| 摘要 | 第4-5页 |
| Abstract | 第5-6页 |
| 引言 | 第10-11页 |
| 1. 绪论 | 第11-26页 |
| 1.1 纤维素乙醇与酿酒酵母 | 第11-17页 |
| 1.1.1 纤维素乙醇的生产现状 | 第11-12页 |
| 1.1.2 纤维素原料预处理 | 第12-16页 |
| 1.1.3 纤维素水解液中抑制物组成 | 第16-17页 |
| 1.2 酿酒酵母环境胁迫耐受性 | 第17-18页 |
| 1.3 抵抗氧化胁迫的酶学及非酶学机制 | 第18-23页 |
| 1.3.1 SOD1基因 | 第19-20页 |
| 1.3.2 GRX5基因 | 第20-21页 |
| 1.3.3 YCR102C基因 | 第21页 |
| 1.3.4 乙酸毒性及酿酒酵母反应机制 | 第21-22页 |
| 1.3.5 目前常见的提高酿酒酵母环境胁迫耐受性的方法 | 第22-23页 |
| 1.4 锌状态与酿酒酵母环境胁迫耐受性 | 第23-24页 |
| 1.5 本研究工作的目的意义和内容 | 第24-26页 |
| 2 SOD1与胁迫耐受性相关研究 | 第26-53页 |
| 2.1 引言 | 第26页 |
| 2.2 实验材料与仪器 | 第26-29页 |
| 2.2.1 菌种及引物 | 第26-27页 |
| 2.2.2 培养基及灭菌 | 第27页 |
| 2.2.3 主要仪器设备及相关试剂 | 第27-29页 |
| 2.3 实验方法 | 第29-43页 |
| 2.3.1 自絮凝酵母SPSC01发酵实验 | 第29-32页 |
| 2.3.2 抗氧化酶活检测 | 第32-35页 |
| 2.3.3 金属离子测定 | 第35页 |
| 2.3.4 RT-qPCR分析实验 | 第35-37页 |
| 2.3.5 构建过表达菌体 | 第37-41页 |
| 2.3.6 酿酒酵母过表达基因SOD1的验证 | 第41-42页 |
| 2.3.7 耐性评价实验 | 第42-43页 |
| 2.3.8 乙酸发酵实验 | 第43页 |
| 2.4 实验结果与讨论 | 第43-52页 |
| 2.4.1 锌添加对连续乙醇发酵的影响 | 第43-44页 |
| 2.4.2 锌添加对SPSC01连续发酵时胞内酶活的影响 | 第44-45页 |
| 2.4.3 锌添加对SPSC01连续发酵时细胞胁迫耐受性的影响 | 第45-46页 |
| 2.4.4 锌添加对乙酸胁迫条件下乙醇发酵的影响 | 第46页 |
| 2.4.5 锌添加对乙酸胁迫下SPSC01谷胱甘肽的影响 | 第46-47页 |
| 2.4.6 锌添加对乙酸胁迫相关基因转录水平的影响 | 第47-48页 |
| 2.4.7 SOD1过表达菌株构建 | 第48-49页 |
| 2.4.8 过表达SOD1对菌株胁迫耐受性的影响 | 第49-50页 |
| 2.4.9 过表达SOD1对菌株乙酸发酵的影响 | 第50-52页 |
| 2.5 本章小结 | 第52-53页 |
| 3 GRX5与胁迫耐受性相关研究 | 第53-73页 |
| 3.1 引言 | 第53页 |
| 3.2 实验材料 | 第53-55页 |
| 3.2.1 菌种及引物 | 第53-54页 |
| 3.2.2 培养基及灭菌条件 | 第54页 |
| 3.2.3 主要仪器及试剂 | 第54-55页 |
| 3.3 实验方法 | 第55-58页 |
| 3.3.1 构建过表达菌株 | 第55页 |
| 3.3.2 胁迫耐受性分析 | 第55-56页 |
| 3.3.3 胁迫条件发酵性能研究 | 第56-57页 |
| 3.3.4 抗氧化酶检测 | 第57页 |
| 3.3.5 胞内金属离子检测 | 第57-58页 |
| 3.4 实验结果与讨论 | 第58-72页 |
| 3.4.1 DNA及转录水平验证过表达菌株 | 第58页 |
| 3.4.2 GRX5-Sc4126遗传稳定性实验 | 第58页 |
| 3.4.3 GRX5过表达对胁迫耐受性的影响 | 第58-61页 |
| 3.4.4 过表达GRX5对乙酸胁迫下发酵性能的影响 | 第61-67页 |
| 3.4.5 过表达GRX5对高温胁迫下发酵性能的影响 | 第67-68页 |
| 3.4.6 过表达GRX5对双重胁迫下发酵性能的影响 | 第68-69页 |
| 3.4.7 过表达GRX5对模拟水解液发酵性能的影响 | 第69-71页 |
| 3.4.8 过表达GRX5对水解液稀释液发酵性能的影响 | 第71-72页 |
| 3.5 本章小结 | 第72-73页 |
| 4 YCR102C与胁迫耐受性相关研究 | 第73-93页 |
| 4.1 引言 | 第73页 |
| 4.2 实验材料 | 第73-75页 |
| 4.2.1 菌种及引物 | 第73-74页 |
| 4.2.2 培养基及灭菌条件 | 第74-75页 |
| 4.2.3 主要仪器及试剂 | 第75页 |
| 4.3 实验方法 | 第75-77页 |
| 4.3.1 构建过表达菌株 | 第75页 |
| 4.3.2 胁迫耐受性分析 | 第75-76页 |
| 4.3.3 胁迫条件发酵性能研究 | 第76-77页 |
| 4.3.4 抗氧化酶检测 | 第77页 |
| 4.3.5 胞内金属含量检测 | 第77页 |
| 4.4 实验结果与讨论 | 第77-91页 |
| 4.4.1 DNA及转录水平验证过表达菌株 | 第77-78页 |
| 4.4.2 YCR102C-Sc4126遗传稳定性实验 | 第78页 |
| 4.4.3 YCR102C过表达对胁迫耐受性的影响 | 第78-80页 |
| 4.4.4 过表达YCR102C对乙酸胁迫下发酵性能的影响 | 第80-86页 |
| 4.4.5 过表达YCR102C对高温胁迫下发酵性能的影响 | 第86-87页 |
| 4.4.6 过表达YCR102C对双重胁迫下发酵性能的影响 | 第87-89页 |
| 4.4.7 过表达YCR102C对模拟水解液发酵性能的影响 | 第89-91页 |
| 4.4.8 过表达YCR102C对水解液稀释液发酵性能的影响 | 第91页 |
| 4.5 本章小结 | 第91-93页 |
| 结论 | 第93-94页 |
| 创新点 | 第94-95页 |
| 展望 | 第95-96页 |
| 参考文献 | 第96-107页 |
| 附录A 基因序列 | 第107-109页 |
| 攻读硕士学位期间发表学术论文情况 | 第109-110页 |
| 致谢 | 第110-112页 |
