| 摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7页 |
| 1. 前言 | 第10-19页 |
| 1.1 血红素的结构 | 第10-11页 |
| 1.2 血红素的生物合成 | 第11-13页 |
| 1.3 血红素的生理功能 | 第13-15页 |
| 1.4 血红素与疾病 | 第15页 |
| 1.5 铅对血红素生物合成的影响 | 第15-17页 |
| 1.6 模式生物斑马鱼 | 第17页 |
| 1.7 以斑马鱼作为模式生物研究卟啉症以及贫血症的进展 | 第17-18页 |
| 1.8 本研究的目的及意义 | 第18-19页 |
| 2. 材料和方法 | 第19-31页 |
| 2.1 实验材料 | 第19页 |
| 2.2 实验所用的引物 | 第19-20页 |
| 2.3 主要仪器设备 | 第20页 |
| 2.4 主要试剂 | 第20-21页 |
| 2.5 实验方法 | 第21-31页 |
| 2.5.1 实验材料的处理和获得 | 第21页 |
| 2.5.2 提取RNA并反转出cDNA第一条链 | 第21-23页 |
| 2.5.3 PCR反应 | 第23页 |
| 2.5.4 从琼脂糖凝胶中回收目的DNA片段 | 第23-24页 |
| 2.5.5 将目的片段连接到pMD-18T测序载体上 | 第24页 |
| 2.5.6 连接产物转化大肠杆菌DH5a感受态细胞 | 第24-25页 |
| 2.5.7 菌落PCR进行pMD-18T测序载体阳性克隆的筛选 | 第25页 |
| 2.5.8 测序 | 第25页 |
| 2.5.9 碱裂解法提取质粒 | 第25-26页 |
| 2.5.10 酶切反应 | 第26页 |
| 2.5.11 重组质粒的构建及鉴定 | 第26-27页 |
| 2.5.12 RNA探针的制备和原位杂交 | 第27-30页 |
| 2.5.16 高纯度质粒大剂量提取 | 第30-31页 |
| 3. 结果与分析 | 第31-61页 |
| 3.1 铅对斑马鱼胚胎的毒性 | 第31-32页 |
| 3.1.1 铅对斑马鱼胚胎的死亡率 | 第31-32页 |
| 3.2 铅对斑马鱼胰外分泌酶原基因ela2l转录的影响 | 第32-33页 |
| 3.2.1 不同浓度的铅对斑马鱼胰外分泌酶原基因ela2l转录的影响分析 | 第32-33页 |
| 3.2.2 0.2 g/LPb(NO_3)_2对ela2l基因转录的影响及hemin的恢复 | 第33页 |
| 3.3 斑马鱼nfe2l2a基因的克隆和序列分析 | 第33-44页 |
| 3.4 斑马鱼nfe2l2a功能域分析 | 第44-50页 |
| 3.5 nfe212a蛋白进化关系的研究 | 第50-54页 |
| 3.6 斑马鱼nfe2l2a高级结构的预测 | 第54-57页 |
| 3.7 pCS2~+-nfe2l2a和pCS~(2+)-hmox-1超表达载体的构建 | 第57-58页 |
| 3.8 超表达质粒的提取 | 第58-60页 |
| 3.9 nfe2l2a和hmox-1基因在斑马鱼体内的超表达 | 第60-61页 |
| 4. 讨论与展望 | 第61-63页 |
| 4.1 铅处理下调斑马鱼ela2l基因转录 | 第61页 |
| 4.2 nrf-2蛋白的功能域 | 第61-62页 |
| 4.3 nfe2l2a和hmox-1基因在斑马鱼体内的超表达 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-67页 |
| 在校期间发表的论文 | 第67-68页 |
| 致谢 | 第68页 |
