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基于DNA的生物计算和超分辨成像

摘要第5-7页
abstract第7-9页
第1章 引言第17-39页
    1.1 DNA分子的化学反应特性和纳米材料特性第17页
    1.2 DNA计算和DNA纳米结构观测平台第17-35页
        1.2.1 基于DNA的生物计算体系第17-24页
            1.2.1.1 DNA链取代反应第20页
            1.2.1.2 基于链取代反应的DNA计算系统的设计第20-22页
            1.2.1.3 DNA链取代反应构建的计算网络第22-24页
        1.2.2 DNA水凝胶第24-26页
            1.2.2.1 DNA水凝胶的设计第24页
            1.2.2.2 响应型的智能DNA水凝胶第24-26页
        1.2.3 DNA折纸第26-31页
            1.2.3.1 DNA折纸在生物成像中的应用第28-31页
        1.2.4 光学超分辨成像第31-35页
            1.2.4.1 突破光学衍射极限的成像方法第31-34页
            1.2.4.2 光学超分辨成像在DNA纳米结构表征中的应用第34-35页
    1.3 总结和课题提出第35-39页
第2章 基于DNA链取代反应的数字逻辑电路第39-73页
    2.1 引言第39-41页
    2.2 实验部分第41-46页
        2.2.1 试剂第41页
        2.2.2 DNA链的序列的设计第41-44页
        2.2.3 DNA链的定浓和DNA双链的制备第44-45页
        2.2.4 基本运算单元的功能性测试第45页
        2.2.5 转接器的功能性测试第45页
        2.2.6 扇入、扇出电路的运行和输出信号读取第45-46页
        2.2.7 电路运行情况的数值模拟第46页
        2.2.8 链取代反应的单分子观察第46页
    2.3 结果与讨论第46-71页
        2.3.1 结构域长度对链取代反应的影响第46-48页
        2.3.2 基本链取代反应的结构设计第48-51页
        2.3.3 链取代反应的单分子观察第51-53页
        2.3.4 基本的双轨运算单元第53-57页
        2.3.5 转接器实现可放大的信号转换第57-61页
        2.3.6 基于双轨运算单元的级联运算第61-66页
        2.3.7 基于双轨运算单元的扇入、扇出运算第66-68页
        2.3.8 基于双轨逻辑运算单元的多种功能性运算第68-70页
        2.3.9 基于功能的电路化简与生成第70-71页
    2.4 结论第71-73页
第3章 ATP快速响应的DNA水凝胶第73-81页
    3.1 引言第73-74页
    3.2 实验部分第74-76页
        3.2.1 试剂第74-75页
        3.2.2 DNA链的定浓与DNA水凝胶的制备第75页
        3.2.3 DNA水凝胶的流变学表征第75页
        3.2.4 ATP响应的有效性和特异性测试第75-76页
    3.3 结果与讨论第76-79页
        3.3.1 DNA水凝胶的流变学特征第76-77页
        3.3.2 DNA水凝胶的ATP响应特性第77页
        3.3.3 DNA水凝胶对ATP响应的特异性第77-79页
    3.4 结论第79-81页
第4章 DNA折纸平台上的CRISPR单分子行为研究第81-105页
    4.1 引言第81页
    4.2 实验部分第81-87页
        4.2.1 试剂第81-84页
        4.2.2 组装靶标的DNA折纸制备第84-85页
        4.2.3 sgRNA的准备第85页
        4.2.4 DNA切割与结合的PAGE电泳表征第85页
        4.2.5 AFM下的单分子观察第85页
        4.2.6 盖玻片修饰第85-86页
        4.2.7 TIRFM下的单分子观察第86-87页
    4.3 结果与讨论第87-103页
        4.3.1 DNA折纸上单分子CRISPR作用的AFM观察第87-88页
        4.3.2 TIRF上实时观察sgRNA/Cas9的切割动态第88-89页
        4.3.3 溶液中存在干扰单链DNA时对CRISPR系统的影响第89-90页
        4.3.4 DNA折纸上的篱笆链对CRISPR靶标结合作用的影响第90-92页
        4.3.5 DNA折纸上的篱笆链对CRISPR靶标切割作用的影响第92-93页
        4.3.6 切割增强效应的建模分析第93-94页
        4.3.7 篱笆链引起的切割增强效应的距离相关性第94-95页
        4.3.8 篱笆链引起的切割增强效应的PAM密度相关性第95-97页
        4.3.9 TIRF下单分子观察DNA折纸上的篱笆链对Cas9结合事件的影响第97-98页
        4.3.10 单分子追踪Cas9结合到DNA折纸上以后的运动轨迹第98页
        4.3.11 通过双链化的方法研究每个sgRNA上每个结构域的作用第98-101页
        4.3.12 利用本地化激活的体系实现CRISPR/Cas9作用的空间特异性第101-102页
        4.3.13 利用加尾的sgRNA实现CRISPR系统作用的空间特异性第102-103页
    4.4 结论第103-105页
第5章 DNA纳米结构的光学超分辨成像第105-125页
    5.1 引言第105页
    5.2 实验部分第105-108页
        5.2.1 试剂第105-106页
        5.2.2 荧光闪烁成像buffer制备第106页
        5.2.3 细胞微管的荧光标记第106页
        5.2.4 DNA折纸的制备第106-107页
        5.2.5 基于淬灭的超分辨成像第107页
        5.2.6 细胞微管的STORM成像第107页
        5.2.7 DNA折纸的STROM成像第107页
        5.2.8 DNA折纸的DNA-PAINT成像第107-108页
    5.3 结果与讨论第108-122页
        5.3.1 基于点扫描的成像方式带来的分辨率限制第108-109页
        5.3.2 利用荧光分子集体淬灭的过程实现超分辨成像第109-110页
        5.3.3 通过荧光分子的淬灭、唤醒过程实现对纳米颗粒和细胞微管结构的二维超分辨第110-113页
        5.3.4 图片的二维超分辨重建第113页
        5.3.5 光斑形状对荧光分子数密度的依赖性第113-115页
        5.3.6 荧光分子激发特性对光斑形状的影响第115-116页
        5.3.7 利用N-STORM系统实现细胞骨架结构的三维超分辨成像第116页
        5.3.8 利用N-STORM结合漂移校正优化实现DNA折纸上结构的超分辨成像第116-118页
        5.3.9 通过设计DNA折纸上的目标形状表征成像分辨率第118-119页
        5.3.10 利用DNA-PAINT技术实现DNA折纸上的形貌表征第119-121页
        5.3.11 CRISPR特异性切割作用的超分辨表征第121-122页
    5.4 结论第122-125页
第6章 总结和展望第125-127页
参考文献第127-137页
致谢第137-141页
作者简历及攻读博士学位期间发表的学术论文与研究成果第141页

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