| 摘要 | 第4-6页 |
| Abstract | 第6-7页 |
| 中英文对照表 | 第8-13页 |
| 1 文献综述 | 第13-26页 |
| 1.1 瘦素及其受体的结构和特征 | 第14-15页 |
| 1.1.1 瘦素结构特征 | 第14页 |
| 1.1.2 瘦素受体结构特征 | 第14-15页 |
| 1.2 瘦素受体表达分布 | 第15页 |
| 1.3 瘦素的信号转导机制 | 第15-16页 |
| 1.4 瘦素的主要功能 | 第16-23页 |
| 1.4.1 瘦素与能量代谢 | 第16-17页 |
| 1.4.2 瘦素与动物繁殖 | 第17-23页 |
| 1.4.2.1 瘦素对激素分泌的影响 | 第17-18页 |
| 1.4.2.2 瘦素对初情期启动的影响 | 第18-19页 |
| 1.4.2.3 瘦素对生殖器官发育的影响 | 第19-20页 |
| 1.4.2.4 瘦素对胚胎附植的影响 | 第20页 |
| 1.4.2.5 瘦素对胎盘发育的影响 | 第20-21页 |
| 1.4.2.6 瘦素对胎儿发育的影响 | 第21-22页 |
| 1.4.2.7 瘦素对乳腺发育的影响 | 第22页 |
| 1.4.2.8 瘦素对卵泡发育的影响 | 第22-23页 |
| 1.5 卵泡闭锁的调节因素 | 第23-24页 |
| 1.6 细胞凋亡途径及相关因子 | 第24-25页 |
| 1.7 研究的目的、意义及内容 | 第25-26页 |
| 2 卵巢颗粒细胞的分离与鉴定 | 第26-37页 |
| 2.1 试验材料 | 第26-27页 |
| 2.1.1 试验动物 | 第26页 |
| 2.1.2 组织采集 | 第26页 |
| 2.1.3 主要试剂 | 第26页 |
| 2.1.4 主要仪器 | 第26-27页 |
| 2.1.5 主要器材 | 第27页 |
| 2.2 试验方法 | 第27-30页 |
| 2.2.1 溶液配制 | 第27-28页 |
| 2.2.2 猪颗粒细胞的分离 | 第28页 |
| 2.2.3 培养基的筛选 | 第28页 |
| 2.2.4 卵巢颗粒细胞鉴定 | 第28-29页 |
| 2.2.5 卵巢颗粒细胞生长曲线的绘制 | 第29-30页 |
| 2.3 结果 | 第30-35页 |
| 2.3.1 猪卵巢颗粒细胞的原代培养 | 第30页 |
| 2.3.2 不同培养基对猪卵巢颗粒细胞贴壁率的影响 | 第30页 |
| 2.3.3 猪卵巢细胞形态观察 | 第30-31页 |
| 2.3.4 猪卵巢颗粒细胞鉴定 | 第31-34页 |
| 2.3.5 猪卵巢颗粒细胞生长曲线 | 第34-35页 |
| 2.4 讨论 | 第35-37页 |
| 3 瘦素对猪颗粒细胞增殖、凋亡与分泌功能的影响 | 第37-44页 |
| 3.1 试验材料 | 第37页 |
| 3.1.1 主要试剂 | 第37页 |
| 3.1.2 主要仪器 | 第37页 |
| 3.2 试验设计 | 第37-38页 |
| 3.3 试验方法 | 第38页 |
| 3.3.1 CCK8法检测猪卵巢颗粒细胞活力 | 第38页 |
| 3.3.2 流式细胞仪检测猪卵巢颗粒细胞凋亡 | 第38页 |
| 3.3.3 Elisa法检测猪卵巢颗粒细胞E2、P4的分泌 | 第38页 |
| 3.4 数据统计分析 | 第38-39页 |
| 3.5 结果 | 第39-41页 |
| 3.5.1 不同浓度瘦素对猪卵巢颗粒细胞活力的影响 | 第39页 |
| 3.5.2 不同浓度瘦素对猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响 | 第39-40页 |
| 3.5.3 不同浓度瘦素对猪卵巢颗粒细胞P4、E2分泌的影响 | 第40-41页 |
| 3.6 讨论 | 第41-44页 |
| 3.6.1 瘦素对颗粒细胞增殖与凋亡的影响 | 第41-42页 |
| 3.6.2 瘦素对颗粒细胞分泌E2、P4的影响 | 第42-44页 |
| 4 瘦素对卵巢颗粒细胞增殖与凋亡的信号通路研究 | 第44-54页 |
| 4.1 材料与方法 | 第44-47页 |
| 4.1.1 主要试剂 | 第44页 |
| 4.1.2 主要仪器 | 第44页 |
| 4.1.3 方法 | 第44-47页 |
| 4.1.3.1 RNA提取 | 第44-45页 |
| 4.1.3.2 逆转录合成cDNA | 第45-46页 |
| 4.1.3.3 实时荧光定量PCR检测基因表达 | 第46-47页 |
| 4.2 数据统计分析 | 第47页 |
| 4.3 结果 | 第47-50页 |
| 4.3.1 瘦素受体的mRNA表达 | 第47页 |
| 4.3.2 细胞凋亡因子Bcl-2、Bax、Bcl-2/Bax以及Bad的mRNA表达 | 第47-48页 |
| 4.3.3 细胞凋亡因子与Caspase-3的mRNA表达 | 第48-49页 |
| 4.3.4 pi3k/akt信号通路相关基因 | 第49-50页 |
| 4.4 讨论 | 第50-54页 |
| 4.4.1 瘦素与瘦素长型受体 | 第50-51页 |
| 4.4.2 瘦素对卵巢颗粒细胞凋亡因子表达的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.3 pi3k/akt通路与细胞凋亡 | 第52-54页 |
| 5 结论 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
| 作者简介 | 第68页 |
