| 摘要 | 第6-8页 |
| ABSTRACT | 第8-9页 |
| 第一章 文献综述 | 第14-28页 |
| 1.1 研究背景 | 第14-15页 |
| 1.2 脂肪组织和脂肪细胞 | 第15-18页 |
| 1.2.1 脂肪的分类 | 第15-16页 |
| 1.2.2 脂肪的发育 | 第16-17页 |
| 1.2.3 脂肪细胞的研究模型 | 第17-18页 |
| 1.3 前脂肪细胞分化相关基因的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 过氧化物酶体增殖激活受体 gammar（PPARγ） | 第18-19页 |
| 1.3.2 CCAAT 增强子结合蛋白家族基因（C/EBPs） | 第19-20页 |
| 1.3.3 固醇调节元件结合蛋白 1（SREBP1） | 第20页 |
| 1.3.4 其他调控脂肪细胞分化的转录因子 | 第20-21页 |
| 1.4 FABP4 及其他脂肪细胞脂质代谢相关基因的研究进展 | 第21-24页 |
| 1.4.1 脂肪酸转运蛋白 4（FABP4） | 第21-23页 |
| 1.4.2 脂联素（Adiponectin） | 第23页 |
| 1.4.3 瘦素（Leptin）及瘦素受体（Leptin receptor） | 第23页 |
| 1.4.4 脂肪酸合成酶（FAS） | 第23-24页 |
| 1.4.5 脂肪酸转运蛋白-1（FATP1） | 第24页 |
| 1.4.6 其他脂质代谢相关基因 | 第24页 |
| 1.5 基因功能的研究方法 | 第24-26页 |
| 1.5.1 腺病毒 AdEasy 表达系统 | 第25页 |
| 1.5.2 腺病毒 BLOCK-iTTM干扰载体系统 | 第25-26页 |
| 1.6 本研究的目标、意义和内容 | 第26-28页 |
| 1.6.1 研究目标和意义 | 第26-27页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第27-28页 |
| 第二章 牛 FABP4 基因重组腺病毒过表达载体的构建与鉴定 | 第28-38页 |
| 2.1 实验材料 | 第28页 |
| 2.2 实验方法 | 第28-32页 |
| 2.2.1 牛 FABP4 基因的克隆 | 第28-30页 |
| 2.2.2 牛 FABP4 基因腺病毒过表达载体的构建 | 第30-32页 |
| 2.2.3 腺病毒的包装、扩增和病毒滴度测定 | 第32页 |
| 2.3 结果 | 第32-37页 |
| 2.3.1 牛 FABP4 基因的克隆与鉴定 | 第32-34页 |
| 2.3.2 pAdTrack-CMV-FABP4 质粒的鉴定 | 第34页 |
| 2.3.3 pAdEasy-FABP4 重组质粒的鉴定 | 第34-35页 |
| 2.3.4 重组腺病毒 AD-FABP4 的包装、扩增及病毒滴度测定 | 第35-37页 |
| 2.4 讨论 | 第37页 |
| 2.5 小结 | 第37-38页 |
| 第三章 牛 FABP4 基因重组腺病毒干扰载体的构建与鉴定 | 第38-51页 |
| 3.1 实验材料 | 第38页 |
| 3.2 实验方法 | 第38-45页 |
| 3.2.1 shRNA 的设计与合成 | 第38-39页 |
| 3.2.2 pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 的构建及鉴定 | 第39-41页 |
| 3.2.3 pDsRed1-C1-FABP4 表达载体的构建 | 第41-43页 |
| 3.2.4 有效 shRNA 序列的筛选 | 第43-44页 |
| 3.2.5 pAd/PL-DEST/CMV-GFP/U6-shRNA 的构建与鉴定 | 第44-45页 |
