| 摘要 | 第3-4页 |
| Abstract | 第4页 |
| 英文缩略词表 | 第5-9页 |
| 第一章 绪论 | 第9-17页 |
| 1.1 氧化应激与急性肺损伤 | 第9-11页 |
| 1.2 亚甲蓝抗氧化作用概述 | 第11-12页 |
| 1.3 血红素加氧酶-1概述 | 第12-15页 |
| 1.4 本课题的研究目的及意义 | 第15页 |
| 1.5 本课题研究内容 | 第15-17页 |
| 第二章 亚甲蓝对H_2O_2诱导的RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用 | 第17-33页 |
| 2.1 引言 | 第17页 |
| 2.2 实验材料 | 第17-18页 |
| 2.2.1 实验细胞株 | 第17页 |
| 2.2.2 材料及试剂 | 第17-18页 |
| 2.2.3 实验仪器 | 第18页 |
| 2.3 实验方法 | 第18-25页 |
| 2.3.1 细胞培养 | 第18-19页 |
| 2.3.2 细胞给药和分组 | 第19页 |
| 2.3.3 MTT法测细胞存活率 | 第19-20页 |
| 2.3.4 DCFH-DA探针染色测量细胞内ROS含量 | 第20页 |
| 2.3.5 细胞培养上清LDH检测 | 第20页 |
| 2.3.6 Csapase-3蛋白活性检测 | 第20-21页 |
| 2.3.7 流式细胞仪检测细胞凋亡 | 第21页 |
| 2.3.8 蛋白印迹分析(Western Blot) | 第21-22页 |
| 2.3.9 细胞内过氧化氢含量检测 | 第22-23页 |
| 2.3.10 细胞内ATP含量测定 | 第23页 |
| 2.3.11 细胞内SOD活力测定 | 第23页 |
| 2.3.12 高内涵细胞分析仪对线粒体功能的检测 | 第23-25页 |
| 2.3.13 统计学处理分析数据 | 第25页 |
| 2.4 结果与讨论 | 第25-31页 |
| 2.4.1 MB对H_2O_2诱导的RAW264.7细胞损伤的保护作用 | 第25-26页 |
| 2.4.2 MB对H_2O_2诱导的RAW264.7细胞氧化损伤的保护作用 | 第26-27页 |
| 2.4.3 高内涵细胞成像分析系统检测细胞线粒体功能 | 第27-29页 |
| 2.4.4 MB预处理和后处理对细胞H_2O_2导致的细胞凋亡的影响 | 第29-31页 |
| 2.5 本章小结 | 第31-33页 |
| 第三章 亚甲蓝通过上调HO-1保护RAW264.7细胞氧化应激损伤 | 第33-48页 |
| 3.1 引言 | 第33页 |
| 3.2 实验材料 | 第33-34页 |
| 3.2.1 实验细胞株 | 第33页 |
| 3.2.2 材料及试剂 | 第33-34页 |
| 3.2.3 实验仪器 | 第34页 |
| 3.3 实验方法 | 第34-39页 |
| 3.3.1 实验分组 | 第34-35页 |
| 3.3.2 DHE探针染色观察细胞内ROS含量 | 第35-36页 |
| 3.3.3 线粒体膜电位检测 | 第36页 |
| 3.3.4 HO-1活性检测 | 第36-37页 |
| 3.3.5 小干扰RNA沉默转染法 | 第37页 |
| 3.3.6 实时荧光定量PCR(qPCR) | 第37-39页 |
| 3.3.7 统计学处理分析数据 | 第39页 |
| 3.4 结果与结论 | 第39-47页 |
| 3.4.1 MB处理对H_2O_2刺激的RAW264.7细胞HO-1的蛋白表达和酶活性的影响 | 第39-40页 |
| 3.4.2 抑制HO-1对MB的抗细胞损伤作用的影响 | 第40-41页 |
| 3.4.3 抑制HO-1对MB抗氧化损伤作用的影响 | 第41-43页 |
| 3.4.4 抑制HO-1表达和活性对MB线粒体保护作用的影响 | 第43页 |
| 3.4.5 抑制HO-1对MB抗凋亡作用的影响 | 第43-45页 |
| 3.4.6 MB对巨噬细胞表型极化的影响 | 第45-47页 |
| 3.5 本章小结 | 第47-48页 |
| 第四章 HO-1入核对H_2O_2诱导的RAW264.7氧化损伤的保护作用 | 第48-57页 |
| 4.1 引言 | 第48页 |
| 4.2 实验材料 | 第48-49页 |
| 4.2.1 实验细胞株 | 第48页 |
| 4.2.2 材料及试剂 | 第48-49页 |
| 4.2.3 实验仪器 | 第49页 |
| 4.3 实验方法 | 第49-51页 |
| 4.3.1 实验分组 | 第49-50页 |
| 4.3.2 细胞胞浆胞核蛋白分离提取 | 第50-51页 |
| 4.3.3 细胞免疫荧光检测HO-1的细胞定位情况 | 第51页 |
| 4.3.4 统计学处理分析数据 | 第51页 |
| 4.4 结果与讨论 | 第51-56页 |
| 4.4.1 H_2O_2刺激对RAW264.7细胞中HO-1蛋白在胞浆胞核分布的影响 | 第51-52页 |
| 4.4.2 免疫荧光验证E64d对HO-1蛋白入核的抑制作用 | 第52-53页 |
| 4.4.3 E64d抑制HO-1蛋白入核对HO-1蛋白活性的影响 | 第53-54页 |
| 4.4.4 E64d抑制HO-1蛋白入核对H_2O_2诱导的细胞损伤的影响 | 第54-55页 |
| 4.4.5 E64d抑制HO-1蛋白入核对H_2O_2诱导的细胞氧化应激的影响 | 第55-56页 |
| 4.5 本章小结 | 第56-57页 |
| 主要结论与展望 | 第57-58页 |
| 致谢 | 第58-59页 |
| 参考文献 | 第59-63页 |
| 附录：作者在攻读硕士学位期间发表的论文 | 第63页 |
