| 摘要 | 第1-5页 |
| Abstract | 第5-10页 |
| 1 文献综述 | 第10-24页 |
| ·模式植物拟南芥 | 第10-11页 |
| ·拟南芥的一般生物学特性 | 第10页 |
| ·拟南芥的遗传学特性 | 第10-11页 |
| ·拟南芥功能基因组学研究 | 第11-16页 |
| ·基于DNA序列的基因功能分析技术 | 第12-13页 |
| ·基于生物芯片的基因功能分析技术 | 第13-14页 |
| ·利用正向和反向遗传学技术的基因功能分析 | 第14-16页 |
| ·拟南芥突变体库构建 | 第16-22页 |
| ·理化诱变突变体库 | 第16-17页 |
| ·转座子突变体库 | 第17-18页 |
| ·农杆菌介导的T-DNA插入突变体库 | 第18-20页 |
| ·激活标签(Activation tagging)功能获得型突变体库 | 第20-22页 |
| ·丙氨酸 | 第22页 |
| ·研究的目的和意义 | 第22-24页 |
| 2 激活标签法构建拟南芥T-DNA插入突变体库及表型分析 | 第24-40页 |
| ·材料和方法 | 第24-34页 |
| ·拟南芥在土壤中的大规模种植 | 第24页 |
| ·激活标记载体的转化 | 第24-25页 |
| ·农杆菌介导的拟南芥转化 | 第25页 |
| ·拟南芥转基因植株的筛选 | 第25页 |
| ·表型特异植株分析 | 第25页 |
| ·拟南芥基因组DNA提取 | 第25-26页 |
| ·Tail-PCR分离T-DNA侧翼序列 | 第26-29页 |
| ·Tail-PCR特异产物回收 | 第29-30页 |
| ·目的片段连接pMD18-T Vector | 第30页 |
| ·大肠杆菌DH5α感受态细胞的制备和转化 | 第30页 |
| ·菌液PCR鉴定 | 第30-31页 |
| ·序列分析 | 第31页 |
| ·T-DNA插入位点验证及纯合体的筛选 | 第31-32页 |
| ·拟南芥基因组总RNA的提取 | 第32-33页 |
| ·半定量RT-PCR | 第33-34页 |
| ·结果 | 第34-38页 |
| ·拟南芥激活标签突变体库的构建 | 第34页 |
| ·突变体的特异表型及分析 | 第34-38页 |
| ·讨论 | 第38-40页 |
| 3. D-丙氨酸抗性突变体的筛选及鉴定 | 第40-52页 |
| ·材料和方法 | 第40-43页 |
| ·植物材料 | 第40页 |
| ·MS培养基 | 第40-42页 |
| ·D-丙氨酸对拟南芥的胁迫分析 | 第42页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体的初筛选 | 第42页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体的复筛选 | 第42-43页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体基因组DNA的提取 | 第43页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体突变基因的分离 | 第43页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体插入位点验证及纯合体的筛选 | 第43页 |
| ·突变基因编码序列(CDS)的扩增 | 第43页 |
| ·结果 | 第43-50页 |
| ·D-丙氨酸对拟南芥的胁迫分析 | 第43-45页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体的初筛选 | 第45-47页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体的复筛选 | 第47-48页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体突变基因的分离 | 第48-49页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体插入位点验证及纯合体的筛选 | 第49-50页 |
| ·突变基因编码序列(CDS)的扩增 | 第50页 |
| ·讨论 | 第50-52页 |
| 4. 小结 | 第52-53页 |
| ·拟南芥T-DNA插入突变体库的构建 | 第52页 |
| ·表型特异突变体的表型分析及基因鉴定 | 第52-53页 |
| ·D-丙氨酸抗性突变体的筛选、基因分离及验证 | 第52-53页 |
| 参考文献 | 第53-59页 |
| 发表的学术论文 | 第59-60页 |
| 致谢 | 第60页 |