| 摘要 | 第6-7页 |
| ABSTRACT | 第7-8页 |
| 缩略词表 | 第9-10页 |
| 前言 | 第10-11页 |
| 第一章 文献综述 | 第11-19页 |
| 1 芳樟醇的药理作用研究 | 第11-16页 |
| 2 芳樟醇的生物合成途径研究 | 第16-19页 |
| 第二章 鞘蕊苏芳樟醇合成酶基因克隆 | 第19-57页 |
| 第一节 鞘蕊苏芳樟醇合成酶基因全长的获得 | 第19-40页 |
| 1 仪器与材料 | 第19页 |
| 1.1 实验仪器 | 第19页 |
| 1.2 植物材料 | 第19页 |
| 1.3 生化试剂 | 第19页 |
| 1.4 菌株及载体 | 第19页 |
| 2 实验方法 | 第19-32页 |
| 2.1 总RNA的提取 | 第19-20页 |
| 2.2 3’-RACE扩增实验 | 第20-25页 |
| 2.3 5’-RACE扩增实验 | 第25-29页 |
| 2.4 胶回收实验 | 第29-30页 |
| 2.5 目的片段的连接与转化 | 第30-31页 |
| 2.6 菌落PCR验证 | 第31-32页 |
| 3 实验结果 | 第32-38页 |
| 3.1 总RNA的提取 | 第32页 |
| 3.2 3’-RACE扩增及菌落PCR验证 | 第32-35页 |
| 3.3 5’-RACE扩增及菌落PCR验证 | 第35-36页 |
| 3.4 鞘蕊苏芳樟醇合成酶基因全长 | 第36-38页 |
| 4 讨论 | 第38-40页 |
| 4.1 鞘蕊苏总RNA的获得 | 第38页 |
| 4.2 基因特异性引物设计 | 第38-39页 |
| 4.3 PCR条件的优化 | 第39页 |
| 4.4 RACE目的条带的选择 | 第39-40页 |
| 第二节 芳樟醇合成酶基因的克隆及原核表达载体的构建 | 第40-51页 |
| 1 仪器与材料 | 第40页 |
| 1.1 实验仪器 | 第40页 |
| 1.2 实验材料 | 第40页 |
| 1.3 生化试剂 | 第40页 |
| 1.4 菌株与载体 | 第40页 |
| 2 实验方法 | 第40-48页 |
| 2.1 总RNA的消化 | 第40-41页 |
| 2.2 cDNA第一链的合成 | 第41-42页 |
| 2.3 鞘蕊苏芳樟醇合成酶基因全长克隆 | 第42-43页 |
| 2.4 目的基因胶回收实验 | 第43页 |
| 2.5 产物的连接与转化 | 第43-45页 |
| 2.6 菌落PCR验证 | 第45页 |
| 2.7 质粒的提取 | 第45-46页 |
| 2.8 原核表达载体的构建 | 第46-48页 |
| 3 实验结果 | 第48-50页 |
| 3.1 全长的克隆及菌落PCR验证 | 第48-49页 |
| 3.2 原核表达载体的构建及菌落PCR验证 | 第49-50页 |
| 4 讨论 | 第50-51页 |
| 第三节 芳樟醇合成酶基因的原核表达 | 第51-57页 |
| 1 仪器与材料 | 第51页 |
| 1.1 实验仪器 | 第51页 |
| 1.2 实验材料 | 第51页 |
| 1.3 生化试剂 | 第51页 |
| 1.4 菌株 | 第51页 |
| 2 实验方法 | 第51-55页 |
| 2.1 重组表达载体与空载体的转化 | 第51-53页 |
| 2.2 目的蛋白的提纯 | 第53-55页 |
| 3 实验结果 | 第55-56页 |
| 3.1 IPTG诱导芳樟醇合成酶基因原核表达 | 第55页 |
| 3.2 目的蛋白的提纯 | 第55-56页 |
| 4 讨论 | 第56-57页 |
| 4.1 蛋白表达的优化 | 第56页 |
| 4.2 蛋白提纯 | 第56-57页 |
| 第三章 鞘蕊苏的花粉形态及其活力测定 | 第57-64页 |
| 1 仪器与材料 | 第57页 |
| 2 实验方法 | 第57-58页 |
| 2.1 花粉形态 | 第57页 |
| 2.2 花粉活力测定 | 第57-58页 |
| 3 实验结果 | 第58-62页 |
| 3.1 花粉形态观测 | 第58-59页 |
| 3.2 花粉活力测定 | 第59-61页 |
| 3.3 毛喉鞘蕊花花粉萌发过程 | 第61-62页 |
| 4 讨论 | 第62-64页 |
| 4.1 花粉形态特征观察 | 第62页 |
| 4.2 花粉活力测定方法选择 | 第62-64页 |
| 结语与创新 | 第64-65页 |
| 参考文献 | 第65-70页 |
| 附录 | 第70-71页 |
| 致谢 | 第71页 |