| 摘要 | 第5-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| LIST OF ABBREVIATIONS | 第9-11页 |
| 第一章 综述 | 第11-21页 |
| 1.1 丝状真菌的多样性 | 第11页 |
| 1.2 全局性调控因子LaeA的研究 | 第11-12页 |
| 1.3 丝状真菌遗传转化方法的研究进展 | 第12-14页 |
| 1.3.1 遗传转化体系的研究进展 | 第12-13页 |
| 1.3.2 介导丝状真菌的遗传转化的方法 | 第13-14页 |
| 1.3.3 遗传转化体系的应用 | 第14页 |
| 1.4 根癌农杆菌介导丝状真菌遗传转化的研究进展 | 第14-21页 |
| 1.4.1 根癌农杆菌在遗传转化体系构建中的应用 | 第14-15页 |
| 1.4.2 根癌农杆菌对转化的影响 | 第15-16页 |
| 1.4.3 受体菌对转化的影响 | 第16-18页 |
| 1.4.4 诱导剂对转化的影响 | 第18页 |
| 1.4.5 共培养条件对转化的影响 | 第18-21页 |
| 第二章 绪论 | 第21-23页 |
| 2.1 本实验课题的提出 | 第21页 |
| 2.2 本研究的目的、意义及主要研究内容 | 第21-23页 |
| 2.2.1 研究目的及意义 | 第21页 |
| 2.2.2 实验主要研究内容 | 第21-23页 |
| 第三章 材料与方法 | 第23-35页 |
| 3.1 材料 | 第23-26页 |
| 3.1.1 菌种和质粒 | 第23页 |
| 3.1.2 培养基 | 第23-24页 |
| 3.1.3 使用引物 | 第24-26页 |
| 3.1.4 主要仪器 | 第26页 |
| 3.1.5 实验试剂 | 第26页 |
| 3.2 方法 | 第26-35页 |
| 3.2.1 菌种的生长、保存及MIC值测定 | 第26-27页 |
| 3.2.2 质粒的构建 | 第27-28页 |
| 3.2.3 碱裂解法从大肠杆菌中提取质粒 | 第28页 |
| 3.2.4 大肠杆菌感受态的制备及热激法转化 | 第28-29页 |
| 3.2.5 根癌农杆菌感受态细胞的制备 | 第29页 |
| 3.2.6 转移质粒进入根癌农杆菌 | 第29-30页 |
| 3.2.7 橘青霉孢子悬液的制备 | 第30页 |
| 3.2.8 根癌农杆菌介导转化真菌 | 第30-31页 |
| 3.2.9 真菌总基因组的DNA提取 | 第31页 |
| 3.2.10 PCR法验证转化子 | 第31-32页 |
| 3.2.11 转化子遗传稳定性检测 | 第32页 |
| 3.2.12 转化子的发酵及产物的检测 | 第32-35页 |
| 第四章 实验结果和分析 | 第35-49页 |
| 4.1 重组质粒pGiHT-laeA的构建 | 第35-38页 |
| 4.2 橘青霉遗传转化体系的建立 | 第38-43页 |
| 4.2.1 筛选橘青霉转化子所用抗生素种类和浓度的确定 | 第38页 |
| 4.2.2 抑制根癌农杆菌生长所用抗生素种类和浓度的确定 | 第38-39页 |
| 4.2.3 根癌农杆菌种类以及浓度的确定 | 第39页 |
| 4.2.4 孢子浓度的确定 | 第39-40页 |
| 4.2.5 诱导剂乙酰丁香酮浓度的确定 | 第40-41页 |
| 4.2.6 共培养时间的确定 | 第41页 |
| 4.2.7 共培养温度的确定 | 第41-42页 |
| 4.2.8 共培养条件对比 | 第42-43页 |
| 4.3 Pci-laeA转化子的筛选及鉴定 | 第43-44页 |
| 4.3.1 橘青霉阳性转化子的筛选 | 第43-44页 |
| 4.3.2 转化子遗传稳定性检测 | 第44页 |
| 4.4 Pci-laeA转化子对橘青霉表型的影响 | 第44-46页 |
| 4.5 Pci-laeA转化子对橘青霉美伐他汀产量的影响 | 第46-49页 |
| 第五章 讨论与展望 | 第49-53页 |
| 5.1 根癌农杆菌介导的橘青霉遗传转化 | 第49-50页 |
| 5.2 Pci-laeA对橘青霉表型的影响 | 第50-51页 |
| 5.3 Pci-laeA对橘青霉美伐他汀生物合成的影响 | 第51页 |
| 5.4 总结与创新点 | 第51-53页 |
| 参考文献 | 第53-57页 |
| 研究生期间发表的论文 | 第57-59页 |
| 致谢 | 第59-60页 |
