摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5-7页 |
缩写与全称 | 第8-12页 |
1 引言 | 第12-20页 |
1.1 植物抗旱研究及进展 | 第12-16页 |
1.1.1 我国农业干旱现状 | 第12页 |
1.1.2 植物的抗旱机理研究 | 第12-15页 |
1.1.3 甜菜碱醛脱氢酶(betaine-aldyhyde dehydrogenase, BADH)基因的研究 | 第15-16页 |
1.2 基因转化方法研究 | 第16-18页 |
1.2.1 根癌农杆菌介导法 | 第16页 |
1.2.2 基因枪轰击法 | 第16-17页 |
1.2.3 花粉管通道法 | 第17页 |
1.2.4 花粉介导法 | 第17-18页 |
1.3 玉米基因转化的研究进展 | 第18-19页 |
1.4 本研究的主要内容与意义 | 第19-20页 |
2 材料与试剂 | 第20-22页 |
2.1 材料来源 | 第20页 |
2.2 主要试剂及配制 | 第20-21页 |
2.2.1 主要试剂 | 第20页 |
2.2.2 主要试剂的配制 | 第20-21页 |
2.3 主要仪器 | 第21-22页 |
3 实验方法 | 第22-32页 |
3.1 材料培养 | 第22页 |
3.2 阳性植株的鉴定 | 第22-24页 |
3.2.1 质粒DNA的提取 | 第22-23页 |
3.2.2 玉米基因组DNA的提取 | 第23页 |
3.2.3 PCR扩增 | 第23-24页 |
3.2.4 DNA琼脂糖凝胶电泳检测 | 第24页 |
3.3 RNA的提取 | 第24-25页 |
3.3.1 玉米叶片总RNA的提取 | 第24-25页 |
3.3.2 RNA琼脂糖电泳凝胶检测 | 第25页 |
3.4 半定量RT-PCR反应 | 第25-27页 |
3.4.1 c DNA第一条链的合成 | 第26-27页 |
3.4.2 PCR扩增 | 第27页 |
3.4.3 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第27页 |
3.5 实时荧光定量PCR反应 | 第27-28页 |
3.5.1 制备DNA模板 | 第28页 |
3.5.2 Real-time PCR反应 | 第28页 |
3.6 生理指标的测定 | 第28-30页 |
3.6.1 渗透调节物质含量测定 | 第28-29页 |
3.6.2 与膜完整性相关生理指标测定 | 第29-30页 |
3.6.3 抗氧化酶活性测定 | 第30页 |
3.7 株高及生物量测定 | 第30-31页 |
3.7.1 株高的测定 | 第30页 |
3.7.2 生物量的测定 | 第30-31页 |
3.8 主要农艺性状分析 | 第31页 |
3.9 土壤微生物多样性测定 | 第31页 |
3.9.1 土样采集 | 第31页 |
3.9.2 土壤稀释液制备 | 第31页 |
3.9.3 涂布与培养 | 第31页 |
3.9.4 微生物数量测定 | 第31页 |
3.10 数据统计与分析 | 第31-32页 |
4 结果与分析 | 第32-48页 |
4.1 PCR扩增检测结果 | 第32页 |
4.2 叶片总RNA完整性的检测 | 第32-33页 |
4.3 反转录PCR检测 | 第33-34页 |
4.4 实时荧光定量PCR扩增结果 | 第34-36页 |
4.5 幼苗长势观察 | 第36-37页 |
4.6 生理指标测定 | 第37-42页 |
4.6.1 渗透调节物质含量 | 第37-39页 |
4.6.2 细胞膜透性比较 | 第39-40页 |
4.6.3 抗氧化酶活性 | 第40-42页 |
4.7 株高与生物量 | 第42-44页 |
4.8 主要农艺性状 | 第44页 |
4.9 对微生物多样性的影响 | 第44-48页 |
5 讨论 | 第48-52页 |
5.1 BADH基因的表达 | 第48页 |
5.2 渗透调节物质比较分析 | 第48-49页 |
5.3 质膜受损程度与抗氧化酶活性对比分析 | 第49-50页 |
5.4 株高、生物量及农艺性状比较分析 | 第50-51页 |
5.5 土壤微生物多样性比较分析 | 第51-52页 |
结论 | 第52-54页 |
致谢 | 第54-56页 |
参考文献 | 第56-66页 |
附录 | 第66页 |