| 摘要 | 第3-5页 |
| ABSTRACT | 第5-6页 |
| 缩略词表 | 第10-12页 |
| 第一章 文献综述 母源-合子转换过程中表观遗传的动态变化 | 第12-21页 |
| 1 表观遗传变化 | 第12-17页 |
| 2 与MZT相关的调控因子 | 第17-21页 |
| 第二章 实验研究 Dux基因在小鼠合子基因组激活过程中的作用研究 | 第21-62页 |
| 前言 | 第21-22页 |
| 1 材料 | 第22-25页 |
| 1.1 仪器和设备 | 第22页 |
| 1.2 耗材和实验动物 | 第22-23页 |
| 1.2.1 耗材 | 第22-23页 |
| 1.2.2 实验动物 | 第23页 |
| 1.3 试剂及配制 | 第23-25页 |
| 1.3.1 分子实验相关试剂 | 第23页 |
| 1.3.2 免疫荧光相关试剂 | 第23-24页 |
| 1.3.3 试剂配制 | 第24-25页 |
| 2 试验方法 | 第25-41页 |
| 2.1 实验设计 | 第25-30页 |
| 2.1.1 Dux在小鼠植入前胚胎发育中的动态变化 | 第25-26页 |
| 2.1.2 Dux对胚胎发育的影响 | 第26页 |
| 2.1.3 验证Dux与 Zscan4 的作用关系 | 第26-28页 |
| 2.1.4 数据统计 | 第28-30页 |
| 2.1.5 Dux过表达小鼠的构建 | 第30页 |
| 2.2 操作方法 | 第30-41页 |
| 2.2.1 超数排卵 | 第30页 |
| 2.2.2 受精卵和MII期卵母细胞的收集 | 第30-31页 |
| 2.2.3 胚胎的体外培养 | 第31页 |
| 2.2.4 实时荧光定量PCR操作 | 第31-34页 |
| 2.2.5 胚胎免疫荧光染色 | 第34页 |
| 2.2.6 胚胎的免疫印迹分析 | 第34-39页 |
| 2.2.8 细胞转染 | 第39页 |
| 2.2.9 双荧光素酶报告基因活性检测 | 第39页 |
| 2.2.10 Dux过表达小鼠的鉴定 | 第39-41页 |
| 3 结果 | 第41-59页 |
| 3.1 Dux在植入前胚胎发育中的动态变化 | 第41-44页 |
| 3.1.1 Dux在植入前胚胎发育中的表达模式 | 第41-42页 |
| 3.1.2 ZGA相关基因在MII卵母细胞和植入前胚胎发育中的表达模式 | 第42-44页 |
| 3.2 Dux对胚胎发育的影响 | 第44-48页 |
| 3.2.1 Dux敲减效率检测 | 第44-45页 |
| 3.2.2 Dux敲减后的胚胎发育情况 | 第45-46页 |
| 3.2.3 Dux敲减后ZGA相关基因表达的影响 | 第46-48页 |
| 3.3 验证Dux与 Zscan4 的作用关系 | 第48-57页 |
| 3.3.1 LTR与 Zscan4 上游理论启动子区域序列比对的结果 | 第48页 |
| 3.3.2 Dux表达载体构建 | 第48-52页 |
| 3.3.3 萤火虫荧光素酶的构建 | 第52-57页 |
| 3.3.4 双荧光素酶报告基因系统检测结果 | 第57页 |
| 3.4 Dux过表达小鼠的鉴定 | 第57-59页 |
| 4 讨论 | 第59-61页 |
| 5 结论 | 第61-62页 |
| 参考文献 | 第62-67页 |
| 致谢 | 第67-68页 |
