| 一.缩略语表 | 第7-8页 |
| 二.中文摘要 | 第8-13页 |
| 三.英文摘要 | 第13-18页 |
| 四.正文 | 第19-82页 |
| (一) 前言 | 第19-21页 |
| (二) 材料与方法 | 第21-30页 |
| 1.实验动物与分组 | 第21页 |
| 2.试剂来源 | 第21-22页 |
| 3.所用仪器 | 第22页 |
| 4.实验方法 | 第22-30页 |
| 4.1 大鼠大脑中动脉线栓(MCAO)模型 | 第22-23页 |
| 4.2 侧脑室内注射 | 第23页 |
| 4.3 冰冻组织切片的制备 | 第23页 |
| 4.4 研究断面及脑片挑选 | 第23页 |
| 4.5 焦油紫(CV)染色与脑梗塞体积的检测 | 第23-24页 |
| 4.6 免疫组织化学单标记 | 第24页 |
| 4.6.1 UBB~(+1),Aβ,oligomer及活化caspase-3免疫组织化学染色 | 第24页 |
| 4.7 免疫组织化学双标记 | 第24-25页 |
| 4.7.1 活化caspase-3与UBB~(+1)免疫组织化学双标记 | 第24-25页 |
| 4.8 免疫荧光双标记 | 第25页 |
| 4.8.1 UBB~(+1)与GFAP或NeuN免疫荧光双标记 | 第25页 |
| 4.8.2 UBB~(+1)与活化caspase-3免疫荧光双标记 | 第25页 |
| 4.8.3 Oligomer与GFAP或NeuN免疫荧光双标记 | 第25页 |
| 4.8.4 UBB~(+1)与oligomer免疫荧光双标记 | 第25页 |
| 4.9 免疫荧光三标记 | 第25-27页 |
| 4.9.1 UBB~(+1)、BACE1及GFAP/NeuN免疫荧光三标记 | 第25-26页 |
| 4.9.2 UBB~(+1)、Aβ及活化caspase-3免疫荧光三标记 | 第26页 |
| 4.9.3 UBB~(+1)、BACE1及活化caspase-3免疫荧光三标记 | 第26页 |
| 4.9.4 UBB~(+1)、Aβ及oligomer免疫荧光三标记 | 第26-27页 |
| 4.9.5 UBB~(+1)、oligomer及活化caspase-3免疫荧光三标记 | 第27页 |
| 4.10 免疫印迹(Western blot) | 第27-28页 |
| 4.10.1 蛋白提取 | 第27页 |
| 4.10.2 Western blot | 第27-28页 |
| 4.11 免疫沉淀(Immunoprecipitation) | 第28页 |
| 4.11.1 蛋白提取 | 第28页 |
| 4.11.2 BACE1免疫沉淀 | 第28页 |
| 4.11.3 UBB~(+1)免疫沉淀 | 第28页 |
| 4.12 细胞计数及相关的统计学分析 | 第28-30页 |
| 4.12.1 免疫组化单标细胞计数 | 第28页 |
| 4.12.2 免疫组化双标细胞计数 | 第28页 |
| 4.12.3 免疫荧光三标细胞计数 | 第28-29页 |
| 4.12.4 数据统计学分析 | 第29-30页 |
| (三) 实验结果 | 第30-40页 |
| 1. 不同年龄大鼠缺血性脑梗塞灶的变化 | 第30页 |
| 2. 缺血损伤对不同年龄大鼠脑内突变泛素UBB~(+1),Aβ,APP,BACE1活性,活化caspase-3及oligomer的影响 | 第30-32页 |
| 2.1 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)的表达变化 | 第30页 |
| 2.2 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内Aβ的表达变化 | 第30-31页 |
| 2.3 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内Aβ前体蛋白APP蛋白的表达变化 | 第31页 |
| 2.4 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内Aβ生成限速酶BACE1活性蛋白C99的表达变化 | 第31页 |
| 2.5 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内活化caspase-3的表达变化 | 第31页 |
| 2.6 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内oligomer的表达变化 | 第31-32页 |
| 2.6.1 年轻大鼠缺血损伤纹状体内oligomer的表达变化 | 第32页 |
| 2.6.2 老年大鼠缺血损伤纹状体内oligomer的表达变化 | 第32页 |
| 3. 缺血损伤脑内纹状体部位UBB¨的细胞定位及与BACE1,Aβ,oligomer的分布关系 | 第32-35页 |
| 3.1 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)的细胞定位 | 第32-33页 |
| 3.1.1 年轻大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)的细胞定位 | 第32页 |
| 3.1.2 老年大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)的细胞定位 | 第32-33页 |
| 3.2 大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)与BACE1的细胞共定位 | 第33页 |
