中文摘要 | 第2-4页 |
Abstract | 第4-5页 |
符号说明 | 第8-9页 |
第一部分 文献概述 | 第9-21页 |
1. 呼肠孤病毒科概述 | 第9页 |
2. 正呼肠孤病毒概述 | 第9-10页 |
3. 禽呼肠孤病毒概述 | 第10-11页 |
4. 病毒特性 | 第11页 |
5. GRV病毒的分子生物学特性 | 第11-15页 |
6. 病毒的流行病学 | 第15-17页 |
7. 病毒的致病性 | 第17-18页 |
8. 诊断方法 | 第18-19页 |
9. 疾病的预防 | 第19-21页 |
第二部分 鹅呼肠孤病毒的分离与鉴定 | 第21-42页 |
1. 材料 | 第21-23页 |
1.1 病料的采集 | 第21页 |
1.2 SPF鸡胚与实验动物 | 第21页 |
1.3 细胞系 | 第21-22页 |
1.4 主要试剂及试剂盒 | 第22页 |
1.5 主要溶液与培养基的配制 | 第22-23页 |
1.6 主要实验仪器 | 第23页 |
2 方法 | 第23-31页 |
2.1 鹅呼肠孤病毒的分离与血清学鉴定 | 第23-25页 |
2.2 病毒的感染力的测定 | 第25-26页 |
2.3 病毒的理化特性鉴定 | 第26页 |
2.4 病毒的分子生物学鉴定 | 第26-31页 |
3. 结果 | 第31-40页 |
3.1 病毒分离与生化鉴定结果 | 第31-33页 |
3.2 病毒感染力的测定结果 | 第33-37页 |
3.3 病毒理化特性试验结果 | 第37-38页 |
3.4 病毒的分子生物学鉴定结果 | 第38-40页 |
4. 讨论 | 第40-42页 |
第三部分 鹅呼肠孤病毒的全基因序列分析 | 第42-55页 |
1. 材料 | 第42-43页 |
1.1 病毒 | 第42页 |
1.2 主要试剂 | 第42-43页 |
1.3 质粒和宿主菌 | 第43页 |
1.4 培养基 | 第43页 |
1.5 主要仪器 | 第43页 |
2. 方法 | 第43-48页 |
2.1 引物的设计与合成 | 第43-45页 |
2.2 病毒RNA的提取 | 第45页 |
2.3 反转录(RT) | 第45-46页 |
2.4 聚合酶链式反应(PCR) | 第46-47页 |
2.5 琼脂糖凝胶电泳及胶回收 | 第47页 |
2.6 DH5α感受态细胞的制备 | 第47页 |
2.7 目的基因与pMD-19T Simple载体的连接与转化 | 第47页 |
2.8 重组质粒的挑选与鉴定 | 第47-48页 |
2.9 病毒基因序列的分析及系统进化树的建立 | 第48页 |
3. 结果与分析 | 第48-53页 |
3.1 GRV JS2012株基因特性分析 | 第48-49页 |
3.2 GRV JS2012株病毒与GRV,DRV及ARV的同源性分析 | 第49页 |
3.3 GRV JS2012株病毒基因序列系统进化分析 | 第49-53页 |
4. 讨论 | 第53-55页 |
结论 | 第55-56页 |
参考文献 | 第56-62页 |
致谢 | 第62-63页 |