摘要 | 第4-5页 |
Abstract | 第5页 |
常用缩略语中英文对照表 | 第10-11页 |
第一章 绪论 | 第11-24页 |
1.1 引言 | 第11-12页 |
1.2 卵泡液概述 | 第12-16页 |
1.2.1 卵泡液的产生和组成 | 第12-13页 |
1.2.2 卵泡液成分对卵母细胞发育的影响 | 第13-16页 |
1.3 蛋白质组学概述 | 第16-21页 |
1.3.1 组学时代中蛋白质组学研究的意义 | 第16-18页 |
1.3.2 蛋白质组学的分类 | 第18页 |
1.3.3 差异蛋白质组学研究的主要技术手段 | 第18-20页 |
1.3.4 蛋白质组学相关数据库 | 第20-21页 |
1.4 差异蛋白组学在动物生殖发育领域的研究进展与应用 | 第21-22页 |
1.5 研究的目的意义 | 第22-24页 |
第二章 绵羊卵泡液蛋白质组双向电泳体系的构建与优化 | 第24-48页 |
2.1 材料与方法 | 第25-36页 |
2.1.1 绵羊卵泡液样品的采集 | 第25页 |
2.1.2 实验药品与试剂 | 第25页 |
2.1.3 实验仪器与设备 | 第25-26页 |
2.1.4 实验相关溶液的配制 | 第26-27页 |
2.1.5 绵羊卵泡液样品高丰度白蛋白的去除 | 第27-29页 |
2.1.6 绵羊卵泡液样品蛋白质浓度测定 | 第29-30页 |
2.1.7 丙酮沉淀蛋白 | 第30页 |
2.1.8 预制干胶条的水化 | 第30-31页 |
2.1.9 第一向等电聚焦(Isoelectric focusing,IEF) | 第31-32页 |
2.1.10 凝胶的制备 | 第32-33页 |
2.1.11 固相p H干胶条的平衡 | 第33页 |
2.1.12 第二向SDS-PAGE SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳 | 第33-34页 |
2.1.13 凝胶染色 | 第34-36页 |
2.1.14 凝胶扫描 | 第36页 |
2.2 结果与分析 | 第36-43页 |
2.2.1 两种试剂盒去除绵羊卵泡液高丰度白蛋白效果的比较 | 第36-39页 |
2.2.2 不同浓度凝胶对双向电泳图谱影响的比较 | 第39-40页 |
2.2.3 不同胶条规格及上样量的比较 | 第40-42页 |
2.2.4 不同考马斯亮蓝染色方法的比较 | 第42-43页 |
2.3 讨论 | 第43-47页 |
2.3.1 样品制备中高丰度蛋白去除对双向电泳图谱质量的影响 | 第43-45页 |
2.3.2 不同凝胶浓度对双向电泳图谱质量的影响 | 第45页 |
2.3.3 不同胶条规格对双向电泳图谱质量的影响 | 第45-46页 |
2.3.4 不同上样量对双向电泳图谱质量的影响 | 第46页 |
2.3.5 不同染色方法对双向电泳图谱质量的影响 | 第46-47页 |
2.4 小结 | 第47-48页 |
第三章 绵羊不同直径卵泡的卵泡液差异蛋白质组学分析 | 第48-59页 |
3.1 材料与方法 | 第48-51页 |
3.1.1 绵羊卵泡液样品的采集 | 第48-49页 |
3.1.2 实验药品与试剂 | 第49页 |
3.1.3 实验仪器与设备 | 第49页 |
3.1.4 主要溶液配制 | 第49页 |
3.1.5 绵羊不同直径卵泡卵泡液 2-DE图谱构建 | 第49页 |
3.1.6 凝胶扫描和图像差异分析 | 第49-50页 |
3.1.7 差异蛋白点的切取 | 第50页 |
3.1.8 差异蛋白点的酶解及质谱分析 | 第50-51页 |
3.1.9 数据库查询 | 第51页 |
3.2 结果与分析 | 第51-56页 |
3.2.1 绵羊不同直径卵泡卵泡液 2-DE图谱差异蛋白点分析 | 第51-52页 |
3.2.2 绵羊不同直径卵泡卵泡液 2-DE图谱差异蛋白点鉴定 | 第52-56页 |
3.3 讨论 | 第56-57页 |
3.4 小结 | 第57-59页 |
第四章 激素诱导后羔羊与成年羊发育卵泡的卵泡液差异蛋白质组学分析 | 第59-67页 |
4.1 材料与方法 | 第60-62页 |
4.1.1 供体羊激素处理与卵泡液样品的采集 | 第60页 |
4.1.2 实验药品与试剂 | 第60-61页 |
4.1.3 实验仪器与设备 | 第61页 |
4.1.4 主要溶液配制 | 第61页 |
4.1.5 激素诱导羔羊和成年羊发育卵泡液 2-DE图谱构建 | 第61页 |
4.1.6 凝胶扫描和图像差异分析 | 第61页 |
4.1.7 差异蛋白点的切取 | 第61页 |
4.1.8 差异蛋白点的酶解及质谱分析 | 第61页 |
4.1.9 数据库分析 | 第61-62页 |
4.2 结果与分析 | 第62-65页 |
4.2.1 激素诱导后羔羊与成年羊发育卵泡的卵泡液2-DE图谱差异蛋白点分析 | 第62页 |
4.2.2 激素诱导后羔羊与成年羊发育卵泡的卵泡液2-DE图谱差异蛋白点鉴定 | 第62-65页 |
4.3 讨论 | 第65-66页 |
4.4 小结 | 第66-67页 |
第五章 全文总结及展望 | 第67-69页 |
5.1 全文总结 | 第67页 |
5.2 展望 | 第67-69页 |
参考文献 | 第69-76页 |
致谢 | 第76-77页 |
作者简介 | 第77页 |