摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
文献综述 | 第11-28页 |
第一章 干细胞多能性维持机理的研究进展 | 第11-23页 |
1.1 诱导多能干细胞的研究 | 第11-12页 |
1.2 猪 IPS 细胞多能性维持的研究 | 第12-14页 |
1.3 小鼠和人 IPS 细胞多能性维持机理 | 第14-15页 |
1.4 多能性细胞依赖的外源因子和信号通路 | 第15-17页 |
1.4.1 LIF signalling (JAK/STAT pathway) | 第16-17页 |
1.4.2 TGF-β信号通路 | 第17页 |
1.4.3 Wnt 信号通路 | 第17页 |
1.4.4 通过 PI3K/Akt 介导的信号通路 | 第17页 |
1.5 不同物种多能性状态维持的比较 | 第17-20页 |
1.6 IPS 细胞与 ES 细胞的差异 | 第20-23页 |
1.6.1 基因表达谱水平差异 | 第20-21页 |
1.6.2 表观遗传水平差异 | 第21页 |
1.6.3 功能水平差异 | 第21-23页 |
第二章 胚胎发育中多能性建立及维持机理 | 第23-28页 |
2.1 早期胚胎谱系分化过程的转录调控网络 | 第23-24页 |
2.2 生殖细胞和体细胞染色体差异 | 第24-25页 |
2.3 不同物种早期胚胎发育过程综述 | 第25-28页 |
试验研究 | 第28-76页 |
前言 | 第28-29页 |
第三章 利用基因芯片研究猪诱导多能干细胞转录组 | 第29-55页 |
3.1 材料和方法 | 第30-36页 |
3.1.1 试验材料 | 第30-32页 |
3.1.2 试验方法 | 第32-36页 |
3.2 结果 | 第36-53页 |
3.2.1 使用基因芯片研究 piPSCs 的基因表达谱 | 第36-38页 |
3.2.2 不同实验室来源细胞系总体比较 | 第38-42页 |
3.2.3 piPSCs 的多能性标记筛选 | 第42-45页 |
3.2.4 iPS 细胞各个信号通路的比较分析 | 第45-48页 |
3.2.5 iPS 细胞多能性基因表达的比较分析 | 第48-51页 |
3.2.6 印迹基因在 piPSCs 异常沉默 | 第51-53页 |
3.3 讨论 | 第53-54页 |
3.4 小结 | 第54-55页 |
第四章 利用 RNA-SEQ 研究猪多能性维持机理 | 第55-76页 |
4.1 材料和方法 | 第55-57页 |
4.1.1 试验材料与耗材 | 第55-56页 |
4.1.2 试剂配制 | 第56-57页 |
4.2 实验方法 | 第57-58页 |
4.2.1 猪卵巢的采集及运输 | 第57页 |
4.2.2 卵母细胞-颗粒细胞复合体(COCs)的采集与体外成熟培养 | 第57页 |
4.2.3 卵母细胞核成熟的观察及电激活 | 第57页 |
4.2.4 卵子激活后的体外培养 | 第57页 |
4.2.5 单个胚胎 PCR | 第57-58页 |
4.2.6 RNA-seq 分析 | 第58页 |
4.3 结果 | 第58-74页 |
4.3.1 piPSCs 和体细胞的基因表达图谱 | 第58-64页 |
4.3.2 猪 iPS 上调基因的功能富集 | 第64-67页 |
4.3.3 猪 iPS 细胞转录组可变剪切分析 | 第67-74页 |
4.4 讨论 | 第74-75页 |
4.5 小结 | 第75-76页 |
总结 | 第76-77页 |
论文创新点及下一步研究方向 | 第77-78页 |
参考文献 | 第78-89页 |
缩略词 | 第89-90页 |
附表 | 第90-94页 |
附录 | 第94-95页 |
致谢 | 第95-96页 |
作者简介 | 第96页 |