| 摘要 | 第4-6页 |
| ABSTRACT | 第6-7页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-34页 |
| 1.1 尼古丁及其理化性质介绍 | 第13-14页 |
| 1.2 尼古丁的危害 | 第14-15页 |
| 1.3 尼古丁污染的来源和降解的必要性 | 第15-18页 |
| 1.3.1 尼古丁污染的来源 | 第15-17页 |
| 1.3.2 尼古丁降解的必要性 | 第17-18页 |
| 1.4 国内外尼古丁降解微生物研究进展 | 第18-25页 |
| 1.4.1 尼古丁降解微生物 | 第18页 |
| 1.4.2 尼古丁代谢途径研究 | 第18-23页 |
| 1.4.3 假单胞菌降解尼古丁研究进展 | 第23-25页 |
| 1.5 造纸法再造烟叶薄片生产及功能微生物在其中的应用 | 第25-27页 |
| 1.5.1 造纸法再造烟叶薄片生产工艺 | 第25-26页 |
| 1.5.2 功能微生物在卷烟工业中的应用 | 第26页 |
| 1.5.3 废次烟草提取液(TWE)中微生物的多样性 | 第26-27页 |
| 1.6 本研究的意义和内容 | 第27-28页 |
| 1.6.1 研究的背景及意义 | 第27-28页 |
| 1.6.2 研究内容 | 第28页 |
| 参考文献 | 第28-34页 |
| 第二章 废次烟草提取液(TWE)中细菌多样性分析 | 第34-45页 |
| 2.1 材料与方法 | 第35-37页 |
| 2.1.1 分析样品 | 第35页 |
| 2.1.2 废次烟草提取液中细菌多样性分析方法 | 第35-37页 |
| 2.1.2.1 样品中总基因组DNA的提取 | 第35-36页 |
| 2.1.2.2 16S rDNA的扩增,纯化和定量 | 第36页 |
| 2.1.2.3 emPCR和焦磷酸测序 | 第36-37页 |
| 2.1.2.4 统计和生物信息学分析 | 第37页 |
| 2.2 结果与讨论 | 第37-43页 |
| 2.2.1 样品基因组DNA PCR结果及序列统计分析 | 第37-39页 |
| 2.2.2 样品微生物多样性统计分析 | 第39-43页 |
| 2.3 本章小结 | 第43页 |
| 参考文献 | 第43-45页 |
| 第三章 尼古丁降解菌Pseudomonas sp. JY-Q分离、鉴定 | 第45-57页 |
| 3.1 材料与方法 | 第45-51页 |
| 3.1.1 菌种分离样品 | 第45页 |
| 3.1.2 培养基 | 第45-46页 |
| 3.1.3 实验试剂 | 第46-47页 |
| 3.1.4 实验仪器 | 第47-48页 |
| 3.1.5 尼古丁降解菌的分离纯化 | 第48-49页 |
| 3.1.6 菌种鉴定 | 第49页 |
| 3.1.6.1 菌株形态学观察 | 第49页 |
| 3.1.6.2 生理生化实验 | 第49页 |
| 3.1.7 菌株16S rRNA序列测定及系统发育分析 | 第49-51页 |
| 3.1.7.1 菌株基因组DNA提取 | 第49-50页 |
| 3.1.7.2 菌株16S rDNA PCR扩增及测序 | 第50-51页 |
| 3.1.7.3 菌株16S rDNA序列比对及系统发育树构建 | 第51页 |
| 3.2 结果与讨论 | 第51-54页 |
| 3.2.1 尼古丁降解菌的分离纯化 | 第51-52页 |
| 3.2.2 菌株JY-Q形态观察及生理生化实验 | 第52页 |
| 3.2.3 菌株JY-Q基因组提取,16S rDNA PCR扩增及测序 | 第52-54页 |
| 3.2.4 菌株JY-Q 16S rDNA序列比对及系统发育树构建 | 第54页 |
| 3.3 本章小结 | 第54-55页 |
| 参考文献 | 第55-57页 |
| 第四章 尼古丁降解菌Pseudomonas sp. JY-Q降解研究及降烟碱应用 | 第57-77页 |
| 4.1 材料与方法 | 第57-63页 |
| 4.1.1 供试菌株 | 第57-58页 |
| 4.1.2 培养基 | 第58页 |
| 4.1.3 实验试剂 | 第58-59页 |
| 4.1.4 实验仪器 | 第59-60页 |
| 4.1.5 种子液制备 | 第60-61页 |
