| 摘要 | 第7-9页 |
| Abstract | 第9-10页 |
| 第一章 文献综述 | 第12-24页 |
| 1 苹果蠹蛾的危害、起源及对我国的入侵 | 第12-13页 |
| 1.1 起源和分布 | 第12页 |
| 1.2 我国入侵历史 | 第12-13页 |
| 2 苹果蠹蛾的综合防控技术现状 | 第13-16页 |
| 2.1 苹果蠹蛾的检疫措施 | 第13页 |
| 2.2 非疫区建设和疫区的虫源根除 | 第13-14页 |
| 2.3 疫区的综合防治现状 | 第14-15页 |
| 2.4 不育昆虫释放技术(sterile insect technique,SIT) | 第15-16页 |
| 3 昆虫遗传修饰技术对SIT的改进及研究进展 | 第16-20页 |
| 3.1 昆虫遗传修饰技术对SIT的改进 | 第16-17页 |
| 3.2 昆虫遗传修饰技术的研究进展 | 第17-20页 |
| 4 研究思路 | 第20-24页 |
| 4.1 立题依据 | 第20-22页 |
| 4.2 研究内容 | 第22-23页 |
| 4.3 技术路线 | 第23-24页 |
| 第二章 苹果蠹蛾卵黄蛋白原CpVg的鉴定、表达及启动子活性分析 | 第24-52页 |
| 1 材料与方法 | 第24-32页 |
| 1.1 供试昆虫和细胞系 | 第24页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第24-26页 |
| 1.3 苹果蠹蛾卵黄蛋白原CpVg cDNA全长的克隆、序列分析 | 第26-28页 |
| 1.4 CpVg在苹果蠹蛾体内的转录分析 | 第28-29页 |
| 1.5 CpVg上游调控序列的功能鉴定 | 第29-31页 |
| 1.6 统计学处理 | 第31-32页 |
| 2 结果与分析 | 第32-50页 |
| 2.1 CpVgcDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第32-38页 |
| 2.2 CpVg内含子分析 | 第38页 |
| 2.3 CpVg的表达谱 | 第38-41页 |
| 2.4 CpVg上游调控序列的克隆及生物信息学分析 | 第41-48页 |
| 2.5 CpVg核心启动子的功能鉴定 | 第48-50页 |
| 3 讨论 | 第50-52页 |
| 3.1 卵黄蛋白原基因的保守性 | 第50页 |
| 3.2 不同种属的昆虫Vg数量及其mRNA的长度 | 第50页 |
| 3.3 CpVg的性别、发育阶段和组织表达的特异性 | 第50-51页 |
| 3.4 CpVg上游核心启动子区域的鉴定及应用 | 第51-52页 |
| 第三章 苹果蠹蛾胚盘细胞分裂基因CpSry-α基因的鉴定、表达及启动子活性分析 | 第52-72页 |
| 1 材料与方法 | 第52-54页 |
| 1.1 供试昆虫和细胞系 | 第52页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第52页 |
| 1.3 苹果蠹蛾Serendipity-α(CpSry-α)基因的鉴定及生物信息学分析 | 第52-53页 |
| 1.4 CpSry-α在苹果蠹蛾体内的转录分析 | 第53页 |
| 1.5 CpSry-α上游调控序列的功能鉴定 | 第53-54页 |
| 2 结果与分析 | 第54-68页 |
| 2.1 CpSy-αcDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第54-59页 |
| 2.2 CpSry-α蛋白的表达谱 | 第59-61页 |
| 2.3 CpSry-α上游调控序列的克隆及生物信息学分析 | 第61-66页 |
| 2.4 CpSry-α核心启动子的功能鉴定 | 第66-68页 |
| 3 讨论 | 第68-72页 |
| 3.1 Sry-α氨基酸序列的保守性 | 第68-69页 |
| 3.2 Sry-α的性别、发育阶段和组织表达的特异性 | 第69页 |
| 3.3 CpSry-α上游核心启动子区域的鉴定及应用 | 第69-72页 |
| 第四章 热激蛋白基因启动子鉴定及活性分析 | 第72-86页 |
| 1 材料与方法 | 第72-75页 |
| 1.1 供试昆虫和细胞系 | 第72页 |
| 1.2 试剂和仪器 | 第72页 |
| 1.3 Cphsp70-1上游调控序列的鉴定 | 第72-74页 |
| 1.4 Cphsp70-1上游调控序列启动活性的鉴定 | 第74-75页 |
| 2 结果与分析 | 第75-83页 |
| 2.1 Cphsp70-1gDNA全长克隆及Cphsp70-1基因组信息学分析 | 第75页 |
| 2.2 Cphsp70-1上游调控序列的获得 | 第75-76页 |
| 2.3 Cphsp70-1上游调控序列的生物信息学分析 | 第76-81页 |
| 2.4 Cphsp70-1核心启动子的功能鉴定 | 第81-83页 |
| 3 讨论 | 第83-86页 |
| 3.1 鉴定hsp70上游调控区域不同长度序列活性的重要性 | 第83-84页 |
| 3.2 调控元件的讨论 | 第84-86页 |
| 第五章 苹果蠹蛾Caspase基因的表达及功能分析 | 第86-112页 |
| 1 材料与方法 | 第86-89页 |
| 1.1 供试昆虫 | 第86页 |
| 1.2 试剂和设备 | 第86-87页 |
| 1.3 苹果蠹蛾Caspase基因的鉴定及生物信息学分析 | 第87-88页 |
| 1.4 CpCasp在苹果蠹蛾体内的转录分析 | 第88页 |
| 1.5 紫外线照射处理对苹果蠹蛾体内CpCasp表达量的影响 | 第88页 |
| 1.6 RNAi验证CpCasp的功能 | 第88-89页 |
| 2 结果与分析 | 第89-108页 |
| 2.1 苹果蠹蛾Caspase基因cDNA全长克隆及生物信息学分析 | 第89-96页 |
| 2.2 CpCasp基因推导蛋白系统发育分析 | 第96-98页 |
| 2.3 苹果蠢蛾CpCasp基因的表达谱 | 第98-106页 |
| 2.4 紫外线辐射对CpCasp表达量的影响 | 第106-107页 |
| 2.5 CpCasp的功能验证 | 第107-108页 |
| 3 讨论 | 第108-112页 |
| 3.1 凋亡的重要性和Caspase的种类 | 第108-109页 |
| 3.2 CpCasp发育阶段表达的特异性 | 第109-110页 |
| 3.3 CpCasp组织表达的特异性 | 第110页 |
| 3.4 紫外线照射对凋亡基因的影响 | 第110页 |
| 3.5 RNAi的效果 | 第110-112页 |
| 第六章 雌性特异性致死品系和胚胎条件致死品系驱动载体与效应载体的构建 | 第112-118页 |
| 1 材料与方法 | 第112-114页 |
| 1.1 生化试剂和质粒 | 第112页 |
| 1.2 主要仪器及设备 | 第112页 |
| 1.3 驱动载体的构建策略与步骤 | 第112-113页 |
| 1.4 效应载体的构建策略与步骤 | 第113-114页 |
| 2 结果与分析 | 第114-117页 |
| 2.1 雌性特异性致死和胚胎发育早期致死驱动载体的构建 | 第114-115页 |
| 2.2 苹果蠹蛾效应载体的构建 | 第115-117页 |
| 3 讨论 | 第117-118页 |
| 总结 | 第118-120页 |
| 参考文献 | 第120-130页 |
| 致谢 | 第130-132页 |
| 博士后期间发表的学术论文及参研项目 | 第132页 |
