 材料与方法 | 第47-55页 |
| 1.1 材料 | 第47页 |
| 1.2 方法 | 第47-55页 |
| 1.2.1 表达引物设计 | 第47-48页 |
| 1.2.2 重组表达载体的构建 | 第48-50页 |
| 1.2.3 融合蛋白的表达及纯化 | 第50-52页 |
| 1.2.4 蛋白浓度测定 | 第52页 |
| 1.2.5 多克隆抗体的制备 | 第52-53页 |
| 1.2.6 ELISA间接法测定多克隆抗体效价 | 第53页 |
| 1.2.7 Western blot检测Hs-Eps15多克隆抗体 | 第53-54页 |
| 1.2.8 Hs-Eps15蛋白在池蝶蚌组织中的细胞定位 | 第54-55页 |
| 2 结果与分析 | 第55-63页 |
| 2.1 PCR扩增目的表达片段 | 第55-56页 |
| 2.2 阳性重组质粒的筛选 | 第56页 |
| 2.3 重组质粒提取结果 | 第56-57页 |
| 2.4 融合蛋白的诱导表达 | 第57-58页 |
| 2.5 融合蛋白的纯化及浓缩 | 第58页 |
| 2.6 Bradford法测定融合蛋白浓度 | 第58-59页 |
| 2.7 ELISA间接法测定多克隆抗血清效价 | 第59-60页 |
| 2.8 Western blot检测抗体特异性 | 第60页 |
| 2.9 HE染色 | 第60-62页 |
| 2.10 免疫荧光定位 | 第62-63页 |
| 3 讨论 | 第63-66页 |
| 第5章 结论与展望 | 第66-68页 |
| 1 结论 | 第66-67页 |
| 2 展望 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68-70页 |
| 参考文献 | 第70-76页 |