| 4.1.6 分析检测方法 | 第61页 |
| 4.1.7 Pseudomonas sp. JY-Q在基本培养基BSM中的降解研究 | 第61-62页 |
| 4.1.7.1 不同温度对Pseudomonas sp. JY-Q降解尼古丁的影响 | 第61页 |
| 4.1.7.2 不同pH对Pseudomonas sp. JY-Q降解尼古丁的影响 | 第61页 |
| 4.1.7.3 不同尼古丁浓度对Pseudomonas sp. JY-Q降解的影响 | 第61-62页 |
| 4.1.8 Pseudomonas sp. JY-Q在废次烟草提取液中的降烟碱应用研究 | 第62页 |
| 4.1.8.1 Pseudomonas sp.JY-Q在不同稀释浓度TWE中的降烟碱研究 | 第62页 |
| 4.1.8.2 添加硫酸铵、酵母膏对菌株在10%TWE中的降烟碱影响 | 第62页 |
| 4.1.9 Pseudomonas sp.JY-Q固定化细胞对BSM及TWE中尼古丁降解研究 | 第62-63页 |
| 4.1.10 Pseudomonas sp. JY-Q在发酵罐中对5%TWE中尼古丁降解中试试验 | 第63页 |
| 4.2 结果与讨论 | 第63-75页 |
| 4.2.1 尼古丁HPLC标准曲线 | 第63-64页 |
| 4.2.2 Pseudomonas sp. JY-Q在基本培养基BSM中的降解 | 第64-67页 |
| 4.2.2.1 Pseudomonas sp. JY-Q在尼古丁浓度为2g/L BSM中的降解 | 第64-65页 |
| 4.2.2.2 不同温度对Pseudomonas sp. JY-Q降解尼古丁和菌体生长的影响 | 第65-66页 |
| 4.2.2.3 不同pH对Pseudomonas sp. JY-Q降解尼古丁和菌体生长的影响 | 第66-67页 |
| 4.2.2.4 不同尼古丁浓度对Pseudomonas sp. JY-Q降解和菌体生长的影响 | 第67页 |
| 4.2.3 Pseudomonas sp. JY-Q在造纸法再造烟叶生产工艺中废次烟草提取液(tobacco waste extract,TWE)中的降烟碱应用研究 | 第67-71页 |
| 4.2.3.1 不同接种量Pseudomonas sp. JY-Q在5%TWE中的降烟碱情况 | 第67-68页 |
| 4.2.3.2 Pseudomonas sp. JY-Q在不同稀释浓度TWE中的降烟碱、β-D-Glu情况 | 第68-70页 |
| 4.2.3.3 添加硫酸铵、酵母膏对菌株在10%TWE中的降烟碱影响 | 第70-71页 |
| 4.2.4 Pseudomonas sp.JY-Q固定化细胞对BSM及TWE中尼古丁降解 | 第71-74页 |
| 4.2.4.1 固定化细胞对BSM中尼古丁降解及其降解重复次数 | 第71-72页 |
| 4.2.4.2 固定化细胞对5%TWE中尼古丁降解及其降解重复次数 | 第72-74页 |
| 4.2.5 Pseudomonas sp. JY-Q在发酵罐中对5%TWE中尼古丁降解中试实验 | 第74-75页 |
| 4.3 本章小结 | 第75-76页 |
| 参考文献 | 第76-77页 |
| 第五章 Pseudomonas sp. JY-Q代谢中间产物初步检测分析 | 第77-83页 |
| 5.1 材料与方法 | 第77-79页 |
| 5.1.1 供试菌株 | 第77页 |
| 5.1.2 培养基 | 第77页 |
| 5.1.3 实验试剂 | 第77-78页 |
| 5.1.4 实验仪器 | 第78-79页 |
| 5.1.5 Pseudomonas sp.JY-Q代谢中间产物检测分析方法 | 第79页 |
| 5.2 结果与讨论 | 第79-82页 |
| 5.2.1 Pseudomonas sp.JY-Q尼古丁代谢产物GC-MS检测结果 | 第80-82页 |
| 5.3 本章小结 | 第82页 |
| 参考文献 | 第82-83页 |
| 第六章 实验总结与展望 | 第83-87页 |
| 6.1 主要研究结论 | 第83-84页 |
| 6.2 创新之处 | 第84-85页 |
| 6.3 不足与展望 | 第85-87页 |
| 致谢 | 第87-88页 |
| 攻读学位期间发表的学术论文 | 第88页 |
