| 摘要 | 第1-8页 |
| ABSTRACT | 第8-14页 |
| 第一章 绪论 | 第14-25页 |
| ·环境激素 | 第14页 |
| ·NP的概况 | 第14-17页 |
| ·NP的性质及其分布 | 第15-16页 |
| ·NP的激素作用及危害 | 第16-17页 |
| ·壬基酚雌激素效应的作用机理 | 第17-18页 |
| ·检测方法 | 第18-19页 |
| ·实时荧光定量PCR技术概述 | 第19-22页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的发展 | 第19-20页 |
| ·实时荧光定量PCR技术的基本原理 | 第20-22页 |
| ·本课题内容构成 | 第22-25页 |
| ·课题的研究目的和意义 | 第22-23页 |
| ·课题的研究内容和技术路线 | 第23-25页 |
| 第二章 受体的提取及受体-NP的复合与纯化 | 第25-41页 |
| ·实验材料 | 第25-29页 |
| ·实验仪器 | 第25页 |
| ·实验药品 | 第25-26页 |
| ·常用试剂的配制 | 第26-28页 |
| ·供试动物及驯养 | 第28页 |
| ·实验装置 | 第28-29页 |
| ·实验方法 | 第29-38页 |
| ·含受体的细胞溶质的提取(所有过程都在冰上进行) | 第29页 |
| ·蛋白质含量的测定 | 第29-30页 |
| ·受体-配体复合 | 第30-31页 |
| ·SDS-PAGE法分析HAP对受体-NP的纯化情况 | 第31-34页 |
| ·受体-配体复合效果SPR鉴定 | 第34-38页 |
| ·实验结果与分析 | 第38-40页 |
| ·SDS-PAGE结果与分析 | 第38页 |
| ·壬基酚受体-壬基酚结合情况 | 第38-40页 |
| ·小结 | 第40-41页 |
| 第三章 受体-NP-结合DNA的制备与定性PCR分析 | 第41-54页 |
| ·实验材料 | 第41-43页 |
| ·实验仪器设备 | 第41页 |
| ·实验器材 | 第41页 |
| ·实验药品 | 第41-42页 |
| ·常用试剂的配制 | 第42-43页 |
| ·结合DNA的制备 | 第43-50页 |
| ·引物的合成 | 第43-44页 |
| ·引物的处理 | 第44-45页 |
| ·PCR体系的优化 | 第45-48页 |
| ·DNA的回收 | 第48-49页 |
| ·定量结合DNA | 第49-50页 |
| ·受体、配体、结合DNA复合物的制备 | 第50页 |
| ·常规PCR反应 | 第50-54页 |
| ·常规PCR半定量检测壬基酚 | 第50-52页 |
| ·对照组结果 | 第52-54页 |
| 第四章 荧光定量PCR检测壬基酚方法的建立 | 第54-64页 |
| ·实验仪器、材料和试剂 | 第54页 |
| ·实验仪器 | 第54页 |
| ·实验材料和试剂 | 第54页 |
| ·SYBR Green I定量标准曲线的建立 | 第54-57页 |
| ·熔解曲线分析 | 第57-59页 |
| ·SYBR Green I荧光定量PCR检测壬基酚 | 第59-62页 |
| ·荧光检测的检测限 | 第62页 |
| ·小结 | 第62-64页 |
| 第五章 荧光定量PCR检测环境样品中壬基酚 | 第64-70页 |
| ·样品的预处理 | 第64-65页 |
| ·水中壬基酚的提取 | 第64页 |
| ·土壤中壬基酚的提取 | 第64页 |
| ·鱼肝脏中壬基酚的提取 | 第64-65页 |
| ·荧光定量PCR检测环境样品中壬基酚 | 第65-69页 |
| ·荧光定量PCR检测水中壬基酚 | 第65-67页 |
| ·荧光定量PCR检测土壤中壬基酚 | 第67-68页 |
| ·荧光定量PCR检测鱼肝脏中壬基酚 | 第68-69页 |
| ·小结 | 第69-70页 |
| 第六章 高效液相色谱法检测壬基酚 | 第70-82页 |
| ·实验仪器、材料和试剂 | 第71-72页 |
| ·实验仪器 | 第71页 |
| ·实验材料和试剂 | 第71页 |
| ·高效液相色谱操作步骤 | 第71-72页 |
| ·HPLC测定壬基酚 | 第72-81页 |
| ·高效液相色谱检测条件 | 第72页 |
| ·标准曲线的绘制 | 第72-77页 |
| ·高效液相色谱检测水中壬基酚 | 第77页 |
| ·高效液相色谱检测土壤中壬基酚 | 第77-80页 |
| ·高效液相色谱检测鱼肝脏中壬基酚 | 第80-81页 |
| ·小结 | 第81-82页 |
| 第七章 结论 | 第82-84页 |
| 参考文献 | 第84-88页 |
| 附录Ⅰ 缩略语 | 第88-89页 |
| 附录Ⅱ PUC19序列 | 第89-91页 |
| 攻读硕士学位期间发表的论文 | 第91-92页 |
| 致谢 | 第92页 |
