| 中文摘要 | 第6-7页 |
| Abstract | 第7-8页 |
| 论文中常用缩写词英汉对照表 | 第12-13页 |
| 第一章 文献综述 | 第13-28页 |
| 1 哺乳动物体外受精研究历史 | 第13页 |
| 2 卵母细胞的体外成熟 | 第13-14页 |
| 2.1 卵母细胞成熟的特征 | 第13-14页 |
| 2.1.1 生发泡破裂和染色体凝集 | 第13页 |
| 2.1.2 极体的排出，透明带软化 | 第13-14页 |
| 2.1.3 卵丘细胞扩展 | 第14页 |
| 2.2 细胞质成熟与卵母细胞成熟 | 第14页 |
| 3 影响卵母细胞体外成熟的因素 | 第14-21页 |
| 3.1 卵母细胞类型及存储条件 | 第14-16页 |
| 3.1.1 生化因子 | 第14-15页 |
| 3.1.2 卵母细胞成熟抑制因子 | 第15-16页 |
| 3.2 培养条件 | 第16-19页 |
| 3.2.1 培养时间和温度 | 第16页 |
| 3.2.2 气相 | 第16页 |
| 3.2.3 静置或摇动培养系统 | 第16-17页 |
| 3.2.4 培养基和血清 | 第17页 |
| 3.2.5 激素 | 第17-19页 |
| 3.3 其他添加物 | 第19-21页 |
| 3.3.1 卵泡液 | 第19页 |
| 3.3.2 颗粒细胞 | 第19-20页 |
| 3.3.3 细胞生长因子 | 第20-21页 |
| 4 精子的体外获能与体外受精 | 第21-24页 |
| 4.1 精子体外获能机制 | 第21页 |
| 4.2 影响精子体外获能的因素 | 第21-22页 |
| 4.3 精子体外获能方法 | 第22-24页 |
| 4.3.1 精子洗涤方法 | 第22-23页 |
| 4.3.2 体外受精 | 第23-24页 |
| 4.3.2.1 授精前卵母细胞的处理 | 第23页 |
| 4.3.2.2 提高精子活力的措施 | 第23-24页 |
| 5 早期胚胎培养系统 | 第24-25页 |
| 5.1 早期胚胎体外培养系统 | 第24页 |
| 5.2 影响早期胚胎体外发育的因素与胚胎体外培养系统的改进 | 第24-25页 |
| 5.2.1 胚胎体外培养系统的改进 | 第25页 |
| 6 NYD-SP27基因的研究进展 | 第25-28页 |
| 6.1 NYD-SP27基因的发现 | 第25-26页 |
| 6.2 NYD-SP27基因的研究进展 | 第26-28页 |
| 第二章 实验研究 | 第28-47页 |
| 实验一 新疆哈萨克羊NYD-SP27基因的克隆及序列分析 | 第28-36页 |
| 1 材料与方法 | 第28-31页 |
| 1.1 实验材料 | 第28-29页 |
| 1.1.1 菌株、载体及动物组织 | 第28-29页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第29页 |
| 1.1.3 主要仪器和设备 | 第29页 |
| 1.2 主要方法 | 第29-31页 |
| 1.2.1 引物设计与合成 | 第29-30页 |
| 1.2.2 总RNA的提取 | 第30页 |
| 1.2.3 cDNA制备 | 第30页 |
| 1.2.4 哈萨克羊NYD-SP27的PCR扩增和纯化 | 第30-31页 |
| 1.2.4.1 目标基因的扩增 | 第30页 |
| 1.2.4.2 目标基因的纯化及末端加A | 第30-31页 |
| 1.2.4.3 琼脂糖凝胶电泳检测 | 第31页 |
| 1.2.5 PCR产物的克隆与鉴定 | 第31页 |
| 1.2.6 序列测定及分析 | 第31页 |
| 1.3 序列测定及分析 | 第31页 |
| 2 实验结果 | 第31-35页 |
| 2.1 总RNA的分离 | 第31-32页 |
| 2.2 哈萨克羊NYD-SP27基因编码区的克隆结果 | 第32页 |
| 2.3 哈萨克羊NYD-SP27基因序列分析结果 | 第32-35页 |
| 3 讨论 | 第35-36页 |
| 实验二 绵羊NYD-SP27干扰载体对绵羊体外受精效率的影响 | 第36-47页 |
| 1 材料与方法 | 第36-40页 |
| 1.1 实验材料 | 第36-37页 |
| 1.1.1 实验材料来源 | 第36页 |
| 1.1.2 主要试剂 | 第36-37页 |
| 1.1.3 主要仪器 | 第37页 |
| 1.1.4 试剂配置 | 第37页 |
| 1.2 主要实验方法与步骤 | 第37-40页 |
| 1.2.1 卵巢卵母细胞的采集 | 第37页 |
| 1.2.2 卵母细胞的成熟培养 | 第37-38页 |
| 1.2.3 大提质粒 | 第38-39页 |
| 1.2.4 双侧睾丸质粒注射 | 第39页 |
| 1.2.5 精液采集 | 第39-40页 |
| 1.2.6 睾丸组织中目标基因表达量变化的半定量PCR检测 | 第40页 |
| 1.2.7 体外受精 | 第40页 |
| 1.2.8 受精卵发育培养 | 第40页 |
| 1.3 数据处理分析 | 第40页 |
| 2 试验结果 | 第40-44页 |
| 2.1 不同卵母细胞采集方法对卵母细胞质量和数量的影响 | 第40-41页 |
| 2.2 不同来源血清和激素对卵母细胞成熟率的影响 | 第41页 |
| 2.3 睾丸组织NYD-SP27基因表达量的PCR验证 | 第41-42页 |
| 2.4 精子荧光显微镜下的检测 | 第42页 |
| 2.5 NYD-SP27基因对绵羊精液品质的的影响 | 第42-43页 |
| 2.6 NYD-SP27基因对绵羊体外受精率的影响 | 第43页 |
| 2.7 NYD-SP27基因对绵羊早期发育率的影响 | 第43-44页 |
| 3 讨论 | 第44-47页 |
| 3.1 不同卵母细胞采集方法对卵母细胞利用效率的影响 | 第44页 |
| 3.2 成熟液中添加不同种类激素和血清对卵母细胞成熟率的影响 | 第44-45页 |
| 3.3 NYD-SP27基因绵羊精液品质、体外受精和桑椹胚发育的影响 | 第45-47页 |
| 全文总结 | 第47-48页 |
| 创新点 | 第48-49页 |
| 参考文献 | 第49-57页 |
| 致谢 | 第57-58页 |
| 作者简介 | 第58-59页 |
| 导师评阅表 | 第59页 |
