摘要 | 第6-7页 |
ABSTRACT | 第7-8页 |
第一章 文献综述 | 第11-27页 |
1.1 转基因与基因靶向修饰 | 第11-13页 |
1.2 类转录激活效应因子(TALE) | 第13-22页 |
1.2.1 TALE 的特点 | 第13-17页 |
1.2.2 TALE 重复单元组装策略 | 第17-19页 |
1.2.3 TALE 的应用 | 第19-22页 |
1.3 CRISPR/Cas 系统 | 第22-25页 |
1.3.1 CRISPR/Cas 系统的特点 | 第22-23页 |
1.3.2 CRISPR/Cas9 系统应用 | 第23-25页 |
1.4 Oct4 基因与 iPS | 第25-26页 |
1.5 本研究目的及意义 | 第26-27页 |
第二章 人工 TALE 转录激活因子的快速构建及激活 MEF 内源 Oct4 基因 | 第27-47页 |
2.1 TALE 四聚体库的构建 | 第27-32页 |
2.1.1 实验菌株及质粒 | 第27页 |
2.1.2 实验方法 | 第27-31页 |
2.1.3 实验结果 | 第31-32页 |
2.2 靶向小鼠 Oct4 基因的人工 TALE 转录激活因子快速构建 | 第32-41页 |
2.2.1 实验菌株和质粒 | 第33页 |
2.2.2 实验方法 | 第33-38页 |
2.2.3 实验结果 | 第38-41页 |
2.3 人工 TALE 转录激活因子靶向激活 MEF 内源 Oct4 基因表达 | 第41-45页 |
2.3.1 实验材料 | 第41页 |
2.3.2 实验方法 | 第41-43页 |
2.3.3 实验结果 | 第43-45页 |
2.4 讨论 | 第45-46页 |
2.5 小结 | 第46-47页 |
第三章 dCas9 转录激活因子激活 MEF 内源 Oct4 基因 | 第47-51页 |
3.1 实验材料 | 第47页 |
3.2 实验方法 | 第47页 |
3.2.1 dCas9 转录激活因子转染 MEF | 第47页 |
3.2.2 MEF 内源 Oct4 基因表达检测 | 第47页 |
3.3 实验结果 | 第47-49页 |
3.3.1 dCas9 转录激活因子转染 MEF | 第47-49页 |
3.3.2 MEF 内源 Oct4 基因表达检测 | 第49页 |
3.4 讨论 | 第49-50页 |
3.5 小结 | 第50-51页 |
结论 | 第51-52页 |
参考文献 | 第52-58页 |
附录 | 第58-63页 |
缩略词 | 第63-65页 |
致谢 | 第65-66页 |
作者简介 | 第66页 |