| 3.2.6 腺病毒的包装、扩增和病毒滴度测定 | 第45页 |
| 3.3 结果 | 第45-49页 |
| 3.3.1 pENTR/CMV-GFP/U6-shRNA 的构建 | 第45页 |
| 3.3.2 pDsRed1-C1-FABP4 载体的构建 | 第45-46页 |
| 3.3.3 有效 shRNA 的筛选 | 第46-47页 |
| 3.3.4 pAd-shRNA 的构建及鉴定 | 第47-48页 |
| 3.3.5 腺病毒的包装、扩增和病毒滴度测定 | 第48-49页 |
| 3.4 讨论 | 第49页 |
| 3.5 小结 | 第49-51页 |
| 第四章 过量表达及干扰 FABP4 基因对牛前脂肪细胞的影响 | 第51-59页 |
| 4.1 实验材料 | 第51页 |
| 4.2 实验方法 | 第51-53页 |
| 4.2.1 牛前脂肪细胞的分离培养 | 第51页 |
| 4.2.2 重组腺病毒最佳感染复数的测定 | 第51页 |
| 4.2.3 Real-time PCR 引物的设计与合成 | 第51-52页 |
| 4.2.4 过表达及干扰 FABP4 基因对牛前脂肪细胞分化和脂质代谢相关基因的影响 | 第52-53页 |
| 4.3 结果 | 第53-56页 |
| 4.3.1 牛前脂肪细胞的分离培养 | 第53页 |
| 4.3.2 腺病毒感染复数的确定 | 第53-54页 |
| 4.3.3 Real-time PCR 引物检测 | 第54-55页 |
| 4.3.4 过表达 FABP4 基因对牛前脂肪细胞分化和脂质代谢相关基因的影响 | 第55页 |
| 4.3.5 干扰 FABP4 基因对牛前脂肪细胞分化和脂质代谢相关基因的影响 | 第55-56页 |
| 4.4 讨论 | 第56-58页 |
| 4.5 小结 | 第58-59页 |
| 第五章 和牛与安格斯牛前脂肪细胞增殖分化的比较 | 第59-73页 |
| 5.1 实验材料 | 第59-60页 |
| 5.2 实验方法 | 第60-64页 |
| 5.2.1 组织学分析 | 第60页 |
| 5.2.2 两个牛品种组织水平上相关基因的比较 | 第60-61页 |
| 5.2.3 牛前脂肪细胞的分离培养 | 第61页 |
| 5.2.4 两个牛品种前脂肪细胞的分化能力比较 | 第61-62页 |
| 5.2.5 两个牛品种前脂肪细胞的增殖能力比较 | 第62-64页 |
| 5.3 结果 | 第64-70页 |
| 5.3.1 组织学分析比较 | 第64-65页 |
| 5.3.2 两个牛品种脂肪组织基因表达及前脂肪细胞的分化能力比较 | 第65-67页 |
| 5.3.3 两个牛品种前脂肪细胞的增殖能力比较 | 第67-70页 |
| 5.4 讨论 | 第70-72页 |
| 5.5 小结 | 第72-73页 |
| 第六章 结论 | 第73-74页 |
| 6.1 实验结论 | 第73页 |
| 6.2 创新点 | 第73-74页 |
| 参考文献 | 第74-84页 |
| 附录 | 第84-94页 |
| 附录一 | 第84-85页 |
| 附录二 | 第85页 |
| 附录三 | 第85-86页 |
| 附录四 | 第86页 |
| 附录五 | 第86-87页 |
| 附录六 | 第87页 |
| 附录七 | 第87-88页 |
| 附录八 | 第88页 |
| 附录九 | 第88-89页 |
| 附录十 | 第89-90页 |
| 附录十一 | 第90页 |
| 附录十二 | 第90-91页 |
| 附录十三 | 第91页 |
| 附录十四 | 第91-92页 |
| 附录十五 | 第92页 |
| 附录十六 | 第92-93页 |
| 附录十七 | 第93-94页 |
| 致谢 | 第94-96页 |
| 作者简介 | 第96-98页 |
