摘要 | 第3-6页 |
ABSTRACT | 第6-8页 |
中英文缩略词表 | 第13-14页 |
前言 | 第14-16页 |
第1章 原发性肝癌组织中MTBP的表达与其生存率相关分析 | 第16-33页 |
引言 | 第16页 |
材料和方法 | 第16-28页 |
结果 | 第28-31页 |
1、在肝癌组织中RT-PCR及Western blot检测MTBP的表达情况 | 第28-29页 |
2、在肝癌组织中免疫组化检测MTBP的表达情况 | 第29-30页 |
3、MTBP和肝癌患者生存率的相关性分析 | 第30页 |
4、MTBP在多种肝癌细胞株中的表达情况 | 第30-31页 |
讨论 | 第31-32页 |
结论 | 第32-33页 |
第2章 MTBP调控E-cadherin表达及对肝癌细胞侵袭和迁移能力的影响 | 第33-66页 |
材料与方法 | 第33-56页 |
1. 材料 | 第33-38页 |
2. 细胞培养 | 第38-40页 |
3. pcDNA3.1-MTBP质粒构建 | 第40-46页 |
4 构建shMTBP质粒 | 第46-50页 |
5.无内毒素质粒大量提取 | 第50-52页 |
6. Transwell侵袭实验 | 第52页 |
7. 划痕实验 | 第52-53页 |
8 肝癌稳转细胞系构建 | 第53页 |
9 动物实验 | 第53-54页 |
10. HE染色 | 第54-56页 |
11. 统计学分析 | 第56页 |
结果 | 第56-64页 |
1 pcDNA3.1-MTBP质粒构建 | 第56页 |
2 MTBP最佳干扰片段的筛选 | 第56-57页 |
3 观察改变肝癌细胞HepG2和Huh-7中MTBP的表达对肝癌细胞侵袭迁移的影响 | 第57-59页 |
4 Transwell侵袭实验检测过表达MTBP表达对肝癌细胞迁移能力的影响 | 第59-60页 |
5 体内实验证实过表达MTBP对肝癌细胞转移能力的影响 | 第60-61页 |
6 在肝癌细胞中改变MTBP表达观察E-cadherin的表达情况 | 第61-62页 |
7 在肝癌组织中检测MTBP与E-cadherin的表达情况 | 第62-63页 |
8 MTBP和E-cadherin基因在肝癌组织中表达的关联性分析 | 第63-64页 |
讨论 | 第64-65页 |
结论 | 第65-66页 |
第3章 MTBP调控E-cadherin表达通过抑制MDM2泛素化的机制研究 | 第66-79页 |
材料和方法 | 第66-73页 |
1. 材料 | 第66-68页 |
2 细胞培养 | 第68-69页 |
3. 免疫共沉淀 | 第69-71页 |
4. Lipofectamine 2000法转染肝癌细胞 | 第71页 |
5. 蛋白免疫印迹反应 | 第71页 |
6 蛋白酶体抑制实验 | 第71-72页 |
7 激光共聚焦免疫荧光实验 | 第72页 |
8. 统计学分析 | 第72-73页 |
结果 | 第73-77页 |
1. 在肝癌细胞中MTBP通过调控MDM2影响E-cadherin的表达 | 第73-74页 |
2. 在肝癌细胞中MDM2蛋白经过泛素蛋白酶体降解 | 第74-76页 |
3. MTBP稳定MDM2通过影响MDM2的泛素化及降解 | 第76-77页 |
讨论 | 第77-78页 |
结论 | 第78-79页 |
全文总结 | 第79-82页 |
致谢 | 第82-83页 |
参考文献 | 第83-86页 |
综述 | 第86-94页 |
参考文献 | 第92-94页 |