摘要 | 第3-5页 |
Abstract | 第5页 |
1 绪论 | 第11-20页 |
1.1 引言 | 第11-13页 |
1.1.1 鲟鱼的分类地位及分布 | 第11-12页 |
1.1.2 国内外鲟鱼资源及现状 | 第12页 |
1.1.3 本研究的目的和意义 | 第12-13页 |
1.2 文献综述 | 第13-20页 |
1.2.1 免疫球蛋白的定义及鱼类免疫球蛋白的特性 | 第14页 |
1.2.2 免疫球蛋白重链结构 | 第14-15页 |
1.2.3 免疫球蛋白可变区及恒定区功能 | 第15-16页 |
1.2.4 鱼类免疫球蛋白基因重组方式研究进展 | 第16-17页 |
1.2.5 鱼类免疫球蛋白的血清学研究进展 | 第17-18页 |
1.2.6 鱼类免疫球蛋白分子生物学研究进展 | 第18-19页 |
1.2.7 鱼类免疫球蛋白分子亚单位的研究进展 | 第19-20页 |
2 材料与方法 | 第20-29页 |
2.1 实验材料 | 第20-21页 |
2.1.1 实验动物 | 第20页 |
2.1.2 试剂 | 第20页 |
2.1.3 仪器 | 第20页 |
2.1.4 生物软件 | 第20-21页 |
2.2 实验方法 | 第21-29页 |
2.2.1 引物的设计 | 第21页 |
2.2.2 提取总RNA | 第21-22页 |
2.2.3 RNA凝胶电泳(甲醛变性的琼脂糖凝胶电泳) | 第22-23页 |
2.2.4 反转录(RT) | 第23页 |
2.2.5 聚合酶链式反应(PCR) | 第23-24页 |
2.2.6 琼脂糖凝胶电泳 | 第24页 |
2.2.7 纯化回收PCR产物 | 第24页 |
2.2.8 感受态细胞的制备 | 第24-25页 |
2.2.9 测定感受态细胞转化效率 | 第25页 |
2.2.10 连接T载体 | 第25页 |
2.2.11 转化 | 第25-26页 |
2.2.12 提取质粒 | 第26页 |
2.2.13 阳性克隆检测 | 第26-27页 |
2.2.14 史氏鲟IgH可变区Southern blotting检测 | 第27-29页 |
3 实验结果 | 第29-34页 |
3.1 提取总RNA | 第29页 |
3.1.1 史氏鲟总RNA的提取 | 第29页 |
3.1.2 6种鲟科鱼类总RNA的提取 | 第29页 |
3.2 RT-PCR扩增结果 | 第29-30页 |
3.2.1 史氏鲟免疫球蛋白重链可变区扩增结果 | 第29页 |
3.2.2 6种鲟鱼免疫球蛋白重链恒定区扩增结果 | 第29-30页 |
3.3 连接转化后阳性克隆检测的结果 | 第30-32页 |
3.3.1 连接转化结果 | 第30页 |
3.3.2 史氏鲟免疫球蛋白重链可变区阳性克隆检测结果 | 第30-31页 |
3.3.3 6种鲟鱼免疫球蛋白重链恒定区阳性克隆检测结果 | 第31-32页 |
3.4 史氏鲟IgH可变区Southern blotting结果 | 第32-34页 |
3.4.1 血液红细胞基因组DNA提取结果 | 第32页 |
3.4.2 探针制备结果 | 第32页 |
3.4.3 Southern blotting杂交结果 | 第32-34页 |
4 数据分析 | 第34-39页 |
4.1 史氏鲟Ig重链可变区序列数据分析 | 第34-36页 |
4.1.1 史氏鲟Ig重链可变区cDNA序列分析 | 第34页 |
4.1.2 史氏鲟IgH可变区氨基酸序列分析 | 第34-36页 |
4.1.3 Southern blot分析 | 第36页 |
4.2 6种鲟科鱼类Ig重链恒定区序列数据分析 | 第36-39页 |
4.2.1 Ig重链恒定区氨基酸序列分析 | 第36-37页 |
4.2.2 Ig重链恒定区氨基酸序列性质及功能分析 | 第37-38页 |
4.2.3 6种鲟科鱼类Ig重链CH4区氨基酸变异期望值及物种分化时间的计算 | 第38-39页 |
5 实验结果讨论 | 第39-44页 |
5.1 史氏鲟Ig重链可变区序列讨论分析 | 第39-41页 |
5.2 6种鲟科鱼类Ig重链恒定区序列讨论分析 | 第41-44页 |
结论 | 第44-45页 |
参考文献 | 第45-56页 |
攻读学位期间发表的学术论文 | 第56-57页 |
致谢 | 第57-58页 |
独创性声明 | 第58页 |
学位论文版权使用授权书 | 第58页 |