中文摘要 | 第10-12页 |
ABSTRACT | 第12-13页 |
缩写列表 | 第14-15页 |
第一章 前言 | 第15-26页 |
1.1 生物发光 | 第15-17页 |
1.1.1 生物发光简介 | 第15-16页 |
1.1.2 萤火虫萤光素体系生物发光机理 | 第16-17页 |
1.2 生物发光成像进展 | 第17-19页 |
1.2.1 新型发光转基因动物 | 第17-18页 |
1.2.2 生物发光在感染性疾病中的进展 | 第18-19页 |
1.2.3 生物发光技术在免疫系统的进展 | 第19页 |
1.3 萤火虫萤光素酶底物进展 | 第19-22页 |
1.4 萤火虫萤光素生物发光探针的进展 | 第22-26页 |
第二章 大环螺环环烷化萤火虫萤光素酶底物的设计、合成与活性评价 | 第26-37页 |
2.1 萤火虫萤光素底物的设计 | 第26-27页 |
2.2 萤火虫萤光素底物的合成 | 第27-33页 |
2.2.1 实验试剂和仪器 | 第27-28页 |
2.2.2 萤火虫萤光素新型底物的合成 | 第28-33页 |
2.3 萤火虫萤光素新型底物的活性评价 | 第33-36页 |
2.3.1 实验试剂和实验材料 | 第33页 |
2.3.2 实验方法 | 第33-34页 |
2.3.2.1 50 mM Tris-HCl缓冲液的配制 | 第33-34页 |
2.3.2.2 20 μg/mL萤火虫萤光素酶的配置 | 第34页 |
2.3.2.3 底物酶水平浓度依赖性 | 第34页 |
2.3.2.4 底物细胞水平活性浓度依赖性测试 | 第34页 |
2.3.3 结果与讨论 | 第34-36页 |
2.3.3.1 底物酶水平活性测试 | 第34-35页 |
2.3.3.2 底物细胞水平活性测试 | 第35-36页 |
2.4 本章小结 | 第36-37页 |
第三章 次氯酸根生物发光探针的设计、合成和活性研究 | 第37-51页 |
3.1 基于萤火虫萤光素体系的次氯酸根生物发光探针的设计 | 第37-38页 |
3.2 基于萤火虫萤光素体系的次氯酸根生物发光探针的合成 | 第38-41页 |
3.2.1 实验试剂和仪器 | 第38页 |
3.2.2 次氯酸根探针的合成 | 第38-41页 |
3.3 次氯酸根生物探针的活性评价 | 第41-50页 |
3.3.1 实验试剂和仪器 | 第41页 |
3.3.2 实验方法 | 第41-43页 |
3.3.2.1 次氯酸根生物发光探针浓度依赖性实验 | 第41页 |
3.3.2.2 次氯酸根生物发光探针选择性实验 | 第41-42页 |
3.3.2.3 ES-2-Fluc细胞培养 | 第42页 |
3.3.2.4 次氯酸根生物发光探针细胞毒测试 | 第42页 |
3.3.2.5 次氯酸根生物发光探针细胞成像 | 第42-43页 |
3.3.2.6 老鼠体内检测内源性次氯酸根 | 第43页 |
3.3.3 结果与讨论 | 第43-50页 |
3.3.3.1 预实验: | 第43-44页 |
3.3.3.2 次氯酸根生物发光探针不同孵育时间测试结果 | 第44-45页 |
3.3.3.3 次氯酸根生物发光探针浓度依赖性实验 | 第45页 |
3.3.3.4 次氯酸根生物发光探针选择性实验 | 第45-46页 |
3.3.3.5 次氯酸根生物发光探针细胞毒测试结果 | 第46页 |
3.3.3.6 检测外源性次氯酸根 | 第46-49页 |
3.3.3.7 老鼠体内检测内源性次氯酸根 | 第49-50页 |
3.4 本章小结 | 第50-51页 |
第四章 酪氨酸酶生物发光探针的设计、合成和活性研究 | 第51-67页 |
4.1 基于萤火虫萤光素体系的酪氨酸酶生物发光探针的设计 | 第51-54页 |
4.2 酪氨酸酶生物发光探针的合成 | 第54-58页 |
4.3 酪氨酸酶生物发光探针的活性评价 | 第58-66页 |
4.3.1 实验试剂与仪器 | 第58-59页 |
4.3.2 实验方法 | 第59-60页 |
4.3.2.1 浓度依赖性实验 | 第59页 |
4.3.2.2 体外选择性实验 | 第59页 |
4.3.2.3 细胞活性实验 | 第59-60页 |
4.3.2.4 细胞内抑制和上调酪氨酸酶实验: | 第60页 |
4.3.3 结果与讨论 | 第60-66页 |
4.3.3.1 酶活性水平测试 | 第60-63页 |
4.3.3.2 酪氨酸酶探针选择性测试 | 第63页 |
4.3.3.3 酪氨酸酶探针细胞水平活性测试 | 第63-65页 |
4.3.3.4 细胞内抑制和上调酪氨酸酶实验 | 第65-66页 |
4.4 本章小结 | 第66-67页 |
总结与展望 | 第67-70页 |
参考文献 | 第70-77页 |
致谢 | 第77-78页 |
攻读学位期间发表的学术论文目录 | 第78-79页 |
附: 中间体和目标化合物的1HNMR,13CNMR和HRMS图谱 | 第79-110页 |
学位论文评阅及答辩情况表 | 第110页 |