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中国水仙ZDS反义基因的遗传转化

缩略词表第5-8页
摘要第8-10页
Abstract第10-11页
第一章 前言第12-20页
    1 中国水仙研究进展第12-20页
        1.1 中国水仙概况第12页
        1.2 中国水仙组织培养研究进展第12-14页
        1.3 中国水仙基因工程的研究第14-18页
        1.4 本研究的内容和意义第18-20页
第二章 中国水仙高效再生体系的建立第20-30页
    1 材料与方法第20-22页
        1.1 材料第20页
        1.2 方法第20-22页
    2 培养条件第22-23页
    3 结果与分析第23-28页
        3.1 不同消毒时间对无菌体系建立的影响第23页
        3.2 不同温度预处理对无菌体系建立的影响第23-24页
        3.3 小鳞茎的诱导第24-25页
        3.4 6-BA、NAA和糖对小鳞茎诱导的影响第25-27页
        3.5 不同基本培养基对小鳞茎生根的影响第27-28页
        3.6 NAA对小鳞茎生根的影响第28页
    4 讨论第28-30页
        4.1 热水处理对外植体消毒和小鳞茎诱导的影响第28-29页
        4.2 中国水仙小鳞茎诱导影响因素第29页
        4.3 中国水仙壮苗生根影响因素第29-30页
第三章 中国水仙ZDS基因反义载体的构建第30-40页
    1 材料与方法第30-34页
        1.1 材料第30-31页
            1.1.1 植物材料第30页
            1.1.2 菌株和质粒第30页
            1.1.3 酶与化学试剂第30-31页
        1.2 方法第31-34页
    2 结果与分析第34-39页
        2.1 中国水仙花瓣与副冠总RNA的检测第34-35页
        2.2 ZDS基因反向片段的PCR扩增第35页
        2.3 与T载体连接的重组质粒的菌液PCR检测与序列分析第35-37页
        2.4 重组质粒和pCAMBIA1301双GUS载体的双酶切第37-38页
        2.5 重组质粒P1301-ZDS菌液PCR检测与双酶切验证第38页
        2.6 重组质粒P1301-ZDS转化农杆菌的检测第38-39页
    3 讨论第39-40页
第四章 根癌农杆菌介导ZDS反义基因转化中国水仙第40-50页
    1 材料与方法第40-42页
        1.1 材料第40页
        1.2 方法第40-42页
        1.3 GUS组织化学法检测第42页
    2 结果与分析第42-48页
        2.1 不同受体小鳞茎预培养对GUS瞬时表达的影响第42-43页
        2.2 不同根癌农杆菌重悬液浓度对GUS瞬时表达的影响第43-44页
        2.3 不同农杆菌侵染时间对GUS瞬时表达的影响第44页
        2.4 农杆茵稀释液对GUS瞬时表达的影响第44-45页
        2.5 农杆菌重悬液中白糖的不同浓度对GUS瞬时表达的影响第45-46页
        2.6 不同共培养时间对GUS瞬时表达的影响第46页
        2.7 不同共培养温度对GUS瞬时表达的影响第46-47页
        2.8 共培养培养基PH值对GUS瞬时表达的影响第47页
        2.9 诱导剂AS对GUS瞬时表达的影响第47-48页
    3 讨论第48-50页
第五章 抗性小鳞茎的筛选和植物再生及检测第50-56页
    1 材料与方法第50-52页
        1.1 材料第50页
        1.2 方法第50-52页
    2 培养条件第52页
    3 结果分析第52-55页
        3.1 不同筛选方法对抗性小鳞茎筛选效果的影响第52-53页
        3.2 抗性小鳞茎的继代增殖第53-54页
        3.3 抗性小鳞茎的生根与移栽第54页
        3.4 转基因植株叶片组织化学法检测第54-55页
        3.5 转基因植株叶片PCR检测第55页
    4 讨论第55-56页
        4.1 阳性率与筛选方法的关系第55页
        4.2 基因沉默现象第55-56页
第六章 小结第56-59页
    1 中国水仙稳定高效的再生体系的建立第56页
    2 中国水仙ZDS反义基因载体的构建第56-57页
    3 根癌农杆菌介导中国水仙小鳞茎转化体系的确立第57页
    4 抗性小鳞茎的筛选及再生植株的检测第57-59页
参考文献第59-63页
附录Ⅰ第63-64页
附录Ⅱ第64-73页
致谢第73页

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