| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-9页 |
| 第1章 绪论 | 第15-35页 |
| 1.1 DNA功能化种类及应用 | 第16-19页 |
| 1.1.1 化学修饰功能化及应用 | 第16-18页 |
| 1.1.2 结构设计功能化及应用 | 第18-19页 |
| 1.2 DNA纳米结构的种类和应用 | 第19-23页 |
| 1.2.1 DNA纳米结构的种类 | 第19-21页 |
| 1.2.2 DNA纳米结构的应用 | 第21-23页 |
| 1.3 固体支持磷脂双分子层及应用 | 第23-26页 |
| 1.3.1 固体支持磷脂双分子层 | 第23-24页 |
| 1.3.2 固体支持磷脂双分子层的应用 | 第24-26页 |
| 1.4 蛋白相互作用研究技术现状 | 第26-29页 |
| 1.4.1 分子生物学技术 | 第26-27页 |
| 1.4.2 生物物理学技术 | 第27-28页 |
| 1.4.3 小结 | 第28-29页 |
| 1.5 活细胞物质递送研究现状 | 第29-33页 |
| 1.5.1 载体依赖的物质递送方法和局限 | 第29-32页 |
| 1.5.2 细胞膜破坏介导的物质递送方法和局限 | 第32-33页 |
| 1.5.3 小结 | 第33页 |
| 1.6 本研究课题的提出 | 第33-35页 |
| 第2章 单分子水平实时观测酶促级联反应动态 | 第35-65页 |
| 2.1 引言 | 第35-38页 |
| 2.2 实验部分 | 第38-51页 |
| 2.2.1 实验材料和仪器 | 第38-46页 |
| 2.2.2 实验步骤 | 第46-51页 |
| 2.2.2.1 葡萄糖氧化酶及过氧化氢酶的修饰和表征 | 第46-47页 |
| 2.2.2.2 脂质体以及玻璃表面磷脂双分子层的制备 | 第47页 |
| 2.2.2.3 葡萄糖氧化酶在三角DNA折纸筏上的组装和表征 | 第47-48页 |
| 2.2.2.4 过氧化氢酶和葡萄糖氧化酶分别在磷脂双分子层上动态和静态连接 | 第48-49页 |
| 2.2.2.5 荧光漂白后恢复实验 | 第49页 |
| 2.2.2.6 级联反应发生时对过氧化氢酶的运动和分布进行追踪和成像 | 第49-50页 |
| 2.2.2.7 荧光各向异性实验 | 第50-51页 |
| 2.3 结果和讨论 | 第51-64页 |
| 2.3.1 荧光分子和DNA修饰的过氧化氢酶在磷脂双层上的动态连接 | 第51-54页 |
| 2.3.2 装载葡萄糖氧化酶的折纸筏在磷脂双层上锚定 | 第54-55页 |
| 2.3.3 级联反应发生时葡萄糖氧化酶周围过氧化氢酶的扩散行为 | 第55-59页 |
| 2.3.4 级联反应发生时葡萄糖氧化酶周围过氧化氢酶的分布行为 | 第59-64页 |
| 2.4 总结 | 第64-65页 |
| 第3章 单分子水平细胞信号通路蛋白动态相互作用追踪 | 第65-89页 |
| 3.1 引言 | 第65-69页 |
| 3.2 实验部分 | 第69-76页 |
| 3.2.1 实验材料和仪器 | 第69-72页 |
| 3.2.2 实验步骤 | 第72-76页 |
| 3.2.2.1 真核细胞表达纯化带生物素标签的AKT2和GSK3β | 第72页 |
| 3.2.2.2 检验目标蛋白表达效果 | 第72-73页 |
| 3.2.2.3 在带生物素标签的AKT2上连接DNA | 第73-74页 |
| 3.2.2.4 在磷脂双层上动态组装DNA修饰的AKT2并表征 | 第74页 |
| 3.2.2.5 三角DNA折纸筏上组装GSK3β 并表征 | 第74-75页 |
| 3.2.2.6 实时观测AKT2和GSK3β 动态相互作用 | 第75-76页 |
| 3.3 结果和讨论 | 第76-87页 |
| 3.3.1 研究对象信号蛋白的选择 | 第76-77页 |
| 3.3.2 研究对象信号蛋白表达情况 | 第77-80页 |
| 3.3.3 上游激酶AKT2在磷脂双层上的连接和运动行为 | 第80-82页 |
| 3.3.4 下游激酶GSK3β 在DNA折纸筏上的组装情况 | 第82-85页 |
| 3.3.5 上下游激酶动态相互作用追踪 | 第85-87页 |
| 3.4 小结 | 第87-89页 |
| 第4章 DNA杂交介导的膜融合向细胞质递送外源蛋白 | 第89-113页 |
| 4.1 引言 | 第89-91页 |
| 4.2 实验部分 | 第91-97页 |
| 4.2.1 实验材料和仪器 | 第91-93页 |
| 4.2.2 实验步骤 | 第93-97页 |
| 4.2.2.1 脂质体制备 | 第93页 |
| 4.2.2.2 细胞培养及材料细胞毒性测试 | 第93-94页 |
| 4.2.2.3 细胞和脂质体融合实验 | 第94-95页 |
| 4.2.2.4 选择性膜融合和蛋白递送实验 | 第95-96页 |
| 4.2.2.5 时空控制脂质体和细胞结合实验 | 第96页 |
| 4.2.2.6 细胞毒性蛋白递送实验 | 第96-97页 |
| 4.3 结果和讨论 | 第97-112页 |
| 4.3.1 DNA杂交介导脂质体与细胞膜融合及辣根过氧化物酶递送 | 第97-104页 |
| 4.3.2 DNA杂交介导的膜融合与内吞途径无关 | 第104-107页 |
| 4.3.3 DNA杂交特异性介导的选择性融合 | 第107-109页 |
| 4.3.4 杂交链反应介导脂质体和细胞时空可控结合 | 第109-111页 |
| 4.3.5 DNA杂交介导膜融合递送细胞毒蛋白 | 第111-112页 |
| 4.4 小结 | 第112-113页 |
| 第5章 总结与展望 | 第113-115页 |
| 参考文献 | 第115-147页 |
| 致谢 | 第147-149页 |
| 作者简历及攻读学位期间发表的学术论文与研究成果 | 第149页 |
