个人简历 | 第3-8页 |
英文缩略词 | 第8-9页 |
摘要 | 第9-14页 |
第一章 罗汉果鲨烯合酶基因的克隆及酶分子结构分析 | 第9-11页 |
第二章 罗汉果鲨烯合酶原核表达载体的构建及酶纯化与酶活性鉴定 | 第11-12页 |
第三章 罗汉果鲨烯合酶氨基酸残基S~(48)和S~(196)对酶活性的影响 | 第12-13页 |
第四章 罗汉果鲨烯合酶在植物组织器官表达模式分析 | 第13-14页 |
ABSTRACT | 第14-21页 |
Chapter 1 Gene cloning and molecular structure analysis of squalene synthase from Siraitia grosvenorii | 第15-17页 |
Chapter 2 Construction of prokaryotic expression vector, purification and activity identification of squalene synthase from Siraitia grosvenorii | 第17-19页 |
Chapter 3 Effects of amino acid residues S~(48) and S~(196) of squalene synthasefrom siraitia grosvenorii on enzymatic active | 第19-20页 |
Chapter 4 Analysis of expression profiling of squalene synthase fromSiraitia grosvenorii in plant tissues and organs | 第20-22页 |
前言 | 第22-27页 |
参考文献 | 第25-27页 |
第一章 罗汉果鲨烯合酶基因的克隆及酶分子结构分析 | 第27-46页 |
1 材料和方法 | 第28-33页 |
1.1 材料 | 第28-29页 |
1.2 方法 | 第29-33页 |
2 结果 | 第33-42页 |
2.1 罗汉果叶组织总RNA的提取结果 | 第33页 |
2.2 PCR扩增罗汉果鲨烯合酶基因片段及cDNA 3′末端序列结果 | 第33-34页 |
2.3 克隆罗汉果鲨烯合酶cDNA结果 | 第34-35页 |
2.4 生物信息学方法分析罗汉果鲨烯合酶分子结构 | 第35-42页 |
3 讨论 | 第42-44页 |
参考文献 | 第44-46页 |
第二章 罗汉果鲨烯合酶原核表达载体的构建及酶纯化与酶活性鉴定 | 第46-61页 |
1 材料和方法 | 第50-55页 |
1.1 材料 | 第50-51页 |
1.2 方法 | 第51-55页 |
2 结果 | 第55-58页 |
2.1 构建p ET-28a(+)-SS及p ET-21a(+)-SS表达载体 | 第55-56页 |
2.2 IPTG诱导罗汉果鲨烯合酶蛋白表达 | 第56页 |
2.3 罗汉果鲨烯合酶蛋白纯化 | 第56-57页 |
2.4 罗汉果鲨烯合酶酶活性检测 | 第57页 |
2.5 罗汉果鲨烯合酶生物化学特征 | 第57-58页 |
3 讨论 | 第58-59页 |
参考文献 | 第59-61页 |
第三章 罗汉果鲨烯合酶氨基酸残基S~(48)和S~(196)对酶活性的影响 | 第61-74页 |
1 材料和方法 | 第63-68页 |
1.1 材料 | 第63页 |
1.2 方法 | 第63-68页 |
2 结果 | 第68-71页 |
2.1 pcDNA3.1-SS的构建 | 第68页 |
2.2 定点突变构建pcDNA3.1-SS-S48,pcDNA3.1-SS-S196,pcDNA3.1-SS-S48-S196质粒 | 第68-69页 |
2.3 建立稳定表达鲨烯合酶、SS-S48A、SS-S196A、SS-S48A-S196A的细胞 | 第69-70页 |
2.4 罗汉果鲨烯合酶、SS-S48A、SS-S196A、SS-S48A-S196A酶活性检测 | 第70-71页 |
3 讨论 | 第71-72页 |
参考文献 | 第72-74页 |
第四章 罗汉果鲨烯合酶在植物组织器官表达模式分析 | 第74-85页 |
1 材料和方法 | 第75-78页 |
1.1 材料 | 第75-76页 |
1.2 方法 | 第76-78页 |
2 结果 | 第78-81页 |
2.1 罗汉果根、茎、叶及花总RNA的提取结果 | 第78-79页 |
2.2 罗汉果鲨烯合酶 18S基因片段克隆结果 | 第79-80页 |
2.3 实时荧光定量PCR检测罗汉果各植物器官鲨烯合酶差异性表达 | 第80-81页 |
3 讨论 | 第81-83页 |
参考文献 | 第83-85页 |
讨论 | 第85-90页 |
参考文献 | 第88-90页 |
罗汉果苷生物合成途径关键酶研究进展 | 第90-107页 |
1 HMGR的结构与功能 | 第93-94页 |
2 鲨烯合酶的结构与功能 | 第94-96页 |
3 SE的结构与功能 | 第96-98页 |
4 OSC的结构与功能 | 第98页 |
5 展望 | 第98页 |
参考文献 | 第98-107页 |
致谢 | 第107-108页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第108页 |