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稻瘟病菌Rho3与蛋白激酶CK2互作关系及其若干假定互作蛋白的功能分析

摘要第9-10页
Abstract第10页
1 引言第11-18页
    1.1 CK2的结构特点第11-12页
    1.2 CK2的生物学功能第12-14页
    1.3 小G蛋白第14-16页
    1.4 稻瘟病和稻瘟病菌第16-17页
    1.5 稻瘟病菌蛋白激酶CK2与小G蛋白互作研究意义第17-18页
2 材料与方法第18-26页
    2.1 实验材料第18页
        2.1.1 实验菌株及植物材料第18页
        2.1.2 实验培养基第18页
        2.1.3 生化试剂第18页
    2.2 实验方法第18-26页
        2.2.1 生物信息学分析第18-19页
            2.2.1.1 稻瘟病菌MoCK2蛋白的序列获得及系统进化分析第18-19页
            2.2.1.2 稻瘟病菌MoCK2假定互作蛋白的预测第19页
            2.2.1.3 稻瘟病菌MoRho3相关蛋白的功能预测分析第19页
        2.2.2 稻瘟病菌cDNA的制备第19页
            2.2.2.1 稻瘟病菌RNA的提取第19页
            2.2.2.2 逆转录RT-PCR第19页
            2.2.2.3 荧光定量PCR第19页
        2.2.3 AD载体的构建第19-22页
            2.2.3.1 PCR扩增目的片段第20-21页
            2.2.3.2 PCR产物的回收第21页
            2.2.3.3 TA克隆第21页
            2.2.3.4 大肠杆菌感受态的制备和转化第21-22页
            2.2.3.5 质粒的提取第22页
            2.2.3.6 质粒的酶切和连接第22页
        2.2.4 稻瘟病菌基因组DNA的提取第22页
        2.2.5 稻瘟病菌基因的敲除和互补第22-24页
            2.2.5.1 稻瘟病菌基因敲除原理第22-23页
            2.2.5.2 稻瘟病菌基因功能互补原理第23-24页
            2.2.5.3 稻瘟病菌原生质体的制备第24页
            2.2.5.4 稻瘟病菌原生质体转化第24页
            2.2.5.5 转化子的鉴定第24页
        2.2.6 稻瘟病菌的表型分析第24-26页
            2.2.6.1 稻瘟病菌的生长速度测定第24-25页
            2.2.6.2 产孢量测定第25页
            2.2.6.3 萌发实验第25页
            2.2.6.4 致病性鉴定第25-26页
3 结果与分析第26-44页
    3.1 稻瘟病菌MoCK2蛋白序列的获得及系统进化分析第26-27页
    3.2 稻瘟病菌MoCK2的基因敲除与互补第27-29页
    3.3 稻瘟病菌MOCK2的功能分析第29-35页
        3.3.1 MoCK2调节亚基突变体菌落形态和生长速率第29页
        3.3.2 MoCK2调节亚基突变体的分生孢子梗第29-30页
        3.3.3 MoCK2调节亚基突变体的致病性分析第30页
        3.3.4 稻瘟病菌中MoCK2假定互作蛋白的预测分析第30-33页
        3.3.5 稻瘟病菌中MoCK2与小G蛋白的互作关系第33-35页
    3.4 稻瘟病菌中MoRho3相关蛋白的功能分析第35-44页
        3.4.1 稻瘟病菌中MoRho3的功能简析第35页
        3.4.2 稻瘟病菌中MoRho3假定互作蛋白的预测第35-36页
        3.4.3 稻瘟病菌中MGG_11744的功能简析第36-38页
        3.4.4 稻瘟病菌中MGG_01279的功能简析第38-41页
        3.4.5 稻瘟病菌中MGG_11243的功能简析第41-44页
4 讨论第44-46页
5 展望第46-47页
参考文献第47-53页
附录第53-60页
致谢第60页

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