| 3.3 大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)与Ap的细胞共定位 | 第33页 |
| 3.4 不同年龄大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)与oligomer的细胞共定位 | 第33页 |
| 3.4.1 年轻大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)与oligomer的细胞共定位 | 第33页 |
| 3.4.2 老年大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)与oligomer的细胞共定位 | 第33页 |
| 3.5 缺血损伤对不同年龄大鼠脑内UBB~(+1)、Aβ及oligomer共标细胞的影响 | 第33-34页 |
| 3.5.1 年轻大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)、Aβ及oligomer的细胞共定位 | 第33-34页 |
| 3.5.2 老年大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)、Aβ及oligomer的细胞共定位 | 第34页 |
| 3.5.3 老年大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)-oligomer-Aβ三标细胞的表达变化 | 第34页 |
| 3.6 大鼠缺血损伤纹状体内oligomer的细胞定位 | 第34-35页 |
| 4. 缺血损伤脑内纹状体部位UBB~(+1)与BACE1, Aβ,oligomer分布关系的机制分析 | 第35-40页 |
| 4.1 缺血损伤对大鼠脑内UBB~(+1)、BACE1蛋白及其复合物的影响 | 第35-36页 |
| 4.1.1 缺血损伤对大鼠脑内UBB~(+1)蛋白的影响 | 第35页 |
| 4.1.2 缺血损伤对大鼠脑内BACE1蛋白的影响 | 第35页 |
| 4.1.3 缺血损伤对大鼠脑内UBB~(+1)与BACE1蛋白形成复合物的影响 | 第35-36页 |
| 4.2 缺血损伤脑内活化caspase-3与UBB~(+1)的关系研究 | 第36-37页 |
| 4.2.1 大鼠缺血损伤纹状体内UBB~(+1)的时程表达变化 | 第36页 |
| 4.2.2 大鼠缺血损伤纹状体内活化caspase-3的时程表达变化 | 第36页 |
| 4.2.3 大鼠缺血损伤纹状体内活化caspase-3与UBB~(+1)的细胞共定位 | 第36-37页 |
| 4.3 大鼠缺血损伤纹状体内活化caspase-3与UBB~(+1)及BACE1的细胞共定位 | 第37页 |
| 4.4 大鼠缺血损伤纹状体内活化caspase-3与UBB~(+1)及Aβ的细胞共定位 | 第37页 |
| 4.5 大鼠缺血损伤纹状体内活化caspase-3与UBB~(+1)及oligomer的细胞共定位 | 第37页 |
| 4.6 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内UBB~(+1)及BACE1双标细胞的影响 | 第37-38页 |
| 4.7 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内UBB~(+1)及Aβ双标细胞的影响 | 第38页 |
| 4.8 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内oligomer形成的影响 | 第38页 |
| 4.9 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内UBB~(+1)及oligomer双标细胞的影响 | 第38页 |
| 4.10 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内UBB~(+1)-oligomer-Aβ三标细胞的影响 | 第38-39页 |
| 4.11 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内UBB~(+1)蛋白的影响 | 第39页 |
| 4.12 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内BACE1蛋白的影响 | 第39页 |
| 4.13 抑制caspase-3活性对大鼠缺血损伤脑内UBB~(+1)-BACE1蛋白复合物的影响 | 第39-40页 |
| (四) 讨论 | 第40-49页 |
| 1.突变泛素UBB~(+1)的细胞定位 | 第40-41页 |
| 2.UBB~(+1)与BACE1,Aβ,oligomer的细胞分布关系 | 第41-42页 |
| 3.老化对缺血损伤脑内UBB~(+1)、Aβ及oligomer形成的影响 | 第42-44页 |
| 4.Caspase-3激活对缺血损伤脑内Aβ及oligomer形成的影响 | 第44页 |
| 5.Caspase-3激活对缺血损伤脑内UBB~(+1)、BACE1及UBB~(+1)-BACE1复合物形成的影响 | 第44-46页 |
| 6.缺血损伤脑内caspase-3激活与UBB~(+1)增加形成恶性循环 | 第46-49页 |
| (五) 结论 | 第49-50页 |
| (六) 图版说明 | 第50-73页 |
| (七) 参考文献 | 第73-82页 |
| 五.综述 | 第82-103页 |
| 六.附录 | 第103-105页 |
| 致谢 | 第103-104页 |
| 研究生期间发表及完成的论文 | 第104-105页 |
