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镇江地区诺如病毒分子流行病学分析及其与肠道菌群关系的初步研究

摘要第5-8页
Abstract第8-10页
英文缩略词表第15-17页
第一章 绪论第17-25页
    1.1 诺如病毒概述第17-22页
        1.1.1 病原学第17-18页
        1.1.2 流行病学特征第18-19页
        1.1.3 基因组学进展第19-21页
        1.1.4 实验室检测第21-22页
        1.1.5 主要问题第22页
    1.2 本研究的目的、内容及技术路线第22-25页
        1.2.1 研究目的第22页
        1.2.2 研究内容第22-24页
        1.2.3 技术路线第24-25页
第二章 镇江地区肠道诺如病毒感染状况分析第25-41页
    2.1 材料第25-28页
        2.1.1 哨点医院的选择第25页
        2.1.2 病例定义及采样要求第25-26页
        2.1.3 主要试剂第26页
        2.1.4 主要溶液的配制第26-27页
        2.1.5 主要仪器设备第27页
        2.1.6 主要网站及相关分析软件第27页
        2.1.7 统计分析第27-28页
    2.2 方法第28-32页
        2.2.1 标本的采集第28页
        2.2.2 临床样本处理第28页
        2.2.3 基因克隆引物的合成第28-29页
        2.2.4 RNA抽提第29页
        2.2.5 实时荧光聚合酶链式(PCR)反应第29-30页
        2.2.6 目的基因的逆转录PCR第30-31页
        2.2.7 PCR产物电泳第31页
        2.2.8 序列测定及分析第31页
        2.2.9 相似性分析第31页
        2.2.10 病毒序列号第31-32页
    2.3 结果第32-39页
        2.3.1 病毒感染总体情况第32页
        2.3.2 实时荧光RT-PCR结果第32-34页
        2.3.3 按月份分布情况第34-35页
        2.3.4 按地区分布情况第35页
        2.3.5 按年龄分布情况第35-36页
        2.3.6 按性别分布第36页
        2.3.7 RT-PCR结果第36-37页
        2.3.8 基因型分布第37-39页
        2.3.9 相似性分析第39页
    2.4 讨论第39-41页
第三章 诺如病毒进化与重组分析第41-57页
    3.1 材料第41-42页
        3.1.1 样本和软件第41页
        3.1.2 主要试剂第41-42页
        3.1.3 主要溶液配制第42页
        3.1.4 主要仪器设备第42页
    3.2 方法第42-47页
        3.2.1 NoV引物第42-43页
        3.2.2 GI/GII序列片段扩增第43-44页
        3.2.3 PCR产物电泳第44页
        3.2.4 核酸序列测定第44页
        3.2.5 序列进化分析第44-45页
        3.2.6 重组株的鉴定第45页
        3.2.7 NoV参考株第45-47页
    3.3 结果第47-55页
        3.3.1 PCR扩增结果第47页
        3.3.2 测序结果第47-48页
        3.3.3 基于RdRp区的进化分析第48-50页
        3.3.4 基于Capsid区(ORF2)的进化分析第50-52页
        3.3.5 GII.17 型的进化分析第52-54页
        3.3.6 重组分析第54-55页
    3.4 讨论第55-57页
第四章 诺如病毒感染与肠道菌群第57-80页
    4.1 材料第57-58页
        4.1.1 临床样本第57-58页
        4.1.2 主要试剂第58页
        4.1.3 主要溶液配制第58页
        4.1.4 主要仪器第58页
        4.1.5 网站及统计分析第58页
    4.2 方法第58-62页
        4.2.1 总DNA的提取第58-59页
        4.2.2 引物设计第59页
        4.2.3 PCR扩增第59页
        4.2.4 凝胶电泳第59-60页
        4.2.5 测序与数据质控第60页
        4.2.6 OTU分析第60-61页
        4.2.7 物种分类和丰度分析第61页
        4.2.8 Alpha多样性分析第61页
        4.2.9 Beta多样性分析第61页
        4.2.10 显著性差异分析第61页
        4.2.11 系统发生进化树第61-62页
        4.2.12 NMDS分析(非度量多维尺度分析)第62页
    4.3 结果第62-77页
        4.3.1 凝胶电泳第62-63页
        4.3.2 数据统计第63页
        4.3.3 OTU分析第63-68页
        4.3.4 物种分类和丰度分析第68-70页
        4.3.5 单个样品复杂度分析第70-72页
        4.3.6 样品间复杂度分析第72页
        4.3.7 显著性差异分析第72-74页
        4.3.8 系统发生进化树第74-75页
        4.3.9 NMDS分析第75-77页
    4.4 讨论第77-80页
第五章 主要结论及展望第80-82页
    5.1 主要结论第80页
    5.2 主要展望第80-82页
参考文献第82-90页
致谢第90-91页
攻读硕士学位期间发表的论文和参加的课题第91-92页
    发表的论文第91页
    参加的课题第91-92页

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