摘要 | 第8-9页 |
Abstract | 第9页 |
第一章 引言 | 第10-20页 |
1 RGSV研究概述 | 第10-16页 |
1.1 RGSV的发现及病害 | 第10-16页 |
1.1.1 RGSV抗性品种的筛选及防治 | 第11页 |
1.1.2 RGSV的血清学 | 第11-12页 |
1.1.3 RGSV的理化特性及基因组结构 | 第12-16页 |
2 水稻氮素代谢研究进展 | 第16-19页 |
2.1 氮素的营养特征 | 第16-17页 |
2.2 水稻对氮的吸收和利用 | 第17页 |
2.3 水稻吸收转运氮素的分子机制 | 第17-19页 |
3 RGSV对水稻氮代谢影响的研究意义 | 第19-20页 |
第二章 受RGSV侵染的水稻含氮量测定 | 第20-30页 |
1 材料与方法 | 第20-27页 |
1.1 材料 | 第20-22页 |
1.1.1 供试材料 | 第20-21页 |
1.1.2 主要仪器和试剂 | 第21-22页 |
1.2 实验方法 | 第22-27页 |
1.2.1 RGSV的鉴定 | 第22-25页 |
1.2.1.1 水稻RNA的提取 | 第22-24页 |
1.2.1.2 逆转录RT-PCR | 第24-25页 |
1.2.1.3 PCR鉴定 | 第25页 |
1.2.2 供试RGSV实验植株的获得 | 第25-26页 |
1.2.3 植株含氮量的测定 | 第26-27页 |
2 结果与分析 | 第27-28页 |
2.1 毒源RGSV的鉴定 | 第27页 |
2.2 植株全氮的测定 | 第27-28页 |
3 讨论与小结 | 第28-30页 |
第三章 氮转运子的表达量检测 | 第30-38页 |
1 材料与方法 | 第30-34页 |
1.1 实验毒源、实验虫源、实验植株、试剂等材料 | 第30-31页 |
1.1.1 实验毒源、实验植株和实验虫源 | 第30页 |
1.1.2 实验试剂 | 第30页 |
1.1.3 植物材料 | 第30页 |
1.1.4 实验仪器 | 第30-31页 |
1.2 实验方法 | 第31-34页 |
1.2.1 RGSV带毒苗的鉴定 | 第31页 |
1.2.2 Real-time PCR引物设计 | 第31-32页 |
1.2.3 提取植物总RNA | 第32页 |
1.2.4 获得的总RNA的纯化 | 第32页 |
1.2.5 cDNA的合成 | 第32-33页 |
1.2.6 Real-time PCR | 第33-34页 |
1.2.7 Real-time PCR产物的凝胶电泳检测 | 第34页 |
2 结果与分析 | 第34-35页 |
2.1 带毒和不带毒供试植株 | 第34页 |
2.2 转运子表达量检测 | 第34-35页 |
3 讨论与小结 | 第35-38页 |
第四章 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第38-54页 |
1 材料与方法 | 第38-48页 |
1.1 材料 | 第38-44页 |
1.1.1 水稻品种、菌株、质粒和目的基因 | 第38页 |
1.1.2 培养基 | 第38-44页 |
1.1.3 试剂 | 第44页 |
1.2 实验方法 | 第44-48页 |
1.2.1 转化根癌农杆菌 | 第44-45页 |
1.2.1.1 农杆菌菌株EHA105感受态的制备 | 第44页 |
1.2.1.2 感受态细胞的转化 | 第44-45页 |
1.2.1.3 菌落PCR验证 | 第45页 |
1.2.1.4 转化产物的扩培 | 第45页 |
1.2.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第45-47页 |
1.2.2.1 水稻成熟胚胚性愈伤的诱导 | 第45-46页 |
1.2.2.2 农杆菌介导的水稻遗传转化 | 第46-47页 |
1.2.3 DNA的提取、转基因阳性植株的检测 | 第47-48页 |
1.2.3.1 DNA的提取 | 第47-48页 |
1.2.3.2 转基因植株的阳性检测 | 第48页 |
2 结果与分析 | 第48-52页 |
2.1 基因片段的获得与转化载体的获得 | 第48-49页 |
2.2 转基因植株的获得与鉴定 | 第49-50页 |
2.3 转基因植株的生理分析 | 第50-52页 |
3 讨论与小结 | 第52-54页 |
第五章 结论与展望 | 第54-56页 |
1 确定RGSV引起氮素的吸收同化增强 | 第54页 |
2 农杆菌介导的转化水稻T0代植株生长表型 | 第54页 |
3 下一步实验计划 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-60页 |
附录 | 第60-61页 |
致谢 | 第61页 |