| 摘要 | 第9-11页 |
| 英文摘要 | 第11-13页 |
| 1 引言 | 第14-22页 |
| 1.1 戊型肝炎病毒研究进展 | 第14-16页 |
| 1.1.1 戊型肝炎病毒研究概述 | 第14页 |
| 1.1.2 戊型肝炎病毒的形态特征和理化特性 | 第14页 |
| 1.1.3 戊型肝炎病毒的基因组结构 | 第14-15页 |
| 1.1.4 戊型肝炎病毒基因分型 | 第15-16页 |
| 1.1.5 戊型肝炎流行特征及诊断 | 第16页 |
| 1.2 禽戊型肝炎病毒的研究进展 | 第16-18页 |
| 1.2.1 禽戊型肝炎病毒的概述 | 第16-17页 |
| 1.2.2 禽戊型肝炎病毒的传播 | 第17页 |
| 1.2.3 禽戊型肝炎病毒的复制位点及致病性 | 第17页 |
| 1.2.4 禽戊型肝炎病毒衣壳蛋白抗原表位的鉴定 | 第17-18页 |
| 1.2.5 禽戊型肝炎病毒人兽共患性的研究 | 第18页 |
| 1.3 乳酸菌作为口服疫苗传递载体的研究进展 | 第18-21页 |
| 1.3.1 乳酸菌的益生作用 | 第18-19页 |
| 1.3.2 乳酸菌对机体免疫的影响 | 第19页 |
| 1.3.3 乳酸菌表达系统的研究进展 | 第19-21页 |
| 1.4 研究目的与意义 | 第21-22页 |
| 2 材料与方法 | 第22-39页 |
| 2.1 试验材料 | 第22-26页 |
| 2.1.1 质粒、菌种和病毒 | 第22页 |
| 2.1.2 试验动物 | 第22页 |
| 2.1.3 引物合成 | 第22页 |
| 2.1.4 培养基及抗生素的配制 | 第22-23页 |
| 2.1.5 主要试剂 | 第23页 |
| 2.1.6 主要仪器与设备 | 第23页 |
| 2.1.7 间接ELISA相关试剂配制 | 第23-25页 |
| 2.1.8 SDS-PAGE及Western-blot溶液配制 | 第25-26页 |
| 2.1.9 其他溶液的配制 | 第26页 |
| 2.2 实验方法 | 第26-39页 |
| 2.2.1 a HEV ORF2基因在大肠杆菌中的诱导表达 | 第26-30页 |
| 2.2.2 兔抗a HEV ORF2蛋白多克隆抗体制备 | 第30-32页 |
| 2.2.3 a HEV △ORF2蛋白在乳酸乳球菌中的诱导表达 | 第32-34页 |
| 2.2.4 实验动物分组及取材 | 第34-35页 |
| 2.2.5 病毒的增殖及定量 | 第35-36页 |
| 2.2.6 免疫后IgG和IgA抗体效价变化 | 第36页 |
| 2.2.7 免疫后肝脏、脾脏IL-2、IFN-γ mRNA表达变化 | 第36-37页 |
| 2.2.8 攻毒后血清病毒血症检测 | 第37页 |
| 2.2.9 攻毒后的粪便排毒检测 | 第37页 |
| 2.2.10 攻毒后血清中乳酸脱氢酶（LDH）的检测 | 第37-38页 |
| 2.2.11 肝脏、脾脏病理学观察 | 第38-39页 |
| 3 结果 | 第39-57页 |
| 3.1 a HEV ORF2在大肠杆菌中表达 | 第39-40页 |
| 3.1.1 重组质粒pET-30a-ORF2构建与鉴定 | 第39-40页 |
| 3.1.2 重组ORF2在大肠杆菌中诱导表达 | 第40页 |
| 3.2 兔抗a HEV ORF2多克隆抗体的制备 | 第40-41页 |
| 3.2.1 间接ELISA方法检测多克隆抗体效价 | 第40页 |
| 3.2.2 Western-blot检测多克隆抗体反应性 | 第40-41页 |
| 3.3 a HEV△ORF2在乳酸乳球菌中表达 | 第41-44页 |
| 3.3.1 重组质粒的PCR及酶切鉴定 | 第41页 |
| 3.3.2 a HEV △ORF2蛋白Western-blot鉴定 | 第41-44页 |
| 3.4 表达a HEV △ORF2蛋白重组乳酸乳球菌免疫保护作用 | 第44-57页 |
| 3.4.1 免疫后各组鸡抗体效价 | 第44-46页 |
| 3.4.2 免疫后肝脏、脾脏IL-2、IFN-γ mRNA表达量变化 | 第46-48页 |
| 3.4.3 病毒定量用标准曲线的绘制 | 第48-49页 |
| 3.4.4 攻毒后各组鸡病毒血症检测 | 第49页 |
| 3.4.5 攻毒后各组鸡粪便排毒检测 | 第49-51页 |
| 3.4.6 攻毒后各组鸡血清中乳酸脱氢酶（LDH）的检测 | 第51页 |
| 3.4.7 攻毒后各组鸡肝脏、脾脏病理学变化 | 第51-57页 |
| 4 讨论 | 第57-61页 |
| 4.1 a HEV ORF2相关研究 | 第57页 |
| 4.2 a HEV ORF2蛋白在乳酸菌中的表达 | 第57-58页 |
| 4.3 重组乳酸乳球菌抗感染免疫保护作用 | 第58-61页 |
| 4.3.1 免疫后抗体效价的变化 | 第58页 |
| 4.3.2 免疫后肝脏、脾脏IL-2、IFN-γ mRNA表达变化 | 第58-59页 |
| 4.3.3 攻毒后病理损伤变化 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 致谢 | 第62-63页 |
| 参考文献 | 第63-68页 |
| 攻读硕士学位期间发表的学术论文 | 第68页 |
